血管性血友病因子抑制多肽及其应用
【技术领域】：
[0001] 本发明涉及药物领域，具体涉及用于预防和治疗或预防动脉粥样硬化的多肽化合 物。
【背景技术】：
[0002] 动脉粥样硬化（Atherosclerosis)是由于脂肪、血栓、结缔组织和碳酸钙在血管 (主要是动脉，但也包括静脉）沉积所造成的一种对人体有害的状态。其特点是动脉管壁增 厚变硬、失去弹性和管腔缩小。动脉粥样硬化的症状主要决定于血管病变及受累器官的缺 血程度，主动脉粥样硬化常无症状，冠状动脉粥样硬化者，若管径狭窄达75 %以上，则可发 生心绞痛、心肌梗塞、心律失常，甚至猝死。脑动脉硬化可引起脑缺血、脑萎缩，或造成脑血 管破裂出血，肾动脉粥样硬化常引起夜尿、顽固性高血压、严重者可有肾功能不全。肠系膜 动脉粥样硬化可表现为饱餐后腹痛便血等症状。下肢动脉粥样硬化引起血管腔严重狭窄者 可出现间歇性跛行、足背动脉搏动消失，严重者甚至可发生坏疽。动脉粥样硬化是一组称为 动脉硬化的血管病中最常见、最重要的一种。
[0003]目前预防和治疗动脉粥样硬化的药物，主要为针对控制易患因素。如患有糖尿病、 应及时控制血糖，包括饮食控制。2型糖尿病的降糖药物应以不引起高胰岛素血症为宜如达 美康等；如有高血压则应给降压药，使血压降至适当水平，如有血胆固醇增高，则应控制高 胆固醇适当给予降脂药物。
[0004] 血管性血友病因子（vWF)是一种重要的血浆成分。vWF在止血过程中主要由两种 作用：①与血小板膜GP I b-IX复合物及内皮下胶原结合，介导血小板在血管损伤部位的黏 附；②与因子W结合，作为载体具有稳定因子W的作用。此外，vWF也能结合GP II b-III a， 参与血小板的聚集过程。在内皮细胞受刺激或损伤以及集体处于应激状态时，血浆vWF水 平升高。相反，当vWF基因发生缺失、插入点突变、剪切点替换或提前形成转录终止信号时， 导致血浆vWF量有显著减低或有质的缺陷，不能完成其正常的止血功能时，即为vWD。vWF 及某些止血与纤溶成分都是血栓性疾病的独立危险因素。它与一系列心血管疾病如动脉粥 样硬化、急性冠状动脉综合征、心房颤动等均关系密切。抑制vWF，可以减少血管壁血栓的形 成，抑制动脉管壁增厚变硬、失去弹性和管腔缩小，从而预防或治疗动脉粥样硬化。现阶段， 没有成熟开发的血管性血友病因子抑制剂问世，用于治疗动脉粥样硬化。
【发明内容】
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[0005] 本发明目的是针对现有治疗动脉粥样硬化药物的特点，设计一种多肽化合物，能 有效治疗或预防动脉粥样硬化。
[0006] 技术方案
[0007] 血管性血友病因子抑制多肽，其特征在于：其序列为QGSLQDMLWQLDLSPGC。采用 Fmoc保护的固相合成技术制备。可共价连接一个佐剂，佐剂是牛血清白蛋白，人血清白蛋 白，或聚乙二醇。血管性血友病因子抑制多肽在治疗动脉粥样硬化相关疾病中的应用。所述 的动脉粥样硬化相关疾病是心绞痛、心肌梗塞、心律失常、脑卒中、脑萎缩、顽固性高血压、 肾功能不全等病变。
[0008] 有益结果：
[0009] 本发明中的血管性血友病因子抑制多肽可以靶向抑制血管性血友病因子，抑制凝 血，抑制血栓形成，达到预防或治疗动脉粥样硬化的作用。更优选是治疗动脉粥样硬化相关 疾病药物中的用途。所述的脉粥样硬化相关疾病包括心绞痛、心肌梗塞、心律失常、脑卒中、 脑萎缩、顽固性高血压、肾功能不全等病变。
【具体实施方式】
[0010] 实施例1
[0011] 多肽的化学合成方法
[0012] 多肽用Fmoc保护的固相合成技术制备。合成反应按照多肽序列从C端向N端进 行，Rink介质（可在Advanced Chem Tech公司购得）上有自由氨基。每一步连接过程中，氨 基酸残基都要活化，活化混合物中有4倍于介质上自由氨基的HBTU，HOBt，DIEA和Fmoc-氨 基酸。每次氨基酸的连接反应之后，都用一个吡啶/醋酸/N-甲基咪唑（4:1:0.5)的混合 物来封闭未连接的自由氨基，封闭反应10分钟。每次氨基酸的连接反应之后，下一个氨基 酸连接之前，都要把介质上的Fmoc-基团去掉，去Fmoc-基团使用含20%哌啶的二甲基甲酰 胺，需15分钟。最后，当所有氨基酸残基顺序连接之后，多肽用98%三氟乙酸从介质上切割 下来，切割在室温下进行2小时。
