te(pH 5.0)]中的4-methyl皿bellife巧 1-a-D-N-acetyIneuraminic acid(SIGMA,M8639)，将抑制剂溶解到甲醇中来根据浓度准备。 巧光分析是通过使用SpectraMax M3仪器观察在365nm波长下激发(excitation)，在450nm (gain 40皿)波长下发光(emission)来进行。使混合酶（1化1)，基质（2化1)，抑制剂（1化1)， 乙酸缓冲液（ieOiil)的共2(K)山的溶液反应而在96孔板(S化，life sciences ,Korea)中对此 进行活性分析。对根据分别不同抑制剂的浓度产生的抑制反应的初始速度通过作图(plot) 来评价抑制性能。ICsq值由W下[数学式1 ]计算。
[0410] [数学式。
[0412] 结果，如表1所示，确定香叶基黄酬(geranyIated fIavonoidK化合物1-9)对神经 氨酸酶具有高抑制活性。化合物1-3、6、8表示纳米摩尔级ICso值。确定抑制活性最高的化合 物8的ICso值为0.11±0.003即最低值，且确定其他化合物也有意义地抑制神经氨酸酶活性 (表1)。并且，如图2所示，从毛泡桐（Paulowniatomentosa)果实（fruit)分离的香叶基黄酬 (化合物1至9)被确定为浓度依赖性地抑制神经氨酸酶活性(图2)。
[041引 表1
[0415] <实验例2〉神经氨酸酶(neuraminidase)抑制机制的分析
[0416] 为了表明根据所述 < 实验例1〉的结果的本发明的化合物抑制神经氨酸酶 (neuraminidase)活性的机制，通过进行Lineweaver-Burk及Dixon作图来确定。
[0417] 具体地，通过所述 < 实验例1〉的结果，对根据不同浓度的基质和抑制剂反应物产生 的反应W巧光的发光值进行分析。通过在20分钟出现的巧光值变化的倾斜进行数据分析， 每20秒测量每个区间的巧光值变化，通过Lineweaver-Burk及Dixon作图评价。
[0418] 结果，如图3所示，在酶浓度和抑制剂浓度有不同的实验中各个变化W直线形式出 现，各个直线均经过y轴的同一交点，因此，确定整个化合物均为可逆酶抑制剂(参见图3)。 [0419] 并且，如图4所示，确定在Lineweaver-Burk及Dixon作图中根据抑制剂的浓度（1/
[S ])的反应速度（1 /[ V ])直线在1 /v (y轴）的一点交叉。从而，确定为Vmax没有变化且Km减少 的典型的竞争性抑制剂(图4)。
[0420] 产业上的应用可能性
[0421] 根据本发明的含有毛泡桐提取物或来自毛泡桐的香叶基黄酬作为有效成分的用 于抑制神经氨酸酶活性的药物组合物，所述毛泡桐提取物及来自毛泡桐的香叶基黄酬表示 对病原性病毒及细菌感染和伴随感染的炎症产生起重要作用的酵的神经氨酸酶的有意义 的抑制活性，因此，所述毛泡桐提取物或来自其的香叶基黄酬为了流感病毒感染的预防和 治疗、用于抑制神经氨酸酶活性的组合物而可被有益地使用。
【主权项】
1 · 一种用于抑制神经氨酸酶(neuraminidase)活性的药物组合物，其特征在于，含有毛 泡桐(Paulownia tomentosa)提取物作为有效成分。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述毛泡桐提取物通过水、醇或其 混合物提取。3. 根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述醇为&至&的低级醇。4. 根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述低级醇为乙醇或甲醇。5. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述神经氨酸酶为病毒、细菌或人 类来源。6. 根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述病毒为甲型流感病毒 (Influenza A virus subtype H1N1)、乙型流感病毒（Influenza B virus subtype H1N1) 或丙型流感病毒（Influenza C virus subtype H1N1)。7. 根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述细菌为产气荚膜梭菌 (Clostridium perfringens)。8. -种用于抑制神经氨酸酶活性的药物组合物，其特征在于，含有通过有机溶剂对毛 泡桐提取物另外进行分级而制备的级分作为有效成分。9. 根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述有机溶剂为正己烷、乙酸乙酯 或正丁醇。10. -种用于抑制神经氨酸酶活性的药物组合物，其特征在于，含有由以下化学式1表 示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分： [化学式1](在化学式1中，R1是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R2是-OHSCi- 3的直链或支链烷 氧基，R3是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R4是-H或-OH)11. 根据权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，所述由化学式1表示的化合物从 毛泡桐提取物分离。12. 根据权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，所述由化学式1表示的化合物选 自由以下化学式2至化学式10组成的组中的任一种： [化学式2]13. 根据权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，所述神经氨酸酶为甲型流感病毒 (Influenza A virus subtype H1N1)、乙型流感病毒（Influenza B virus subtype H1N1)、产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)或人类来源。14. 一种用于抑制神经氨酸酶活性的保健食品组合物，其特征在于，含有毛泡桐提取物 或其级分作为有效成分。