一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及天然食用色素的技术领域，具体涉及一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法。
【背景技术】
[0002]蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)是野生冬虫夏草分化成熟后期的一种重要内生真菌。化学分析表明该菌种蝙蝠蛾拟青霉的化学指纹图谱与天然冬虫夏草更为接近，也含有天然冬虫夏草中所具有的虫草素、甘露醇、虫草多糖、多种生物活性物质，具有抗氧化、抗肿瘤、抗辐射、调节机体免疫能力等多种生物功能。近年来，我们对分离自青海玉树地区的蝙蝠蛾拟青霉菌株HNl菌株的研究发现，该菌株在特定条件的液体发酵过程中可以产生丰富的紫色素，进一步通过优化提取条件，可以从其发酵菌丝体中提取到高稳定性的紫色素，该紫色素无毒无害，安全稳定，具有很好的脂溶性，可作为多种食品加工中的食用色素。
【发明内容】
[0003]本发明目的旨在提供一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法，实现本发明的具体方案如下:
[0004]1、一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤:
[0005](I)制备蝙蝠蛾拟青霉液体发酵培养基，发酵培养基组成为:白砂糖40g/L，酵母膏2.50g/L，麦芽粉10g/L，磷酸二氢钾1.50g/L，硫酸镁0.05g/L，土豆汁15g/L，分别各取200mL分装于500mL的三角瓶中，于115°C下灭菌25分钟后备用；
[0006](2)从保存于土豆斜面培养基的蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)HNl菌株的母种中挖取大小约为0.5cmX0.5cm菌丝体块，接种于新鲜的土豆斜面培养基上，15°C下静置培养120小时，待菌丝体完全转色为紫色时，再取0.5cmX0.5cm菌丝体块3块接种于装有200mL种子培养基的容量为500mL的三角瓶中，于15°C下静止培养12小时后，120转/分钟下振荡培养48小时后，静置12小时然后再120转/分钟下振荡培养96小时，即可获得蝙蝠蛾拟青霉发酵醪；
[0007](3)将步骤(2)中收获得到的蝙蝠蛾拟青霉发酵醪用滤布压滤并用蒸馏水洗涤3次后，可获得深紫色的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体；
[0008](4)将步骤(3)获得的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体按重量比1:1加水后用打浆机打浆后，在功率为300瓦下超声破碎20分钟冷冻干燥，然后按重量比1: 5加入氯仿(三氯甲烧)抽提2次后进彳丁合并；
[0009](5)将步骤(4)获得的氯仿抽提液40°C下减压蒸干后可获得干燥的蝙蝠蛾拟青霉紫色素；
[0010](6)将步骤(5)所得到的蝙蝠蛾拟青霉紫色素用分光光度计进行光谱扫描确定其吸收光谱。
[0011]2、根据专利要求I所述的一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法，其特征在于:
[0012](I)所述步骤(I)中所述的蝙蝠蛾拟青霉液体发酵培养基的配方:白砂糖40g/L，酵母膏2.50g/L，麦芽粉10g/L，磷酸二氢钾1.50g/L，硫酸镁0.05g/L，土豆汁15g/L ;
[0013](2)所述步骤(2)中所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体接种时机为菌丝体完全转色为紫色，斜面培养温度和液体发酵温度为15°C ;
[0014](3)所述步骤(2)中所述的120转/分钟下振荡培养48小时后，静置12小时然后再120转/分钟下振荡培养96小时的培养方式；
[0015](4)所述步骤(4)中所述的蝙蝠蛾拟青霉紫色素的提取溶剂为1: 5的氯仿溶液，提取次数为2次以及40°C的减压蒸馏条件。
【附图说明】
[0016]图1蝙蝠蛾拟青霉紫色素在不同溶剂中的吸收光谱
[0017]图2蝙蝠蛾拟青霉紫色素在H2O2溶液中的稳定性
[0018]图3蝙蝠蛾拟青霉紫色素在Na2SO3S液中的稳定性
[0019]图4蝙蝠蛾拟青霉紫色素在不同温度下的稳定性
[0020]图5蝙蝠蛾拟青霉紫色素在不同光照时间下的稳定性
【具体实施方式】
[0021]下面通过实施例，对本发明作进一步描述。
[0022]实施例1:
[0023]本发明目的旨在提供一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法，实现本发明的具体方案如下:1、一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤:
[0024](I)制备蝙蝠蛾拟青霉液体发酵培养基，发酵培养基组成为:白砂糖40g/L，酵母膏2.50g/L，麦芽粉10g/L，磷酸二氢钾1.50g/L，硫酸镁0.05g/L，土豆汁15g/L，分别各取200mL分装于500mL的三角瓶中，于115°C下灭菌25分钟后备用；
[0025](2)从保存于土豆斜面培养基的蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)HNl菌株的母种中挖取大小约为0.5cmX0.5cm菌丝体块，接种于新鲜的土豆斜面培养基上，15°C下静置培养120小时，待菌丝体完全转色为紫色时，再取0.5cmX0.5cm菌丝体块3块接种于装有200mL种子培养基的容量为500mL的三角瓶中，于15°C下静止培养12小时后，120转/分钟下振荡培养48小时后，静置12小时然后再120转/分钟下振荡培养96小时，即可获得蝙蝠蛾拟青霉发酵醪；
