本发明涉及铁皮石斛种植技术领域,尤其是一种铁皮石斛的组培快繁方法。
背景技术:
铁皮石斛为兰科石斛属植物,是传统名贵中药材。《神农本草经》中将石斛列为上品,具有益胃生津,滋阴清热,止咳润肺的功效。现代药理研究表明,石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的作用。近年来,随着人们对铁皮石斛的了解越来越多,对铁皮石斛的需求日趋增加,而石斛自然繁殖力极低,种子需与真菌共生才能萌发,加上长期采挖,稀缺的野生资源日益枯竭,成为濒危植物,被列为国家重点保护的野生药材品种。
技术实现要素:
本发明的目的是为了解决上述技术的不足而提供一种实现对铁皮石斛进行人工栽培的铁皮石斛的组培快繁方法。
为了达到上述目的,本发明所设计的一种铁皮石斛的组培快繁方法,(1)培养基的制备,量取800ml纯净水于洁净的大烧杯中,称取100g香蕉果肉,用榨汁机榨碎,并倒入大烧杯中加热至沸腾、搅拌混合均匀;按照大量、微量、铁盐、有机物的顺序分别量取MS各种母液导入大烧杯中,充分搅拌;再称取30g蔗糖,8g琼脂放入大烧杯,加热至琼脂完全溶解;加热结束后调节PH值至5.6-5.8,然后进行分装;分装后的培养基放入灭菌锅,在气压为0.1MP,温度121℃下灭菌30min,灭菌后将培养基取出冷却凝固备用;(2)外植株的选取和预处理,选取健康的铁皮石斛植株,以茎段为中心切下,芽的上下各留0.5cm的茎段,用洗衣粉溶液浸泡20min,取出后用自来水冲洗30min,备用;或者选取成熟饱满的果荚,用75%浓度的酒精擦拭后备用;(3)外植株的灭菌,将预处理后的茎段用75%的酒精溶液灭菌0.5min后用无菌水冲洗1次,将茎段腋芽的苞叶拔去,然后用0.1%浓度的升汞溶液灭菌10min,灭菌过程中不断摇动烧杯,最后用无菌水冲洗5次,备用;或者将预处理后的果荚用0.1%浓度的升汞溶液灭菌8min,最后用无菌水冲洗5次,备用;(4)接种,将灭菌后的茎段在超净工作台里接种到培养基中;或者将灭菌后的果荚在超净工作台上用刀将其割开,将果荚里的种子播种要培养基中;(5)培养环境的控制,将接种完成的茎段或种子放到无菌培养室内,前10天进行暗培养,10天后每天增加2小时的光照,光照强度控制在2000-3000lux,温度控制在23-27℃,湿度为50%。
本发明所得到的一种铁皮石斛的组培快繁方法,实现了铁皮石斛人工栽培,快速繁殖,极大的提高了铁皮石斛的产量。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步的描述。
实施例1:
本实施例描述的一种铁皮石斛的组培快繁方法,(1)培养基的制备,量取800ml纯净水于洁净的大烧杯中,称取100g香蕉果肉,用榨汁机榨碎,并倒入大烧杯中加热至沸腾、搅拌混合均匀;按照大量、微量、铁盐、有机物的顺序分别量取MS各种母液导入大烧杯中,充分搅拌,该步骤为现有技术;再称取30g蔗糖,8g琼脂放入大烧杯,加热至琼脂完全溶解;加热结束后调节PH值至5.6-5.8,然后进行分装;分装后的培养基放入灭菌锅,在气压为0.1MP,温度121℃下灭菌30min,灭菌后将培养基取出冷却凝固备用;(2)外植株的选取和预处理,选取健康的铁皮石斛植株,以茎段为中心切下,芽的上下各留0.5cm的茎段,用洗衣粉溶液浸泡20min,取出后用自来水冲洗30min,备用;或者选取成熟饱满的果荚,用75%浓度的酒精擦拭后备用;(3)外植株的灭菌,将预处理后的茎段用75%的酒精溶液灭菌0.5min后用无菌水冲洗1次,将茎段腋芽的苞叶拔去,然后用0.1%浓度的升汞溶液灭菌10min,灭菌过程中不断摇动烧杯,最后用无菌水冲洗5次,备用;或者将预处理后的果荚用0.1%浓度的升汞溶液灭菌8min,最后用无菌水冲洗5次,备用;(4)接种,将灭菌后的茎段在超净工作台里接种到培养基中;或者将灭菌后的果荚在超净工作台上用刀将其割开,将果荚里的种子播种要培养基中;(5)培养环境的控制,将接种完成的茎段或种子放到无菌培养室内,前10天进行暗培养,10天后每天增加2小时的光照,光照强度控制在2000-3000lux,温度控制在23-27℃,湿度为50%。
上述步骤(1)中的培养基则用于幼株生根的培养基。
实施例2:
本实施例描述的一种铁皮石斛的组培快繁方法,其与实施例1的区别在于:培养基中香蕉更换为马铃薯,其培养基用于原球茎的增殖和原球茎的分化。
实施例3:
本实施例描述的一种铁皮石斛的组培快繁方法,其与实施例1的区别在于:培养基中香蕉去除,其培养基用于原球茎的诱导。