一种利用乙酸反式-2-乙烯酯增效的暗黑鳃金龟性诱剂的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种利用植物源物质增效的昆虫性诱剂，具体地说，涉及一种利用乙 酸反式-2-乙烯酯增效的暗黑鳃金龟性诱剂。
【背景技术】
[0002] 暗黑鲍金龟（Holotrichia parallela)属鞘翅目（Coleoptera)金龟甲总科 (Scarabaeoidea)鲍金龟科（Melolonthidae)，是农林牧业生产中一类重要的土栖害虫。其 幼虫蛴螬危害花生、大豆、地瓜、玉米、草坪、花丼、蔬菜等多种作物，常造成巨大的经济损失 (胡琼波，2004 ;刘树森等，2008)。以花生为例，近几年全国各地的花生蛴螬发生数量呈逐 年上升趋势，对花生生产造成严重危害，一般受害减产10-20 %，严重者50-80 %，甚至颗粒 无收（李晓等，2012)。由于暗黑鳃金龟长期在地下活动，因此对其进行防控有一定的困难 性，现阶段仍以化学防治为主。此外，农药残留，环境污染等诸多问题存在，使我们迫切需要 一种绿色无污染的新型途径来防治害虫。
[0003] 近几年昆虫性信息素的使用为害虫防治提供了一条新的途径。采用昆虫性信息 素进行害虫监测和无公害防治具有活性高、特异性强、无毒、无污染、不杀伤天敌、使用简 便、成本低廉等优点（Nehme et al.，2009;Nehme et al.，2010;王桂花等，2013)。山东省 花生研宄所对我国暗黑鳃金龟的性信息素进行了研宄，自主研发了暗黑鳃金龟性诱剂诱 芯及配套诱捕器，并在田间取得了良好的诱虫效果（Brockerhoff et al.，2006 ;Zhou et al.，2009 ;李晓等，2012)。但是性诱剂存在特异性引诱雄虫、诱集时间短等问题（Reddy and Guerrero, 2004 ;Sa'id et al.，2005)。近年来，随着人们对昆虫与植物间化学相互作用的 认识日益深化，利用化学生态原理，运用植物次生代谢产物等功能化合物调节、控制有害生 物以保护目标植物的研宄得到了长足的发展（Dickens et al.，1993 ;Dodds, 2011 ;杨慧等， 2008 ;杨朗等，2004)。植物源挥发物和昆虫信息素是昆虫的重要信息物质，二者协同作用以 调节昆虫的行为（Deng et al.，2004a ;Hanks and Millar, 2012a ;Jung et al.，2013)。通 过增加触角电位、信息素接收神经元动作电位和脉冲频率，特异性植物源挥发物能显著增 强昆虫性信息素的引诱力（Reddy and Guerrero, 2004;王振华等，2008)。研宄表明，寄主 植物自身产生并释放的次生物质能调控植食性昆虫多种行为，诸如定向、交配产卵、取食、 逃避、聚集、传粉等行为（Fettig et al·，2012, Lait et al·，2003 ;Pan et al·，2013;吴 利民等，2012)。但前期有关昆虫引诱剂的研宄主要集中在植物源挥发物与昆虫信息素在 害虫防治中的单方面应用（Negri and Bernik, 2008 ;Szendrei et al·，2011，Tooker et al.，2002)。近年来许多文献报道，植物源物质与昆虫信息素协同对昆虫行为起调控作用， 证明植物源挥发物对试虫性诱剂有显著增效作用（Douglas et al，. 1993 ;鲁玉杰等，2003 ; 王桂花等，2013)。
[0004] 用性信息素或性诱剂防治害虫是一种无公害防治害虫的新技术。虽然国内外已有 数百种昆虫性诱剂得以应用，曲明静在申请号为200910162405. 4的中国专利中申请了一 种暗黑鳃金龟性信息素及性诱剂，如何在此基础上，将植物源物质与昆虫信息素协同对昆 虫行为起调控作用，实现试虫性诱剂有显著增效作用，是本发明要解决的技术问题。
【发明内容】