[0026](3)将步骤(2)中收获得到的蝙蝠蛾拟青霉发酵醪用滤布压滤并用蒸馏水洗涤3次后，可获得深紫色的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体；
[0027](4)将步骤(3)获得的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体按重量比1:1加水后用打浆机打浆后，在功率为300瓦下超声破碎20分钟冷冻干燥，然后按重量比1: 5加入氯仿(三氯甲烧)抽提2次后进彳丁合并；
[0028](5)将步骤(4)获得的氯仿抽提液40°C下减压蒸干后可获得干燥的蝙蝠蛾拟青霉紫色素；
[0029](6)将步骤(5)所得到的蝙蝠蛾拟青霉紫色素用分光光度计进行光谱扫描确定其吸收光谱。
[0030]实施例2:
[0031]一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法
[0032](I)不同提取溶剂对蝙蝠蛾拟青霉色素提取率的影响
[0033]试验了不同提取溶剂对蝙蝠蛾拟青霉菌丝体紫色素的影响，结果见图1。
[0034]从图1不同溶剂的提取效果可以看出，氯仿作为提取溶剂时，所提取的的蝙蝠蛾拟青霉紫色素色泽清丽，吸光值达到最高，可作为最佳的提取溶剂。
[0035](2)蝙蝠蛾拟青霉紫色素的稳定性研究
[0036]研究了蝙蝠蛾拟青霉紫色素在H2O2溶液中的稳定性，结果见图2。从图2可以看出，该色素在1-7%的H2O2中能够保持较好的稳定性，当高于7%浓度后，该紫色素吸光值有较大下降。
[0037]研究了蝙蝠蛾拟青霉紫色素在Na2SO3S液中的稳定性，结果见图3。从图3可以看出，该色素在0.05-0.3%的Na2SO3中能够保持较好的稳定性，当高于0.3%浓度后，该紫色素吸光值有较大下降。
[0038]研究了蝙蝠蛾拟青霉紫色素在不同加热温度下的稳定性，结果见图4。从图4可以看出，该色素在30-70°C下可以保持较好的稳定性。
[0039]研究了蝙蝠蛾拟青霉紫色素在不同光照时间下的稳定性，结果见图5。从图5可以看出，该色素在自然光照下11天内可以保持较好的稳定性。
【主权项】
1.一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤: (1)制备蝙蝠蛾拟青霉液体发酵培养基，发酵培养基组成为:白砂糖40g/L，酵母膏2.50g/L，麦芽粉10g/L，磷酸二氢钾1.50g/L，硫酸镁0.05g/L，土豆汁15g/L，分别各取200mL分装于500mL的三角瓶中，于115°C下灭菌25分钟后备用； (2)从保存于土豆斜面培养基的蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyceshepiali)HNl菌株的母种中挖取大小约为0.5cmX0.5cm菌丝体块，接种于新鲜的土豆斜面培养基上，15°C下静置培养120小时，待菌丝体完全转色为紫色时，再取0.5cmX0.5cm菌丝体块3块接种于装有200mL种子培养基的容量为500mL的三角瓶中，于15 °C下静止培养12小时后，120转/分钟下振荡培养48小时后，静置12小时然后再120转/分钟下振荡培养96小时，即可获得蝙蝠蛾拟青霉发酵醪； (3)将步骤(2)中收获得到的蝙蝠蛾拟青霉发酵醪用滤布压滤并用蒸馏水洗涤3次后，可获得深紫色的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体； (4)将步骤(3)获得的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体按重量比1:1加水后用打浆机打浆后，在功率为300瓦下超声破碎20分钟冷冻干燥，然后按重量比1: 5加入氯仿(三氯甲烷)抽提2次后进彳丁合并； (5)将步骤(4)获得的氯仿抽提液40°C下减压蒸干后可获得干燥的蝙蝠蛾拟青霉紫色素； (6)将步骤(5)所得到的蝙蝠蛾拟青霉紫色素用分光光度计进行光谱扫描确定其吸收光谱。2.根据专利要求I所述的一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法，其特征在于: (1)所述步骤(I)中所述的蝙蝠蛾拟青霉液体发酵培养基的配方:白砂糖40g/L，酵母膏2.50g/L，麦芽粉10g/L，磷酸二氢钾1.50g/L，硫酸镁0.05g/L，土豆汁15g/L ; (2)所述步骤(2)中所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体接种时机为菌丝体完全转色为紫色，斜面培养温度和液体发酵温度为15°C ; (3)所述步骤(2)中所述的120转/分钟下振荡培养48小时后，静置12小时然后再120转/分钟下振荡培养96小时的培养方式； (4)所述步骤(4)中所述的蝙蝠蛾拟青霉紫色素的提取溶剂为1: 5的氯仿溶液，提取次数为2次以及40°C的减压蒸馏条件。
【专利摘要】本发明公开了一种蝙蝠蛾拟青霉紫色素的制备方法，其特征在于是按以下步骤制备的：(1)配制蝙蝠蛾拟青霉液体发酵培养基并高温高压灭菌；(2)加入蝙蝠蛾拟青霉液体菌种进行低温深层发酵；(3)将发酵产物过滤后获得深紫色菌丝体；(4)将菌丝体打浆并超声破碎；(5)用溶剂萃取后减压蒸馏获得蝙蝠蛾拟青霉菌丝体紫色素。所述制备工艺制得的蝙蝠蛾拟青霉紫色素色泽清丽、稳定，无毒无害，可作为天然色素用于多种食品加工行业。
【IPC分类】C12P1/02
【公开号】CN105177050
【申请号】
【发明人】武忠伟, 何承云, 康壮丽, 胡喜贵, 李小军, 王丙丽
【申请人】河南科技学院
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年10月26日