本发明属于多肉植物栽培技术领域,具体涉及一种芦荟的组培快繁方法。
背景技术:
多肉植物(succulent)这一概念由瑞士植物学家琼·鲍汉提出,最早主要指具有肥厚多汁的茎、根或叶片的一类植物,园艺上一般还称为多肉花卉。多肉植物品种多样,管理粗放,抗逆性强,加之色彩丰富,具有一定的空气净化功能,是深受广大消费者喜爱的景观植物之一。近年来由于多肉植物需求量增加与其繁殖量小的矛盾日益凸显,因此,高效大量的繁殖是解决上述问题的重要途径。
芦荟(aloeveral.)为百合科(liliaceae)芦荟属多年生常绿多肉质草本植物,含有许多对人体有益的物质,尤其对各种灼伤、烫伤、晒伤及皮肤病有明显疗效,并具有较高的观赏价值,是集药用、食用、美容及观赏等于一身的热带植物,是一种很有开发应用前景的经济作物。芦荟植株要生长数年后才开花结实,加之雌雄花开放时间不一致,故种子很少。芦荟种子很细小,存放一年发芽率即降低,一般是采后及时播种。但是,用种子育苗手续繁杂,生产上多用插枝法或分株法繁殖,这些方法繁殖速度很慢,而且容易积累病菌,影响生长,甚至造成退化。利用组织培养技术,通过试管繁殖可达到复壮、快繁的目的,但是如果提高可重复性和繁殖效率,需要进一步研究。
技术实现要素:
本发明的目的是解决现有组培方法可重复性低、繁殖效率差的技术问题,提供一种芦荟的组培快繁方法。
一种芦荟的组培快繁方法,包括以下步骤:
步骤1,外植体的选择与消毒:取芦荟顶芽,用清水洗净后进行消毒灭菌处理;
步骤2,愈伤组织培养:将步骤1所得顶芽接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养形成愈伤组织,继续培养,形成丛生苗;
步骤3,分化培养:将步骤2所得丛生苗接种到分化培养基上进行培养形成丛苗;
步骤4,生根培养:将步骤3所得丛苗接种到生根培养基上进行培养完成生根形成幼苗;
步骤5,移苗移栽:将步骤4所得幼苗移栽,即可;
所述愈伤组织诱导培养基是由ms、0.3-0.9mg/l6-苄氨基腺嘌呤、0.04-0.12mg/l萘乙酸、0.02-0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.02-0.05wt.%水杨酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成;
所述分化培养基是由ms、0.3-0.9mg/l6-苄氨基腺嘌呤、0.08-0.2mg/l萘乙酸、0.02-0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.02-0.05wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成;
所述生根培养基是由ms、0.2-0.5mg/l吲哚丁酸、0.01-0.03wt.%水杨酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成。
优选地,步骤1中消毒灭菌处理是将芦荟顶芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸钠水溶液中浸泡3-5min,最后用无菌水冲洗。
优选地,步骤2中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
优选地,步骤3中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
优选地,步骤4中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
优选地,步骤5中移栽采用的基质是由泥炭土、蛭石、腐殖土、锯末组成,泥炭土、蛭石、腐殖土、锯末的重量比为1-2:1-2:1-2:1-2。
采用本发明的组培快繁方法,可大量快繁芦荟,实现产业化生产。
具体实施方式
实施例1
一种芦荟的组培快繁方法,包括以下步骤:
步骤1,外植体的选择与消毒:取芦荟顶芽,用清水洗净后进行消毒灭菌处理;
步骤2,愈伤组织培养:将步骤1所得顶芽接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养形成愈伤组织,继续培养,形成丛生苗;
步骤3,分化培养:将步骤2所得丛生苗接种到分化培养基上进行培养形成丛苗;
步骤4,生根培养:将步骤3所得丛苗接种到生根培养基上进行培养完成生根形成幼苗;
步骤5,移苗移栽:将步骤4所得幼苗移栽,即可;
所述愈伤组织诱导培养基是由ms、0.3mg/l6-苄氨基腺嘌呤、0.04mg/l萘乙酸、0.02mg/l3-吲哚乙酸、0.02wt.%水杨酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成;
所述分化培养基是由ms、0.3mg/l6-苄氨基腺嘌呤、0.08mg/l萘乙酸、0.02mg/l3-吲哚乙酸、0.02wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成;
所述生根培养基是由ms、0.2mg/l吲哚丁酸、0.01wt.%水杨酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成。
