一种乌塌菜细胞质雄性不育系及保持系的选育方法与流程

本发明属于十字花科芸薹属蔬菜新品种选育技术领域，涉及一种乌塌菜细胞质雄性不育系及保持系的选育方法。

背景技术：

乌塌菜是一种十字花科芸薹属叶用蔬菜，现在乌塌菜品种的选育方法通常有三种途径：一、常规品种；二、利用自交不亲和系为母本培育的杂种一代；三、采用细胞质雄性不育系为母本培育的杂种一代，其雄性不育胞质主要是ogu CMS和pol CMS。Ogu CMS常表现黄化现象，而pol CMS的育性容易受到温度的影响。在以雄性不育为主导的新品种选育中，长期的单一胞质类型容易造成发病率增加，进而影响作物产量。因此在以雄性不育系为母本的杂种优势利用中寻找和使用更多的细胞质雄性不育类型是育种家一项长期的工作内容。

技术实现要素：

为了克服现有技术的上述缺点，本发明提供一种乌塌菜细胞质雄性不育系及保持系的选育方法，它能够丰富乌塌菜中细胞质雄性不育系胞质类型，提高以细胞质雄性不育为母本的新品种选育安全性，本发明选育一种新的不育性稳定、彻底、不受温度及光照条件影响的乌塌菜细胞质雄性不育系，为乌塌菜杂种优势的利用提供新的种质资源。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种乌塌菜细胞质雄性不育系及保持系的选育方法，它以大白菜细胞质雄性不育系CMS65-7为母本，以保持系乌塌菜15-141为父本，杂交获得F₁，通过多代连续回交，结合栽培试验、抗性鉴定及育性鉴定得到了遗传稳定、抗病性强、生长性状优良的乌塌菜细胞质雄性不育系和保持系，繁殖该乌塌菜细胞质雄性不育系，得到的乌塌菜不育系CMS-72是不同于Ogu CMS、nap CMS、tour CMS的新型细胞质雄性不育系。具体选育步骤如下：

1、父本的选育

以韶关学院英东农业科学与工程学院多年选育的乌塌菜优良自交系10-222与10-327为亲本，通过常规育种手段结合抗病性鉴定及长势分析选育出15-141为父本材料；

2、母本的选育

Hau CMS是华中农业大学傅廷栋院士发现的一种不同于Ogu CMS、nap CMS、tour CMS新型细胞质雄性不育系，以该细胞质雄性不育系构建了大白菜细胞质雄性不育系（专利公开号为：CN 1849881A），本发明以该不育系材料CMS63-5为母本，进行不育系的选育；

3、不育系的选育

以CMS63-5为母本，15-141为父本，在抗病性鉴定及育性鉴定的基础上，采用拨蕾授粉方法获得F₁，再对F₁进行抗病性鉴定及育性鉴定，选择抗病性良好的不育单株为母本（非轮回亲本），15-141为父本（轮回亲本），经过8次回交获得BC₈F₁，将其命名为CMS-72，经育性鉴定为不育材料，表现型为抗病性强、长势优良的乌塌菜不育系；

4、乌塌菜不育系及保持系的扩繁

以CMS-72为母本，15-141为父本，以网罩扩繁的方式进行杂交，CMS-72收获的种子为不育胞质为hau CMS的乌塌菜不育系，15-141收获的种子为乌塌菜的保持系。

本发明的积极效果是：

（1）本发明的乌塌菜细胞质雄性不育系的不育性非常稳定和彻底，该不育系不受温度和光照条件影响，在中国韶关（短日照）和甘肃和政（长日照）连续4年8代种植的育性鉴定表明，其育性均表现0级，不育株率及不育度均为100%；

（2）本发明的乌塌菜细胞质雄性不育系没有任何死蕾和苗期黄化现象；

（3）选育出的不育系及保持系抗病性好，长势优良。

附图说明

图1为本发明选育过程结构示意图。

具体实施方式

参见图1，一种乌塌菜细胞质雄性不育系及保持系的选育及繁殖方法，它以大白菜细胞质雄性不育系CMS65-7为母本，以保持系乌塌菜15-141为父本，杂交获得F₁，通过多代连续回交，结合栽培试验、抗性鉴定及育性鉴定得到了遗传稳定、抗病性强、生长性状优良的乌塌菜细胞质雄性不育系和保持系，繁殖该乌塌菜细胞质雄性不育系，得到的乌塌菜不育系CMS-72是不同于Ogu CMS、nap CMS、tour CMS的新型细胞质雄性不育系。具体选育步骤如下：

一、父本的选育

1、将本单位选育的乌塌菜自交系10-222与10-327去雄杂交，得到F₁；

2、将F₁自交得到F₂，在F₂群体中进行抗病性试验及株型观察，选择抗病性好、株型优异的多个F₃单株进入下一步选育；

3、在F₃群体中，进一步进行抗病性试验及株型观察，选择优异F₄单株进行下一步选育；

4、在F₄单株中进行抗病性及株型观察试验，同时进行丰产性试验，选择抗病性好、株型及产量俱佳的F₅单株作为保持系，编号为15-141；

二、母本的选育

选用华中农业大学选育的大白菜细胞质雄性不育系（专利公开号为：CN 1849881A）为母本材料，经过育性鉴定及抗性试验、长势观察，选择长势优良、抗病性好的不育单株为母本，编号为CMS63-5；

三、乌塌菜不育系CMS-72的选育

1、以CMS63-5为母本，15-141为父本，采用人工拨蕾授粉的方法获得F₁，同时15-141套袋自交留种备用；

2、将F₁及15-141群体小区种植，进行抗病性试验、株型观察及育性鉴定，选择株型好、抗病性强同时不育的单株为母本，选择15-141中抗病性好，株型优良的单株为父本，采用人工拨蕾授粉方式进行杂交，获得BC₁F₁群体；

3、重复2中步骤，以BC₁F₁中不育单株为母本，15-141为父本，获得BC₂F₁群体；

4、重复3中步骤，以BC₂F₁中不育单株为母本，15-141为父本，获得BC₃F₁群体；

5、在回交8代的基础上，获得BC₈F₁不育群体，其编号为CMS-72；

四、乌塌菜不育系CMS-72及保持系的扩繁

1、将CMS-72及15-141隔行种植，行数比例为3:1，待初花期以网罩方法进行繁种；

2、分别收获CMS-72及15-141种子，第二年分别进行抗病性鉴定、长势测定及育性鉴定，结果CMS-72所收获的种子全部为不育单株，15-141上收获种子全部为可育单株，并长势好，抗病性强。CMS-72上所收获种子为本发明中的不育系，15-141上所收获种子为本发明中的保持系。