本发明涉及组培育苗的技术领域,尤其是一种白芨组培育苗的方法。
技术背景
白芨,别名白及、冰球子、地螺丝、利知子和连及草等，为兰科白芨属多年生草本植物。其块茎具有补肺、消肿、生肌、止血、敛疮等功效，用于治疗肺伤咳血、溃疡疼痛、汤火灼伤、手足开裂等症。近年来，白芨不仅作为传统中草药和观赏植物广泛运用，而且在化妆品的运用领域也日益受到重视。目前，白芨主要以采集野生自然资源为主，由于运用范围的不断扩大，其野生资源被过渡的采挖，储蓄量急剧的减少。白芨不易发芽，主要以一分为二的分株方式进行繁殖，不但繁殖率低、繁殖的速度慢，而且耗种量大，还与用药争夺原料。采用组织培养技术，可以快速培养大量种苗，以满足人工栽培的需要。
技术实现要素：
本发明需要解决的技术问题是针对上述技术问题提出的一种白芨组培育苗的方法。
为解决上述技术问题，本发明提供了一种白芨组培育苗的方法，包括如下步骤：S1：外植体的准备：选取新鲜的白芨侧芽，先用蒸馏水对侧芽进行清洗，再用洗洁精溶液浸泡10min～20min；然后将白芨侧芽用蒸馏水洗净，置于80％的酒精浸泡1～2min,最后用0.2％的生汞溶液进行灭菌10～15min，经过灭菌后的白芨侧芽再用无菌水清洗3～5次，用消毒过的美工刀切掉白芨侧芽的底部形成新的伤口；S2：将上述的外植体放入MS培养基中进行培养；S3：在培养基中 添加6-苄氨基嘌呤0.6～2.5mg/L和萘乙酸0.1～0.4mg/L；S4：当白芨组培苗在生根培养基上长出3条以上根时，将瓶苗置于室内炼苗3～5d，再打开瓶盖，炼苗1～2d，然后将小苗移出培养基，假植在沙床中3个月，最后进行移栽。
进一步地，上述技术方案中，所述S2中培养基中还设置有琼脂5g/L、白糖20g/L。
进一步地，上述技术方案中，所述S2中的培养条件为光照强度1600～2000lx，光照时间为15h/d,培养温度为24度～28度。
进一步地，上述技术方案中，所述6-苄氨基嘌呤为1.5mg/L，所述萘乙酸为0.1mg/L。
采用上述方法组培白芨后，操作简单，生产成本低，培植的白芨的成活率高。
具体实施方式
上述的组培方法都是发明人经过多次实验得知的最佳配比，尤其是6-苄氨基嘌呤为1.5mg/L和萘乙酸为0.1mg/L。6-苄氨基嘌呤添加的量过多的时候，会导致丛生芽诱导率下降，芽变细变弱的线性，严重的时候还会出现焦尾放入现象。当萘乙酸的量添加过多的时候,增殖系数会降低,芽基部的愈伤组织会增加.苗细弱,叶色发黄。
实施例一：
S1：外植体的准备：选取新鲜的白芨侧芽，先用蒸馏水对侧芽进行清洗，再用洗洁精溶液浸泡18min；然后将白芨侧芽用蒸馏水洗净，置于80％的酒精浸泡1min,最后用0.2％的生汞溶液进行灭菌12min，经过灭菌后的白芨侧芽再用无菌水清洗3次，用消毒过的美工刀切掉白芨侧芽的底部形成新的伤口；S2：将上 述的外植体放入MS培养基中进行培养；S3：在培养基中添加6-苄氨基嘌呤0.8mg/L和萘乙酸0.2mg/L；S4：当白芨组培苗在生根培养基上长出3条以上根时，将瓶苗置于室内炼苗4d，再打开瓶盖，炼苗1d，然后将小苗移出培养基，假植在沙床中3个月，最后进行移栽。
实验一中对100支幼苗进行测验，最后测试幼苗成活率为86.8％。
实施例二：
S1：外植体的准备：选取新鲜的白芨侧芽，先用蒸馏水对侧芽进行清洗，再用洗洁精溶液浸泡15min；然后将白芨侧芽用蒸馏水洗净，置于80％的酒精浸泡2min,最后用0.2％的生汞溶液进行灭菌13min，经过灭菌后的白芨侧芽再用无菌水清洗4次，用消毒过的美工刀切掉白芨侧芽的底部形成新的伤口；S2：将上述的外植体放入MS培养基中进行培养；S3：在培养基中添加6-苄氨基嘌呤1.5mg/L和萘乙酸0.1mg/L；S4：当白芨组培苗在生根培养基上长出3条以上根时，将瓶苗置于室内炼苗3d，再打开瓶盖，炼苗1d，然后将小苗移出培养基，假植在沙床中3个月，最后进行移栽。
实验二中对100支幼苗进行测验，最后测试幼苗成活率为96.5％。
实施例三：
S1：外植体的准备：选取新鲜的白芨侧芽，先用蒸馏水对侧芽进行清洗，再用洗洁精溶液浸泡20min；然后将白芨侧芽用蒸馏水洗净，置于80％的酒精浸泡2min,最后用0.2％的生汞溶液进行灭菌15min，经过灭菌后的白芨侧芽再用无菌水清洗4次，用消毒过的美工刀切掉白芨侧芽的底部形成新的伤口；S2：将上述的外植体放入MS培养基中进行培养；S3：在培养基中添加6-苄氨基嘌呤2.3mg/L和萘乙酸0.3mg/L；S4：当白芨组培苗在生根培养基上长出3条以上根 时，将瓶苗置于室内炼苗4d，再打开瓶盖，炼苗1d，然后将小苗移出培养基，假植在沙床中3个月，最后进行移栽。
实施例三中对100支幼苗进行测验，最后测试幼苗成活率为93.2％。
由上述三个实施例可以获知，实施例二为最佳实施例。白芨幼苗的成活率最高，生长情况最佳。
虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是本领域熟练技术人员应当理解，这些仅是举例说明，可以对本实施方式作出多种变更或修改，而不背离本发明的原理和实质，本发明的保护范围仅由所附权利要求书限定。