一种分散固相萃取-反萃取技术的利记博彩app

文档序号:10652189阅读:1457来源:国知局
一种分散固相萃取-反萃取技术的利记博彩app
【专利摘要】本发明公布了一种分散固相萃取?反萃取技术,属于分析化学检测领域。方法包括:(1)提取:称取试样,加入提取试剂,均质,再加入无水硫酸钠,振荡提取后,离心,收集上清液于梨形瓶中,在40℃水浴中旋转蒸发浓缩至干;(2)分散固相萃取:将步骤(1)中残渣溶解,转移至15mL离心管中,加入吸附剂,涡旋震荡,进行分散固相萃取;(3)反萃取及检测:将分散固相萃取后的溶液通过有机相滤膜,弃去流出液;然后使用反萃取试剂进行反萃取,收集反萃取液,氮气吹干,用流动相溶解,上仪器进行检测。本发明的有益效果是,能够快速的进行样品前处理,缩短了操作时间、降低了检测成本,提高了检测效率,所建立的方法快捷、高效、实用性强。
【专利说明】
一种分散固相萃取-反萃取技术
技术领域
[0001] 本发明涉及一种分散固相萃取-反萃取技术,尤其是一种使用石墨烯、氧化石墨 烯、十八烷基硅烷键合硅胶(C18)、乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)等吸附剂进行分散固相萃取, 然后利用有机溶剂进行反萃取的技术,属于分析化学检测领域。
【背景技术】
[0002] 农兽药残留检测方法包括样品前处理和仪器检测,样品前处理技术直接影响着农 兽药残留检测的结果,是检测方法的关键部分,它要求样品使用少、选择性好、人工操作简 便、使用有机试剂少等。目前在农兽药残留检测中广泛使用的前处理技术有固相萃取技术 和分散固相萃取技术。
[0003] 固相萃取技术是使液体样品溶液通过吸附剂,保留其中被测物质,再选用适当强 度溶剂冲去杂质,然后用少量溶剂迅速洗脱被测物质,从而达到快速分离净化与浓缩的目 的。该技术可同时完成样品富集与净化,能够自动化批量处理,但是操作相对繁琐,固相萃 取小柱成本较高,需要专业人员协助进行方法开发。
[0004] 分散固相萃取技术因其具有快捷、高效、成本低廉等的特点而被广泛使用,其技术 核心是在样品提取液中直接加入除水剂和杂质吸附剂,提取液经离心后直接进行仪器分 析。这种技术只适合于吸附剂对杂质有吸附,对目标物不会产生吸附的前处理过程。

【发明内容】

[0005] 本发明提供了 一种分散固相萃取-反萃取技术。
[0006] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:一种分散固相萃取-反萃取技术,包 括如下步骤。
[0007] ( 1)提取:称取试样,加入提取试剂,均质,再加入无水硫酸钠,振荡提取后,离心, 收集上清液于梨形瓶中,在40 °C水浴中旋转蒸发浓缩至干。
[0008] (2)分散固相萃取:将步骤(1)中残渣溶解,转移至15mL离心管中,加入吸附剂,涡 旋震荡,进行分散固相萃取。
[0009] (3)反萃取及检测:将分散固相萃取后的溶液通过有机相滤膜,弃去流出液;然后 使用反萃取试剂进行反萃取,收集反萃取液,氮气吹干,用流动相溶解,上仪器进行检测。
[0010] 本发明的有益效果是,利用分散固相萃取-反萃取技术,针对目标物的特点,选择 不同的净化剂,能够快速的进行样品前处理,缩短了操作时间、降低了检测成本,减少了基 质干扰,回收率高,提高了检测效率,所建立的方法快捷、高效、实用性强。
【具体实施方式】
[0011] 以使用氧化石墨烯分散固相萃取-反萃取技术检测猪肉中磺胺类为例来说明本发 明。
[0012] 仪器设备: 美国Agilent公司1290-6460液相色谱-串联质谱仪,配有喷射流离子聚焦电喷雾离子 源(AJS-ESI);德国IKA公司GM200型高速均质机;日本东京理化MMV-1000W型振荡器;日本 Hitachi公司CR22GIII型高速冷冻离心机;瑞士 Buchi公司R215型旋转蒸发仪;德国IKA公司 MS3型涡旋混匀器。
[0013]材料与试剂: 氧化石墨烯由济宁利特纳米技术有限责任公司提供;乙腈为色谱纯;无水硫酸钠(650 °C灼烧4h,冷却后贮存于干燥器中,备用)、氨水为分析纯;实验用水为超纯水。
