一种鸦胆子组织培养育苗方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中草药材繁育技术，具体涉及一种鸦胆子育苗的方法，尤其是鸦胆子组织培养育苗的方法，属于中草药材繁育技术领域。
【背景技术】
[0002]鸦胆子为苦木科植物，学名:Brucea javanica，别名:鸭蛋子、老鸦胆、鸦蛋子、苦参子、小苦楝等，常为大灌木或小乔木，株高I?3米，全株被黄色柔毛，树皮有苦味，奇数羽状复叶互生，药用部位为干燥成熟果实，其根、叶亦可入药。
[0003]鸦胆子果实主要含生物碱、糖甙类以及黄酮类物质；其种子含鸦胆子苦醇等多种苦木素的苦味成分。鸦胆子的种仁含油酸、亚油酸等脂肪油，它们的含量高达56.23%，其中油酸是抗癌的有效活性成分，所得的鸦胆子油经多年临床验证具有一定的抗癌作用，临床上制成10%鸦胆子油乳剂用于治疗消化系统肿瘤如胃癌、食管癌等，特别是随着介入放射学的发展，鸦胆子油乳对治疗原发性肝癌方面有较大价值，常用鸦胆子油乳、丝裂霉素、碘油介入效果显著。鸦胆子性寒，味苦，有小毒；具有清热解毒，杀虫、止痢、腐蚀螫疣功能，用于治疗阿米巴痢疾、疟疾、早期血吸虫、菌痢等症，外用治疗鸡眼、皮疣等。此外，利用鸦胆子还可以制造一些日用化工品，如药阜、洗浴液、发乳、头油、润肤霜、农用乳油、鸦胆子冷浸液还可作为灭蚊剂。
[0004]随着人们生活水平的提高和对健康的需求，鸦胆子的用途越来越多，人们对野生资源的滥采乱挖又使野生鸦胆子濒临灭绝，为满足需要，人们不得不发展人工种植技术。
[0005]现有技术中，开展鸦胆子人工栽培，主要采用种子播种育苗方法，这种方法有两个方面的缺陷:一是培育时间长，产量低，不能满足市场对鸦胆子的需求；二是因鸦胆子种源有限，发芽率低，不能大面积发展鸦胆子人工种植，无法形成产业化。
【发明内容】
[0006]发明目的:本发明的目的是针对现有技术中鸦胆子人工繁育时间长，产量低，不能大面积发展的问题，提供一种组织培养育苗方法，缩短鸦胆子繁育时间，提高育苗成苗率，而且能保持鸦胆子药用成分，移栽后生长快，可大面积进行鸦胆子人工栽培，形成产业化。
[0007]技术方案:本发明所述的一种鸦胆子组织培养育苗方法，具体包括以下步骤:
1.采种:选健壮、无病虫害的野生鸦胆子植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种。
[0008]2.无菌苗的培养，将鸦胆子种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒15?18分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3?5次，每次浸洗5?8分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养。
[0009]3.诱导培养基:以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤(BA)，浓度为2.0?2.5mg/L，同时加入2.8%?3%的蔗糖和0.8%的琼脂，培养基温度保持25°C?28°C，调节PH值为6.0?6.5。
[0010]4.丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至5?6厘米后，切取上部2.5?3.0厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28?30天后即有丛生芽形成。
[0011]5.丛生芽继代增殖:丛生芽诱导至平均高达3.5厘米后(需48?52天)，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天?30天后，每簇增殖至45?50个丛生芽。
[0012]6.诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3?4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根。
[0013]7.试管苗的移栽:将发育良好，具有2?3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3?5天后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有65%?75%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，10?12天后，揭去薄膜，可移栽大田。
[0014]有益效果:本发明与现有技术相比，其有益效果是:
本发明的鸦胆子组织育苗方法，取材方便，丛生芽诱导率达65%?80%，成苗达85%以上，可在短时间内繁育大量的优质组培苗，以满足人工大量栽培的需要，移栽定植后，生长迅速，产量比种子育苗移栽增加30%?35%，而且与野生鸦胆子的有效药用成分一致。
【具体实施方式】
[0015]
下面结合具体实施事例对本发明技术方案进行详细说明。
[0016]实施例1:一种鸦胆子组织培养育苗，具体步骤如下:
1.采种:选健壮、无病虫害的野生鸦胆子植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种。
[0017]2.无菌苗的培养，将鸦胆子种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3次，每次浸洗8分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养。
[0018]3.诱导培养基:以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤(BA)，浓度为2.0mg/L，同时加入2.8%的蔗糖和0.8%的琼脂，培养基温度保持25°C，调节PH值为6.0。
[0019]4.丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至5厘米后，切取上部2.5厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成。
[0020]5.丛生芽继代增殖:丛生芽诱导至平均高达3.5厘米后，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天后，每簇增殖至45个丛生芽。
[0021]6.诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根。
[0022]7.试管苗的移栽:将发育良好，具有2张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3天后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有65%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，10天后，揭去薄膜，可移栽大田。
[0023]实施例2:—种鸦胆子组织培养育苗，包括以下具体步骤:
1.采种:选健壮、无病虫害的野生鸦胆子植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种。