[0005] 为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供对暗黑鳃金龟性诱剂有 增效作用的一种植物诱剂成分一乙酸反式-2-乙烯酯，乙酸反式-2-乙烯酯能引起雌雄虫 较强的电位反应和嗅觉反应；暗黑鳃金龟田间诱集试验显示乙酸反式-2-乙烯酯对性诱剂 存在协同增效作用，为协同利用植物挥发性物质和昆虫性信息素来监控和防治暗黑鳃金龟 提供了依据。
[0006] 本发明采取的技术方案为：
[0007] -种利用乙酸反式-2-乙烯酯增效的暗黑鳃金龟性诱剂，其特征在于，性诱剂与 乙酸反式-2-乙烯酯的重量比为（3-7) : 1，所述性诱剂包括暗黑鳃金龟性信息素组分和有 机溶剂，所述暗黑鳃金龟性信息素组分包括L-异亮氨酸甲酯、（R)芳樟醇和1-氨基 环己烷甲酸，其重量配比为6:1:0. 1，并且所述的暗黑鳃金龟性信息素组分和有机溶剂重量 比为1:3,所述的有机溶剂为二氯甲烷、甲醇或丙酮中的一种或几种。
[0008] 利用乙酸反式-2-乙烯酯增效的暗黑鳃金龟性诱剂的触角电位反应试验方法，其 特征在于，具体包括如下步骤：
[0009] (1)刺激样品的配制
[0010] 植物源挥发物单剂的配制：各化合物均用甲醇作溶剂，配置成〇. 1，1，IOyg/μ 1 3个浓度，以甲醇作对照；
[0011] 植物源挥发物与性诱剂混剂的配制：本发明将信息素组分L-异亮氨酸甲酯、 (R)芳樟醇和1-氨基环己烷甲酸按照重量配比为6:1:0. 1比例混合配制成暗黑鳃金 龟性诱剂，以lyg/μL的母液，按照性诱剂：植物源挥发物=1:1、3:1、5:1、7 :1、9:1的比 例混合，所配混剂用于室内电生理及行为测试；
[0012] (2)触角处理及EAG测试程序
[0013] 用微量进样器抽取IOul各化学试剂样品，滴加到对折滤纸片上（25mmX8mm)，待 试剂挥发5min后用镊子将滤纸片放入巴斯德管中，封口膜封住巴斯德管两端，样品在管中 挥发5min后测定，刺激历期为500ms，刺激间隔约30s，持续气流的流速与刺激气流的流速 同为4mL/s，每头虫只取用1根触角，每个处理测试6根触角，每根触角重复3次，对照与处 理组的测定交替进行，以甲醇为空白对照。
[0014] 进一步的，所述的性诱剂：乙酸反式-2-乙烯酯为3:1时组成的混剂，雌虫的昆虫 触角电位信号（EAG)反应值为4. 383±0. 13mV。
[0015] 进一步的，所述的性诱剂：乙酸反式-2-乙烯酯为5:1时组成的混剂，雄虫的昆虫 触角电位信号（EAG)反应值为7. 64±0. 59mV。
[0016] 利用乙酸反式-2-乙烯酯增效的暗黑鳃金龟性诱剂的嗅觉反应测试方法，其特征 在于，具体包括如下步骤：
[0017] (1)刺激样品的配制
[0018] 植物源挥发物单剂的配制：各化合物均用甲醇作溶剂，配置成0. 1，1，10 μ g/ μ 13 个浓度，以甲醇作对照；
[0019] 植物源挥发物与性诱剂混剂的配制：本发明将信息素组分L-异亮氨酸甲酯、 (R)芳樟醇和1-氨基环己烷甲酸按照重量配比为6:1:0. 1比例混合配制成暗黑鳃金 龟性诱剂，以lyg/μL的母液，按照性诱剂：植物源挥发物=1:1、3:1、5:1、7:1、9:1的比 例混合，所配混剂用于室内电生理及行为测试；
[0020] (2)通过"Y"型嗅觉仪测定暗黑鳃金龟对各种试剂的敏感性大小，嗅觉仪置于暗 室，室温27°C，空气流速500mL/min，试验中取IOul各试剂滴加在滤纸条上，并放入"Y"型 管侧臂进气口处，甲醇做对照，每组重复后对调试验组和对照组位子，避免试验误差；每次 试验后换新的滤纸条，每种试剂3次重复，同种试剂测完后更换"Y"型管，用过的"Y"型管 用丙酮清洗，60°C烘干；每组试验挑取10头当日出土且活性强的试虫，放入"Y"型管主臂端 口，IOmin后观察试虫分布情况，并计算反应率、相对反应率、反应系数进行数据分析；
[0021] 反应率=[(味源管中虫数+对照管中虫数）/测试总虫数];
[0022] 选择反应率=[味源管中虫数八味源管中虫数+对照管中虫数）]。
[0023] 进一步的，所述的性诱剂：乙酸反式-2-乙烯酯为3:1和5:1时