[0013] 应用上述化学条件可合成并获得多肽，序列为QGSLQDMLWQLDLSPGC，该序列为全新 序列。也可委托上海生工合成。
[0014] 实施例2
[0015] 血管性血友病因子抑制多肽对小鼠动脉粥样硬化模型的影响
[0016] 建立小鼠动脉粥样硬化模型。雄性8周龄的C57BL/6J小鼠40只，随机分为4 组，分别为：A组为空白对照组：普通饲料喂养；B组为模型对照组：造模+高脂饲料喂养； C组为药物干预组：造模+高脂饲料+血管性血友病因子抑制多肽（10mg/kg/d) ;D为阳性 药干预组：造模+高脂饲料+奥利司他片（20mg/kg/d)。连续12周。A组小鼠饲料为普 通饲料，B、C、D组小鼠用高脂高胆固醇饲料（含15%猪油+0. 25%胆固醇）喂养，以加速 动脉粥样硬化模型的形成。12周后，记录小鼠体重，检测多肽对血清胆固醇的影响：血清 总胆固醇（total cholesterol，TC)、甘油三酯（tryglyeride，TG)、高密度脂蛋白胆固醇 (high density lipoprotein cholesterol，HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol，HDL-C)的水平；，检测小鼠主动脉粥样硬化形成情况：对小鼠 主动脉大体和主动脉根部冰冻切片行油红〇染色，对动脉粥样斑块面积进行定量。
[0017] 结果：各组实验小鼠实验期间体重都有增长趋势。随着喂养时间的变化，高脂饮食 喂养组的体重增长较正常饮食组快（P〈〇. 05,见表1)。多肽组小鼠体重增长与正常饮食组 相当（P>0. 05)，与模型组相比体重较轻（P〈0. 05)。多肽组与高脂高胆固醇喂养的模型小鼠 组相比，TG、TC、HDL-C、LDL-C水平显著降低（P〈0. 01，见表2)，动脉粥样斑块面积显著性减 小（P〈0. 01，见表3)，与模型对照组比较差异均有统计学意义。
[0018] 表1血管性血友病因子抑制多肽对小鼠动脉粥样硬化模型小鼠体重的影响
[0019]
[0021] *p〈0. 05, #p〈0. 01与模型组相比
[0022] 表2血管性血友病因子抑制多肽对小鼠动脉粥样硬化模型小鼠胆固醇的影响
[0023]
[0024] *p〈0. 05, #p〈0. 01与模型组相比
[0025] 表3血管性血友病因子抑制多肽对小鼠动脉粥样硬化模型小鼠动脉粥样硬化面 积的影响
[0026]
[0028] *p〈0. 05, #p〈0. 01与模型组相比
[0029] 结论：血管性血友病因子抑制多肽对小鼠动脉粥样硬化具有治疗作用。
【主权项】
1. 一种血管性血友病因子抑制多肽，其特征在于：其序列为QGSLQDMLWQLDLSPGC。2. -种权利要求1所述多肽的制备方法，其特征在于：采用Fmoc保护的固相合成技 术制备。3. 根据权利要求2所述的多肽的制备方法，其特征在于：可共价连接一个佐剂，佐剂是 牛血清白蛋白，人血清白蛋白，或聚乙二醇。4. 权利要求1-3任一项的多肽在治疗动脉粥样硬化相关疾病中的应用。5. 根据权利要求4的用途，所述的动脉粥样硬化相关疾病是心绞痛、心肌梗塞、心律失 常、脑卒中、脑萎缩、顽固性高血压、肾功能不全等病变。
【专利摘要】本发明涉及药物领域，具体涉及预防和治疗或预防动脉粥样硬化的多肽化合物。血管性血友病因子抑制多肽，其特征在于：其序列为QGSLQDMLWQLDLSPGC。采用Fmoc保护的固相合成技术制备。可共价连接一个佐剂，佐剂是牛血清白蛋白，人血清白蛋白，或聚乙二醇。血管性血友病因子抑制多肽在治疗动脉粥样硬化相关疾病中的应用。所述的动脉粥样硬化相关疾病是心绞痛、心肌梗塞、心律失常、脑卒中、脑萎缩、顽固性高血压、肾功能不全等病变。本发明中的血管性血友病因子抑制多肽可以靶向抑制血管性血友病因子，抑制凝血，达到预防或治疗动脉粥样硬化的作用。
【IPC分类】A61P25/00, A61P9/10, C07K7/08, A61P9/06, A61P13/12, C07K1/04, C07K1/06, A61P9/12
【公开号】CN105175504
【申请号】
【发明人】罗瑞雪
【申请人】苏州普罗达生物科技有限公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年9月8日