[0024]2.无菌苗的培养，将鸦胆子种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒16分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗4次，每次浸洗6分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养。
[0025]3.诱导培养基:以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤(BA)，浓度为2.2mg/L，同时加入2.9%的蔗糖和0.8%的琼脂，培养基温度保持26°C，调节PH值为6.3。
[0026]4.丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至5.5厘米后，切取上部2.8厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养29天后即有丛生芽形成。
[0027]5.丛生芽继代增殖:丛生芽诱导至平均高达3.5厘米后(需48?52天)，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，28天后，每簇增殖至45?50个丛生芽。
[0028]6.诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3.5厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，20天后基部切口开始分化出根。
[0029]7.试管苗的移栽:将发育良好，具有2张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗4天后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有70%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，11天后，揭去薄膜，可移栽大田。
[0030]实施例3:—种鸦胆子组织培养育苗，其具体步骤如下:
1.采种:选健壮、无病虫害的野生鸦胆子植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种。
[0031]2.无菌苗的培养，将鸦胆子种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒18分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗5次，每次浸洗5分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养。
[0032]3.诱导培养基:以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤(BA)，浓度为2.5mg/L，同时加入3%的蔗糖和0.8%的琼脂，培养基温度保持28°C，调节PH值为6.5。
[0033]4.丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至6厘米后，切取上部3.0厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养30天后即有丛生芽形成。
[0034]5.丛生芽继代增殖:丛生芽诱导至平均高达3.5厘米后(需48?52天)，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，30天后，每簇增殖至50个丛生芽。
[0035]6.诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，20天后基部切口开始分化出根。
[0036]7.试管苗的移栽:将发育良好，具有3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗5天后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有75%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，12天后，揭去薄膜，可移栽大田。
【主权项】
1.一种鸦胆子组织培养育苗方法，其特征在于包括以下步骤: (1)采种:选健壮、无病虫害的野生鸦胆子植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可米种； (2)无菌苗的培养，将鸦胆子种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒15?18分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3?5次，每次浸洗5?8分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养； (3)诱导培养基:以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤(BA)，浓度为2.0?2.5mg/L，同时加入2.8%?3%的蔗糖和0.8%的琼脂，培养基温度保持25°(:?28°(:，调节？!1值为6.0?6.5 ； (4)丛生芽诱导:当步骤(2)培养的无菌苗长至5?6厘米后，切取上部2.5?3.0厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养丛生芽； (5)丛生芽继代增殖:丛生芽诱导至平均高达3.5厘米后，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，让丛生芽增殖； (6)诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3?4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根。2.根据权利要求1所述的鸦胆子组织培养育苗方法，其特征在于还包括步骤(7)试管苗的移栽:丛生芽诱导生根后，将发育良好，具有2?3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3?5天后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有65%?75%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，10?12天后，揭去薄膜，可移栽大田。
【专利摘要】本发明公开一种鸦胆子组织培养育苗方法，属于中草药材繁育技术领域，具体包括采种、无菌苗的培养、诱导培养基、？丛生芽诱导、丛生芽继代增殖、诱导生根、试管苗的移栽7个步骤，有效解决了现有技术中鸦胆子人工繁育时间长，产量低，不能大面积发展的问题。其有益效果是：取材方便，丛生芽诱导率达65%～80%，成苗达85%以上，可在短时间内繁育大量的优质组培苗，以满足人工大量栽培的需要，移栽定植后，生长迅速，产量比种子育苗移栽增加30%～35%，而且与野生鸦胆子的有效药用成分一致。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105165614
【申请号】
【发明人】莫玉明
【申请人】莫玉明
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年9月27日