冬虫夏草连续深层发酵液和发酵粉的生产方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及冬虫夏草技术领域，更具体而言，涉及冬虫夏草连续深层发酵液和发 酵粉的生产方法。
【背景技术】
[0002] 冬虫夏草是一种特殊虫和真菌共生的生物体，其菌丝体通过各种方式感染蝙蝠蛾 (鳞翅目蝙蝠蛾科蝙蝠蛾属昆虫）的幼虫，以其体内的有机物质作为营养能量来源进行寄生 生活，经过不断生长发育和分化后，最终菌丝体扭结并形成子座伸出寄主外壳，从而形成的 一种特殊的虫菌共生的生物体。入药部位为菌核和子座的复合体。冬虫夏草首次记载使用 是清代吴仪洛《本草丛新》，书中认为冬虫夏草性味甘，温。功能补肺益肾，化痰止咳。可用 之于久咳虚喘，产后虚弱、阳痿阴冷等"虚"的病症。据研究：冬虫夏草主要含有冬虫夏草素、 冬虫夏草酸、腺苷和多糖等成分；冬虫夏草素能抑制链球菌、鼻疽杆菌炭疽杆菌等病菌的生 长，又是抗癌的活性物质，对人体的内分泌系统和神经系统有好的调节作用；虫草酸能改变 人体微循环，具有明显的降血脂和镇咳祛痰作用；虫草多糖是免疫调节剂，可增强机体对病 毒及寄生虫的抵抗力。由于优质天然虫草产量极其有限，无法满足需求，货源奇缺，价格昂 贵，为满足广大消费者的需求，有必要对现有技术进行改进。
【发明内容】
[0003] 为了克服现有技术中所存在的不足，提供一种冬虫夏草连续深层发酵液和发酵粉 的生产方法。
[0004] 为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为： 冬虫夏草连续深层发酵液和发酵粉的生产方法，按照以下步骤进行： a、 伴生菌和冬虫夏草的母种纯化； b、 伴生菌和冬虫夏草的发酵罐菌种培养； c、 混合连续深层发酵； d、 发酵液的制备； e、 发酵粉的制备。
[0005] 所述a步骤中伴生菌母种纯化按照以下方式进行：1)配制原料；2)制作培养基；3) 分装试管；4)塞皮塞；5)试管包扎；6)培养基灭菌；7)摆放斜面；8)检查灭菌效果；9)母种 接种；10)培养菌种； 上述配制原料具体为：按照下列组分分别进行配置，蔗糖50g/L，胰蛋白胨10g/L， 酵母提取物 3g/L，无机离子(初始 pH 为 5. 6-6. 0) :0· 3g CaC12 · 2H20、lg ΚΗ2Ρ04、0· 5g MgS04*7H20、lg NaCl、0.01g CuS04*5H20、0.01g FeS04*7H20、0.01g MnC12*4H20、0.01g ZnC12 ;无机离子可配成IOX母液在4°C保存，马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂18-20克， PH自然； 上述制作培养基具体为：选择优质的马铃薯，去皮，挖去芽眼，削掉青绿部分，切成长 0. 5毫米的薄片，称取200克，加水1000毫升，煮沸后微火保持30分钟，马铃薯煮熟而不酥， 即8成熟左右，然后用2层沾湿纱布过滤，之后加入琼脂继续加热，并不断用玻璃棒搅拌至 琼脂完全溶化，最后依次加入蔗糖、葡萄糖、胰蛋白胨、酵母提取物、无机离子，继续加热并 搅拌至全部溶化，最后用清水补足至1000毫升，即可进行分装。
[0006] 所述a步骤中冬虫夏草母种纯化按照以下方式进行：1)配制原料；2)制作培养基； 3)接种；4)培养； 上述配制原料具体为：按照下列组分分别进行配置，麦麸50克，马铃薯200克，葡萄糖 20克，蛋白胨5克，琼脂18 - 20克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.75克，PH自然； 上述制作培养基具体为：将马铃薯加入1000 ml的水中，煮沸后微火保持30分钟，然后 用双层沾湿纱布过滤，之后加入琼脂继续加热，并不断用玻璃棒搅拌至琼脂完全溶化，再依 次加入麦麸、葡萄糖、磷酸二氢钾、蛋白胨、硫酸镁，继续加热并搅拌至全部溶化，最后用清 水补足至1000毫升，完成培养基制作。