15. -种用于抑制神经氨酸酶活性的保健食品组合物，其特征在于，含有由以下化学式 1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分： [化学式1](在化学式1中，R1是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R2是-OHSCi- 3的直链或支链烷 氧基，R3是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R4是-H或-OH)16. -种抑制神经氨酸酶活性的方法，其特征在于，包括将药学上有效量的毛泡桐提取 物或其级分施用给个体的步骤。17. -种抑制神经氨酸酶活性的方法，其特征在于，包括将药学上有效量的由以下化学 式1表示的化合物或其药学上可接受的盐施用给个体的步骤： [化学式1](在化学式1中，R1是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R2是-OHSCi-3的直链或支链烷 氧基，R3是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R4是-H或-OH)18.根据权利要求17所述的抑制神经氨酸酶活性的方法，其特征在于，所述由化学式1 表示的化合物选自由以下化学式2至化学式10组成的组中的任一种：19. 一种毛泡桐提取物或其级分的用途，其特征在于，用作抑制神经氨酸酶活性的药物 组合物。20. -种毛泡桐提取物或其级分的用途，其特征在于，用作改善神经氨酸酶活性的保健 食品。21. -种由以下化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，用 作抑制神经氨酸酶活性的药物组合物： [化学式1](在化学式1中，R1是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R2是-OHSCi-3的直链或支链烷 氧基，R3是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R4是-H或-OH)22. -种由以下化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，用 作改善神经氨酸酶活性的保健食品： [化学式1](在化学式1中，R1是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R2是-OHSCi- 3的直链或支链烷 氧基，R3是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R4是-H或-OH)23. -种用于治疗病毒和细菌感染性疾病的药物组合物，其特征在于，含有毛泡桐提取 物或其级分作为有效成分。24. -种用于改善病毒和细菌感染性疾病的保健食品组合物，其特征在于，含有毛泡桐 提取物或其级分作为有效成分。25. -种用于治疗病毒和细菌感染性疾病的药物组合物，其特征在于，含有药学上有效 量的由以下化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分： [化学式1](在化学式1中，R1是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R2是-OHSCi-3的直链或支链烷 氧基，R3是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R4是-H或-OH)26. -种用于改善病毒和细菌感染性疾病的保健食品组合物，其特征在于，含有药学上 有效量的由以下化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分： [化学式1](在化学式1中，R1是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R2是-OHSCi- 3的直链或支链烷 氧基，R3是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R4是-H或-OH)27. -种治疗病毒和细菌感染性疾病的方法，其特征在于，含有毛泡桐提取物或其级分 作为有效成分。28. -种治疗病毒和细菌感染性疾病的方法，其特征在于，含有药学上有效量的由以下 化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分： [化学式1](在化学式1中，R1是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R2是-OHSCi- 3的直链或支链烷 氧基，R3是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R4是-H或-OH)29. -种毛泡桐提取物或其级分的用途，其特征在于，用作治疗病毒和细菌感染性疾病 的药物组合物。30. -种毛泡桐提取物或其级分的用途，其特征在于，用作改善病毒和细菌感染性疾病 的保健食品。31. -种由以下化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，用 作治疗病毒和细菌感染性疾病的药物组合物： [化学式1](在化学式1中，R1是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R2是-OHSCi-3的直链或支链烷 氧基，R3是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R4是-H或-OH)32.-种由以下化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，用 作改善病毒和细菌感染性疾病的保健食品： [化学式1](在化学式1中，R1是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R2是-OHSCi- 3的直链或支链烷 氧基，R3是-KHSCi-3的直链或支链烷氧基，R4是-H或-OH)。
【专利摘要】本发明涉及一种含有来自毛泡桐的香叶基黄酮作为有效成分的用于抑制神经氨酸酶活性的组合物，所述毛泡桐提取物及由此分离的香叶基黄酮具有有意义地抑制对病原性病毒及细菌感染和伴随感染的炎症产生起重要作用的酵的神经氨酸酶的效果，因此，所述毛泡桐提取物或由此分离的香叶基黄酮作为用于抑制神经氨酸酶活性的组合物的有效成分可以被有益地被使用。
【IPC分类】A61K36/80, A61P31/16
【公开号】CN105682672
【申请号】
【发明人】朴基励, 严洙贤, 柳永培, 赵廷根
【申请人】庆尚大学校产学协力团, 光州科学技术院
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2014年7月25日