[0014] 标准品:磺胺嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲氧嘧 啶、磺胺喹噁啉,均购自德国Dr公司,纯度均在98%以上。
[0015] 样品前处理。
[0016] 提取:称取5g试样(精确至O.Olg)于50ml离心管中,加入15mL乙腈,均质lmin,再加 入l〇g无水硫酸钠,振荡提取lmin后,在4°C,9000r/min条件下离心8min,重复操作一次,合 并提取液,加入10mL乙腈饱和的正己烷,振荡,静置分层,将乙腈层转移至梨形瓶中,在40°C 水浴中旋转蒸发浓缩至干。残渣用lmL乙腈-水溶液(10+90,体积比)溶解,待净化。
[0017] 净化:将残渣溶解液转移至含有15mg氧化石墨烯的15mL离心管中,涡旋2min,将溶 液连同氧化石墨烯过〇.22μπι有机相滤器,弃去流出液,氧化石墨烯留在滤器内;然后使用 5mL含5%氨水的乙腈进行反萃取,收集反萃取液至15mL离心管中,氮气吹干后用lmL流动相 溶解,过0.22μπι有机相滤膜,上机检测。
[0018] 液相色谱条件。
[0019] 色谱柱:P〇roshell 120 EC-C18,3.0X100mm,2.7ym。
[0020] 柱温:30 Γ。
[0021] 进样体积:5yL。
[0022] 流动相:A为甲醇、B为0.1%甲酸水。
[0023] 流动相梯度洗脱程序:0-lmin,10-30%A; l-3min,30-80%A; 3-7min,80%A; 7-9min, 80-10%A;9-10min,10%A。
[0024] 流速:0.3mL/min。
[0025] 质谱条件。
[0026] 离子源:喷射流离子聚焦电喷雾离子源。
[0027]扫描模式:正呙子模式。
[0028]检测方式:多反应监测。
[0029] 干燥气温度:325Γ。
[0030] 干燥气流速:10L/min。
[0031] 雾化气压力:45psi。
[0032] 鞘气温度:35(TC。
[0033] 鞘气流速:llL/min。
[0034] 毛细管电压:4000V。
[0035] 碰撞气:高纯氮。
[0036] 各离子对驻留时间均为40ms。
[0037] 表2磺胺类药物的质谱参数。
[0038] 方法评价。
[0039] 为避免基质效应的影响,采用基质加标的方式配制标准溶液进行上机测定,浓度 分别为5、10、50、100、300、50(^ 8/1。实验结果表明,在5~20(^8/1浓度范围内,6种磺胺的线 性关系良好,定量限可达5yg/kg。
[0040] 准确称取5 g(精确至O.Olg)样品,分别准确添加 50yL、100yL、150yL 1.00 mg/L三 个水平的6种磺胺混合标准品溶液,在优化实验条件下进行前处理并上机测定,每个水平平 行测定6次,计算回收率和精密度。其平均回收率为77%~96%,精密度10~15%。
[0041] 以石墨烯分散固相萃取-反萃取技术检测西瓜中涕灭威残留为例来说明本发明。 [0042]仪器设备: 美国Agilent公司1290-6460液相色谱-串联质谱仪,配有喷射流离子聚焦电喷雾离子 源(AJS-ESI);德国IKA公司GM200型高速均质机;日本东京理化MMV-1000W型振荡器;日本 Hitachi公司CR22GIII型高速冷冻离心机;瑞士 Buchi公司R215型旋转蒸发仪;德国IKA公司 MS3型涡旋混匀器。
[0043] 材料与试剂: 石墨烯由济宁利特纳米技术有限责任公司提供;3mL空柱管、筛板(孔径彡20μπι)购于天 津博纳艾杰尔公司;甲醇、乙腈、丙酮、乙酸乙酯甲酸均为色谱纯;无水硫酸钠(650Γ灼烧 4h,冷却后贮存于干燥器中,备用)、氯化钠 、氨水为分析纯;实验用水为超纯水。
[0044] 标准品:涕灭威浓度为100mg/L,lmL,购自农业部环境保护科研监测所。
[0045] 操作步骤: (1)提取:称取5试样,加入20ml乙腈,均质lmin,再加入4g无水硫酸钠、lg氯化钠,振荡 提取3min后,9000r/min条件下离心5min,收集上清液于梨形瓶中,在40°C水浴中旋转蒸发 浓缩至近干。