[0007] 所述b步骤中伴生菌发酵罐菌种培养按照以下方式进行：1)配制原料；2)制作； 3)接种；4)培养； 上述配制原料具体为：按照下列组分分别进行配置，蔗糖50g/L，胰蛋白胨10g/L，酵 母提取物38/1，无机离子（初始？!1为5.6-6.0):0.3 8〇3(：12,2!120、18诎2?04、0.58 MgS04*7H20、lg NaCl、0.01g CuS04*5H20、0.01 g FeS04*7H20、0.01g MnC12*4H20、0.01g ZnC12 ;无机离子可配成IOX母液在4°C保存，马铃薯200克，葡萄糖20克，PH自然； 上述制作为：将以上配方制成液体培养基，装入1000 ml摇瓶，放入搅拌子，塞好瓶口， 包上防潮纸，放入灭菌锅，封好锅口，打开放气阀，当有大量蒸气排出时关闭放气阀，温度升 至121°C _123°C，时间持续为30分钟，然后让其自然冷却，压力回零时，打开灭菌锅盖取出 液体瓶。
[0008] 所述b步骤中冬虫夏草发酵罐菌种培养按照以下方式进行：1)配制原料；2)制作； 3)接种；4)培养； 上述配制原料具体为：按照下列组分分别进行配置，麦麸50克，马铃薯200克，葡萄糖 20克，蛋白胨5克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.75克，PH自然； 上述制作为：将以上配方制成液体培养基，装入1000 ml摇瓶，放入搅拌子，塞好瓶口， 包上防潮纸，放入灭菌锅，封好锅口，打开放气阀，当有大量蒸气排出时关闭放气阀，温度升 至121°C _123°C，时间持续为30分钟，然后让其自然冷却，压力回零时，打开灭菌锅盖取出 液体瓶。
[0009] 所述C步骤按照以下方式进行：1)发酵罐灭菌处理；2)混合连续深层发酵液体培 养基；3)装料灭菌；4)接种；5)混合发酵液体的培养； 上述混合连续深层发酵液体培养基按照下列组分进行配置，蔗糖50g/L，胰蛋白胨 l〇g/L，酵母提取物 3g/L ;无机离子(初始 pH 为 5. 6-6. 0) :0· 3g CaC12 · 2H20、Ig KH2P04、 0.5g MgS04*7H20、lg NaCl，0.01g CuS04*5H20、0.01g FeS04*7H20、0.01g MnC12*4H20、 0.0 lg ZnC12,无机离子可配成IOX母液在4°C保存，马铃薯200克，葡萄糖20克，PH自然； 上述接种是将培养好的伴生菌发酵菌种与冬虫夏草发酵菌种进行混合接种。
[0010] 所述d步骤按照以下方式进行：使用过滤机在温度25~28°C开始过滤，回流过滤 液10分钟，收集澄清的滤液，即得冬虫夏草发酵液；过滤所得的液体经超高温瞬时杀菌机 杀菌，杀菌温度（ll〇±5) °C，时间10秒，杀菌过的液体放至暂存罐急速冷却到50~55°C， 进行浓缩；在真空度〇. 096~0. 099兆帕、液体温度50~55°C、蒸汽压力0. 196~0. 294兆 帕下浓缩，浓缩至可溶性固形物达42%~45%后进行二次杀菌；将浓缩好的液体用液体灌 装机将液体装入专用瓶(袋）中，然后在90°C杀菌30分钟；将成品在-18~-25°C冷库中恒 温冷藏。
[0011] 所述e步骤按照以下方式进行：把过滤后的发酵固形物用低温冻干设备全部干燥 后，再用低温磨粉设备磨成120目的细粉，即得冬虫夏草发酵粉，再进行真空包装保存。
[0012] 与现有技术相比本发明所具有的有益效果为： 本发明在通过对青藏高原的野生冬虫夏草菌种分离、提纯，并通过连续深层发酵技术， 提取出人工发酵的虫草液和虫草粉。多项关键指标都超过天然的冬虫夏草，并具有质量稳 定药效的特性。所含的虫草硒是抗癌、抗氧化生理活性中极其重要的微量元素之一，在虫草 素中达0. 21gm，远高于天然虫草的0. 0049gm。核苷是虫草中的主要有效成分之一，具有抗 癌、抗病毒、抗菌等作用，优等天然虫草可达〇. 1%数量级，虫草素甚至可达〇. 30%。天然虫草 与虫草素菌丝氨