其中,步骤1中消毒灭菌处理是将芦荟顶芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸钠水溶液中浸泡3-5min,最后用无菌水冲洗。
步骤2中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
步骤3中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
步骤4中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
步骤5中移栽采用的基质是由泥炭土、蛭石、腐殖土、锯末组成,泥炭土、蛭石、腐殖土、锯末的重量比为1:1:1:1。
采用上述方法的成活率在63%。
实施例2
一种芦荟的组培快繁方法,包括以下步骤:
步骤1,外植体的选择与消毒:取芦荟顶芽,用清水洗净后进行消毒灭菌处理;
步骤2,愈伤组织培养:将步骤1所得顶芽接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养形成愈伤组织,继续培养,形成丛生苗;
步骤3,分化培养:将步骤2所得丛生苗接种到分化培养基上进行培养形成丛苗;
步骤4,生根培养:将步骤3所得丛苗接种到生根培养基上进行培养完成生根形成幼苗;
步骤5,移苗移栽:将步骤4所得幼苗移栽,即可;
所述愈伤组织诱导培养基是由ms、0.5mg/l6-苄氨基腺嘌呤、0.08mg/l萘乙酸、0.03mg/l3-吲哚乙酸、0.04wt.%水杨酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成;
所述分化培养基是由ms、0.6mg/l6-苄氨基腺嘌呤、0.13mg/l萘乙酸、0.03mg/l3-吲哚乙酸、0.04wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成;
所述生根培养基是由ms、0.4mg/l吲哚丁酸、0.02wt.%水杨酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成。
其中,步骤1中消毒灭菌处理是将芦荟顶芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸钠水溶液中浸泡3-5min,最后用无菌水冲洗。
步骤2中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
步骤3中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
步骤4中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
步骤5中移栽采用的基质是由泥炭土、蛭石、腐殖土、锯末组成,泥炭土、蛭石、腐殖土、锯末的重量比为1:2:2:1。
采用上述方法的成活率在68%。
实施例3
一种芦荟的组培快繁方法,包括以下步骤:
步骤1,外植体的选择与消毒:取芦荟顶芽,用清水洗净后进行消毒灭菌处理;
步骤2,愈伤组织培养:将步骤1所得顶芽接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养形成愈伤组织,继续培养,形成丛生苗;
步骤3,分化培养:将步骤2所得丛生苗接种到分化培养基上进行培养形成丛苗;
步骤4,生根培养:将步骤3所得丛苗接种到生根培养基上进行培养完成生根形成幼苗;
步骤5,移苗移栽:将步骤4所得幼苗移栽,即可;
所述愈伤组织诱导培养基是由ms、0.9mg/l6-苄氨基腺嘌呤、0.12mg/l萘乙酸、0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.05wt.%水杨酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成;
所述分化培养基是由ms、0.9mg/l6-苄氨基腺嘌呤、0.2mg/l萘乙酸、0.05mg/l3-吲哚乙酸、0.05wt.%赤霉素、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成;
所述生根培养基是由ms、0.2mg/l吲哚丁酸、0.03wt.%水杨酸、3wt.%乳糖和0.75wt.%琼脂组成。
其中,步骤1中消毒灭菌处理是将芦荟顶芽置于70v/v%乙醇溶液中浸泡20-30s后再置于5wt.%次氯酸钠水溶液中浸泡3-5min,最后用无菌水冲洗。
步骤2中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
步骤3中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
步骤4中培养条件为温度25±2℃、光照强度1000-1200lux、光照时间为12-16h/d、相对湿度50-60%。
步骤5中移栽采用的基质是由泥炭土、蛭石、腐殖土、锯末组成,泥炭土、蛭石、腐殖土、锯末的重量比为1-2:1-2:1-2:1-2。
采用上述方法的成活率在66%。