一种测定化妆品中曲酸含量的检测方法
【专利摘要】本发明方法属于化妆品检测领域，涉及一种高效液相色谱法测定化妆品中曲酸含量的检测方法。样品经水提取，经0.45μm有机滤膜过滤。待测物用C18液相色谱柱分离，二极管阵列检测器检测，外标法定量。采用本发明的方法检测化妆品中曲酸具有定性准确、定量快速等优点。
【专利说明】一种测定化妆品中曲酸含量的检测方法
[0001] 本发明属于化妆品检测领域，涉及一种高效液相色谱法测定化妆品中曲酸含量的 检测方法。
【背景技术】
[0002] 曲酸（ko jic acid，KA)学名5-羟基-2-轻甲基-1，4_吡喃酮，是一种生物制剂， 是由医药级原料经微生物发酵制成的具有弱酸性有机化合物，曲酸添加到化妆品中可有效 治疗雀斑、老人斑、色素沉着、粉刺，另外，它还具有较好的紫外线吸收作用，因而作为较理 想的防晒剂，被世界各国广泛应用于化妆品中。然而，近来的研究表明曲酸具有致癌性，日 本官方已禁止进口和生产含有曲酸的化妆品。测定防晒剂的方法主要有薄层色谱法（TLC) 和气相色谱法（GC)、高效液相色谱法（HPLC)。HPLC法的干扰能力较强，检测灵密度也较高， 是测定防晒剂曲酸的理想方法。另外，在目前国标、行标中还没有测定曲酸的具体方法。为 此，建立测定曲酸准确、可靠、快速、灵敏的HPLC十分必要。
[0003] 本发明方法检测化妆品中曲酸含量，采用水萃取后，高效液相色谱检测中含量，具 有步骤简单、方法可靠、准确度高、检出限低等优点。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是选择合适的提取溶剂及色谱分离条件检测化妆品中 曲酸含量，满足前处理过程简单，检出限低的检测要求。
[0005] 本发明公开了一种化妆品中曲酸含量的检测方法，包括下列步骤：
[0006] (1)前处理：取样品0. 5g(精确到lmg)，于50mL具塞比色管中，加20mL水，超声 20min，用水定容至刻度，混勾。取部分放入离心管中，在离心机上于8000r/min离心10min， 离心后的上清液经0. 45 μ m滤膜过滤，待测。
[0007] (2)标准曲线：将200mg/L的曲酸标准储备液用水逐级稀释得0· 5,1. 0, 2. 0, 5. 0， 10.0 mg/L的标准工作液，按照上述仪器条件进行检测，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘 制标准曲线，用标准工作曲线对样品进行定量。样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测 定的线性范围内。
[0008] (3)检测：利用高效液相色谱仪对标准溶液和试样处理液进行检测；
[0009] (4)检测条件：
[0010] 色谱柱：Agilent Eclipse XDB C18,4. 6 X 250mm，5 μ m ;
[0011] 流动相：甲醇 +0. 02mol/L 磷酸二氢钾=5+95 ;流速：1. OmL/min ;
[0012] 进样量：5 μ L ;柱温：30°C ;波长：270nm。
[0013] (5)计算公式，外标法定量，试样中目标物的计算公式为：
[0014]
[0015] A屮：
[0016] X--试样中目标物质的含量，单位为微克每升（mg/L);
[0017] c--从标准工作曲线得到的试样溶液中目标物的浓度，单位为微克每毫升（μ g/ mL)；
[0018] V--试样定容体积，单位为毫升（mL)
[0019] V0--称样量，单位为克（g);
[0020] 计算结果保留三位有效数字。
[0021 ] 优选地，所述的提取溶液为水。
[0022] 优选地，所用的二极管阵列检测器检测波长为：270nm。
[0023] (6)方法检出限为5mg/kg，定量限为15mg/kg。
[0024] 附图
[0025] 图1曲酸标准谱图
[0026] 图2样品色谱图
【具体实施方式】
[0027] 下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明并不局限于具体实施 例。
[0028] 实施例1某品牌化妆品曲酸含量的测定
[0029] 1、分析步骤
[0030] 取样品0. 5g(精确到lmg)，于50mL具塞比色管中，加20mL水，超声20min，用水定 容至刻度，混匀。取部分放入离心管中，在离心机上于8000r/min离心10min，离心后的上清 液经0.45 μ m滤膜过滤，待测。
[0031] 2、高效液相色谱条件
[0032] 仪器：Agilent 1200液相色谱仪配有二极管阵列检测器；
[0033] 色谱柱：Agilent Eclipse XDB C18,4. 6 X 250mm，5 μ m ;
[0034] 流动相：甲醇 +0· 02mol/L 磷酸二氢钾=5+95 ;流速：1. OmL/min ;
[0035] 进样量：5 μ L ;柱温：30°C ;波长：270nm。
[0036] 3、标准工作曲线
[0037] 标准曲线：将200mg/L的曲酸标准储备液用水逐级稀释得0· 5，1 · 0，2. 0，5. 0， 10.0 mg/L的标准工作液，按照上述仪器条件进行检测，以峰面积为纵坐标，浓度为横 坐标绘制标准曲线，用标准工作曲线对样品进行定量。所得各标准曲线方程为：Y = 15. 436X-0. 1102, R2= 0. 9992 ;
[0038] 4、加标回收结果
[0039] 对空白化妆品样品进行6次平行样加标回收实验，加标量在25~100 μ g时，回收 率在88. 9-114. 2%之间，相对标准偏差在3. 2-3. 7%之间。
[0040] 5、方法检出限
[0041] 本方法样品取样量为0. 5g，定容体积为50mL的情况下，方法检出限为5mg/kg，定 量限为15mg/kg。
[0042] 上述实施例仅供说明本发明之用，而并非是对本发明专利的限制；应当指出的是， 对于本领域的普通技术人员，在不脱离本发明构思范围的情况下，还可以作出各种变化和 变型，这些都属于本发明的保护范围；因此，凡跟本发明权利要求范围所做的均等变化与修
【主权项】
1. 一种测定化妆品中曲酸的检测方法，其特征在于该方法包括W下步骤： (1) 提取：取样品0. 5g(精确到Img)，于50血具塞比色管中，加20血水，超声20min， 用水定容至刻度，混匀。取部分放入离屯、管中，在离屯、机上于8000r/min离屯、lOmin，离屯、后 的上清液经0. 45 y m滤膜过滤，待测。 (2) 测定：待测溶液经高效液相色谱仪，外标法定量； 色谱柱：Agilent Eclipse XDB Cis, 4. 6 X 250mm，Sum; 流动相：甲醇+0. 02mol/L憐酸二氨钟=5+95 ;流速：1. 0血/min ; 进样量：5 y L ;柱溫：30°C ;波长：270nm。 (3) 计算公式： 式中：X-一试样中目标物质的含量，单位为豪克每升（mg/L); C一一从标准工作曲线得到的试样溶液中目标物的浓度，单位为微克每毫升（yg/ 血）； V--试样定容体积，单位为毫升（mL); Vo一一称样量，单位为克（g)。2. 根据权利要求1，所述的提取溶液为水。3. 根据权利要求1，检测波长为270nm。
【文档编号】G01N30/02GK106033077SQ201510118020
【公开日】2016年10月19日
【申请日】2015年3月12日
【发明人】宋薇
【申请人】谱尼测试集团上海有限公司