解淀粉芽孢杆菌b-1619在防治根结线虫病害中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物防治领域，特别是解淀粉芽孢杆菌B-1619在防治根结线虫病害 中的应用。
【背景技术】
[0002] 设施蔬菜是指在大棚、温室、小拱棚、或者地膜覆盖条件下种植的蔬菜，已成为现 代农业生产中的支柱产业和农民增收的主要途径。近年来，随着设施蔬菜种植面积的增大 和连年种植，设施蔬菜根结线虫呈逐年加重趋势，并上升为蔬菜生产上的重要病害。根结 线虫（Meloidogyne)是一种高度专化型的杂食性植物病原线虫，可侵染3000多种植物，危 害多种蔬菜作物，如黄瓜、丝瓜、豇豆、菜豆、茄子、辣椒、番茄及十字花科蔬菜。一般年份可 减产10%-5%，严重时达30%-40%，甚至造成绝收，严重影响设施农业的可持续发展和农民致 富。目前国内尚无推广应用的抗根结线虫的蔬菜品种，对根结线虫缺乏直接有效的防控手 段。生产上防治设施蔬菜根结线虫主要采取"化学农药处理土壤+夏季闷棚"的措施，但防 治效果不理想，根结线虫发生依然严重。用于防治设施蔬菜根结线虫的化学药剂有：阿维菌 素、噻唑膦、硫线磷等，然而在土壤中大量使用化学药剂防治根结线虫，导致蔬菜品质下降， 有毒化学物质超标，对人类健康带来严重危害。因此，必须突破目前设施蔬菜根结线虫以化 学农药为主的防治对策，开拓以生物农药为核心的无公害综合防治设施蔬菜根结线虫的技 术体系，为无公害优质蔬菜的产业化生产提供核心保障技术。
[0003] 为了达到有效控制设施蔬菜根结线虫、减少化学农药的使用量的目的，使用 生物防治控制设施蔬菜根结线虫的方法越来越受到各国政府和人民的关注，并初见 成效。国内外学者研宄发现，对植物根结线虫有防效的根际细菌有：荧光假单胞菌 (/7Wore1Scefl 1S)、球形芽抱杆菌（、枯草芽抱杆菌 (ifeciBws 放射形土壤杆菌rat/ioAacier)及致金色假单胞菌 atfreo/aciefls)等，Siddiqui等研宄证实了焚光假单胞菌CHAO的培养上清 液可以抑制线虫卵的孵化，在根结线虫生物防治中的具有重要作用；Ojyekanmi等从作物 根际土壤中分离出了多种微生物并对其促进植物生长和抑制植物根结线虫的能力进行测 定筛选，研宄表明大多数有益微生物能够抑制线虫，且有助于防治根结线虫；余子全等通过 对苏云金芽孢杆菌晶体蛋白对根结线虫的毒性进行生物测定，发现菌株YBT-1532对根结 线虫有抗性，并且指出Bt菌株YBT-1532可以用于防治植物根结线虫；Mohammed等研宄了 10种Bt伴胞晶体蛋白的分离产物对根结线虫的杀虫活性，指出Bt7N，BtDen，Btl8, BtK73， BtSoto和Bt7具有较高杀虫活性，对线虫的致死率在86% -100%范围内，Bt7N的粗提液对 卵孵化的抑制率分别是78%和77%。
[0004] 解淀粉芽孢杆菌是土壤和植物微生态区系的优势生物种群，无毒、无致病性， 对人畜安全；因其能够产生耐热、耐旱、抗紫外线和有机溶剂的芽孢，所以是理想的生 防菌筛选对象，许多性状优良的菌株已成功应用于植物病害的生物防治，如专利号为 "201210208366. 9"的中国专利公开了一种保藏号为CGMCC No. 4671的解淀粉芽孢杆菌 B-1619,并将其应用于茄科蔬菜土传病害的防治，但是目前利用解淀粉芽孢杆菌防治设施 蔬菜根结线虫未见报道。
【发明内容】
[0005] 针对设施蔬菜根结线虫发生面积日益扩大，对蔬菜的质量和数量造成越来越大的 影响，同时化学药剂防治效果差、并导致设施生态环境污染的实际情况，提出一种解淀粉芽 孢杆菌B-1619在防治设施蔬菜根结线虫病害中的应用，本发明是这样实现的： 一种解淀粉芽孢杆菌B-1619在防治根结线虫病害中的应用。
[0006] 进一步，本发明所述应用是指：将含菌量至少为I. 2X108cfu/mL的解淀粉芽孢杆 菌B-1619水分散粒剂，用以防治设施蔬菜根结线虫病害； 所述水分散粒剂配伍为，以质量百分数计，粘结剂6%、分散剂4%、崩解剂10%、润湿剂 2%、20%的解淀粉芽孢杆菌B-1619生防菌菌液，余料为填料。
[0007] 进一步，本发明中，所述粘结剂为硅酸镁错，所述分散剂为萘磺酸盐甲醛，所述崩 解剂为硫酸铵，所述润湿剂为十二烷基硫酸钠，所述填料为高岭土。
[0008] 进一步，本发明所述应用的具体方法为：定植前，在设施大棚的田垄中开定植穴， 将解淀粉芽孢杆菌B-1619水分散粒剂洒在定植穴中，3_8g/穴，然后移植穴盘苗，每穴一 株；定植后，在常规第一次和第二次浇水前，再分别将解淀粉芽孢杆菌B-1619水分散粒剂 撒入植株根部，3-8g/棵。
[0009] 进一步，本发明中，所述解淀粉芽孢杆菌B-1619水分散粒剂是这样获得的：将除 解淀粉芽孢杆菌B-1619生防菌菌液外的所有物料投入槽型混合机中，以24rpm的速率混 合9-10min ;然后将物料放入双螺旋型混合机，加入解淀粉芽孢杆菌B-1619生防菌菌液，以 1460 rpm的速率搅拌混合2-3min ;再将混合后的物料放入旋转式造粒剂机中挤压造粒，颗 粒的粒径为1. 0-1. 5mm ;造粒后放入流化床制粒包衣机中烘干25-30min，进风温度55°C，出 风温度25°C ;最后通过振动筛，筛选得到解淀粉芽孢杆菌B-1619水分散粒剂。
[0010] 本发明利用解淀粉芽孢杆菌定殖至植物根际体表或体内，与根结线虫竞争植物周 围的营养、分泌抗虫物质，恶化根结线虫的生存环境以抑制根结线虫生长、同时诱导植物防 御系统抵御线虫入侵，操纵管理番茄、黄瓜等植株根叶围生态环境中微生物群落的合理分 布，形成一个生物多样化的设施农作物生态系统，从而达到生防的目的；经检测，淀粉芽孢 杆菌生防菌株B-1619水分散粒剂对设施蔬菜根结线虫有良好的防治效果，无毒无致病性， 对人畜安全，不污染环境，可以有效地、持久地设施蔬菜根结线虫的发生与流行。
【具体实施方式】
[0011] 实施例1解淀粉芽孢杆菌B-1619水分散粒剂的制备 原料：以质量百分比计，粘结剂硅酸镁铝6%、分散剂NN04%、崩解剂硫酸铵10%、润湿剂 十二烷基硫酸钠、解淀粉芽孢杆菌B-1619生防菌菌液30%，余料为高岭土。
[0012] 制备方法：将除解淀粉芽孢杆菌B-1619生防菌菌液外的所有原料投入到槽型 混合机（DH-200)中，速率