[0046] (2)分散固相萃取:浓缩后的残渣用2mL超纯水溶解,加入15mg石墨烯进行分散固 相萃取lmin。
[0047] (3 )反萃取:将分散固相萃取后的溶液通过0.22μπι滤膜,弃去流出液;然后使用2mL 乙腈进行反萃取,收集反萃取液。
[0048] (4)检测:将收集的反萃取液过0.22μπι有机相滤膜,样液进液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS)进行检测。
[0049] 液相色谱条件。
[0050] 色谱柱:P〇roshell 120 EC-C18,3.0X100mm,2.7ym。
[0051] 柱温:30 °C。
[0052] 进样体积:lyL。
[0053] 流动相:A为甲醇、B为水。
[0054] 流动相梯度洗脱程序:0-4min,5%-70%A;4-5min,70%A;3-7min,20%A ;5-7. lmin, 70%-5%A;10min,5%A。
[0055] 流速:0.3mL/min。
[0056] 质谱条件。
[0057] 离子源:喷射流离子聚焦电喷雾离子源。
[0058] 扫描模式:正离子模式。
[0059] 检测方式:多反应监测。
[0060] 干燥气温度:325 Γ。
[0061 ] 干燥气流速:10L/min。
[0062] 雾化气压力:45psi。
[0063] 鞘气温度:350°C。
[0064] 鞘气流速:llL/min。
[0065] 毛细管电压:4000V。
[0066] 碰撞气:高纯氮。
[0067] 各离子对驻留时间均为70ms。
[0068] 涕灭威的定性离子对213/89.3、213/98.3,对应的碎裂电压均为120¥,对应的碰撞 能量分别为16 eV、11 eV;定量离子对213/89.3。
[0069]方法评价。
[0070] 分别配制浓度为5、10、20、50、100、200、500yg/L的涕灭威标准溶液,按优化后的实 验条件进行前处理,然后利用液相色谱-串联质谱仪进行分析,得到涕灭威标准工作曲线, 相关系数良好,均大于0.998;通过在阴性样品中添加不同浓度梯度的涕灭威标准溶液进行 回收率和精密度试验,验证方法的可靠性,回收率在85%-110%之间,精密度均小于13%。
[0071]所述实施例仅仅是本发明的优选的实施例,并不是对本发明的范围进行限定。基 于本发明实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下,对本发明的技术 方案进行的各种改进、优化,进而获得的所有其他实施例,均属于本发明权利要求书所声明 的保护范围。
【主权项】
1. 一种分散固相萃取-反萃取技术,其特征在于,所述技术包括以下步骤: (1) 提取:称取试样,加入提取试剂,均质,振荡提取后,离心,收集上清液于梨形瓶中, 在40 °C水浴中旋转蒸发浓缩至干; (2) 分散固相萃取:将步骤(1)中残渣溶解,转移至15mL离心管中,加入吸附剂,涡旋震 荡,进行分散固相萃取; (3) 反萃取及检测:将分散固相萃取后的溶液通过有机相滤膜,弃去流出液;然后使用 反萃取试剂进行反萃取,收集反萃取液,氮气吹干,用流动相溶解,上仪器进行检测。2. 根据权利要求1所述的一种分散固相萃取-反萃取技术,其特征是:步骤(1)加入的提 取试剂为甲醇、乙腈、丙酮、乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷中的至少一种。3. 根据权利要求1所述的一种分散固相萃取-反萃取技术,其特征是:步骤(1)对于含有 水分的样品,均质后要加入无水硫酸钠进行除水。4. 根据权利要求1所述的一种分散固相萃取-反萃取技术,其特征是:步骤(3)所述的反 萃取试剂为甲醇、乙腈、丙酮或其含氨水或甲酸的溶液。
【文档编号】G01N30/02GK106018609SQ201610426327
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月16日
【发明人】倪永付
【申请人】中华人民共和国济宁出入境检验检疫局
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