一种仙茅中仙茅苷的测定方法
【专利摘要】本发明公开了一种仙茅中仙茅苷的测定方法，包括以下步骤：步骤1：将仙茅粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；步骤2：将萃取液稀释、离心、过滤后，得到上清液；步骤3：将上清液采用液相色谱法进行分析。本发明提供了一种仙茅中仙茅苷的测定方法，该方法操作简单，检测精度高。
【专利说明】
-种仙茅中仙茅昔的测定方法
技术领域
[0001] 本发明设及实验室检测领域，特别是一种仙茅中仙茅巧的测定方法。
【背景技术】
[0002] 2015年药典记录了取本品粉末(过=号筛)约Ig，精密称定，精密加入甲醇50ml，称 定重量，加热回流2小时，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密 量取续滤液20ml，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取 续滤液，即得。
[0003] 液相色谱检测条件为：W十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；W乙腊-0.1 %憐酸溶 液(21:79)为流动相;检测波长为285nm。理论板数按仙茅巧峰计算应不低于3000。
[0004] 药典的方法操作过程复杂，对操作人员的操作技能要求高。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种仙茅中仙茅巧的测定方法，该方法操作简单，检测精度 局。
[0006] 本发明提供的技术方案为:一种仙茅中仙茅巧的测定方法，其特征在于，包括W下 步骤：
[0007] 步骤1:将仙茅粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；
[000引步骤2:将萃取液稀释、离屯、、过滤后，得到上清液；
[0009] 步骤3:将上清液采用液相色谱法进行分析；
[0010] 其中，液相色谱法的分析条件为：
[00川 a)仪器:液相色谱仪
[0012] b)色谱柱规格:碳18液相色谱柱3mm*100mm3.0皿 [OOU] C)柱溫：4(TC [0014] d)流速:0.5mL/min
[001引e)流动相：甲醇和O.lwt%憐酸溶液的混合物，其中甲醇和O.lwt%憐酸溶液的体 积比为19:81
[0016] f)检测波长:285nm。
[0017] 本发明中的体积比均为2(TC情况下的各组分的体积比。
[0018] 在上述的仙茅中仙茅巧的测定方法中，所述的步骤1具体为：
[0019] Sll:将仙茅粉碎后，过筛；
[0020] S12:称取1重量份仙茅粉，与0.5重量份娃藻±混合均匀待用；
[0021] S13:将S12中的混合物移入预先放好过滤膜的萃取池中，加入适量的娃藻±至达 到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取;萃取结束后得到萃取液；
[0022] 萃取条件为：萃取溶剂为甲醇；萃取溫度90°C ;静态萃取时间5min ;冲洗体积 100%;静态循环次数2次。
[0023] 在上述的仙茅中仙茅巧的测定方法中所述的萃取池的体积为10ml。
[0024] 在上述的仙茅中仙茅巧的测定方法中所述的静态萃取的压力为1500psi。
[0025] 在上述的仙茅中仙茅巧的测定方法中所述的静态萃取的吹扫时间为100s。
[0026] 在上述的仙茅中仙茅巧的测定方法中步骤2具体为：将萃取液用甲醇稀释后在 15(K)r/min的条件下离屯、并过滤，保留滤液。
[0027] 在上述的仙茅中仙茅巧的测定方法中液相色谱分析所用的仪器为化ermo U-3000 双=元液相色谱仪。
[0028] 在上述的仙茅中仙茅巧的测定方法中所述的A沈萃取法所采用的仪器为ASE350快 速溶剂萃取仪。
[0029] 本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：
[0030] 本发明的检测方法操作简单，精度与药典方法的精度一致，重复性好。
【附图说明】
[0031] 图1为本发明的仙茅巧线性关系的直角坐标图；
[0032] 图2为本发明的药典记载的色谱图、按照实施例1的色谱图、药典记载方法的色谱 图。
【具体实施方式】
[0033] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制。
[0034] 实施例1:
[0035] 将仙茅样品经粉碎机粉碎，过=号筛，约Ig,精密称定，与0.5g娃藻±混合均匀，待 用，移入到预先放好过滤膜的ASE嚴IOml萃取池中再加入适量娃藻±，轻轻振摇使之与池 口在同一水平线上，梓紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移于50ml容量瓶中，用甲醇 稀释至刻度，在1500化/min下离屯、5min，取上清液，进入LC测定。
[0036] 萃取条件(见表1)为：
[0037] 表 1
[00；3 引
[0039] 分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：
[0040] a)仪器:Thermo 双 S 元液相化-3000)
[0041 ] b)色谱柱,Thermo Syncronis C18 3*100mm 3um，即碳 18色谱仪，直径3mm，长度 100mm，粒径3微米 [00 创 C)柱溫：4(TC
[0043] d)流速:0.5mL/min
[0044] e)流动相：甲醇-0.1%憐酸即19单位体积的甲醇和81单位体积的0.1 wt%憐酸溶 液的混合物;在本实施例中，体积比均为20°C的条件下的体积比。
[0045] f)检测波长：285nm
[0046] 色谱分析有效性验证：
[0047] 取仙茅巧对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含70yg的溶液，即得仙茅巧对 照品溶液。
[004引取仙茅对照品溶液(浓度:0.0204mg/ml)，分别精密吸取该溶液0.扣1、化1、1.扣1、 2iil、3iU进入LC测定，并依照上述方法测定，结果详见表2。W绝对进样量(iig)-平均峰面积 进行线性回归，求得回归方程:y = 1898. lx+2.2775，r2 = 0.9999。仙茅巧在0.0102~0.0312 yg范围内呈良好的线性关系;其直角坐标关系见图1;其液相色谱图谱见图2中的标号3的图 谱。
[0049] 表2仙茅巧线性关系 [(K)加]
[0化1
[0化2] 实施例1的萃取方法的重现性验证：
[0053]取相同批号的样品（批号：20150701) Ig，共6份，精密称定，按ASE提取方法提取供 试品溶液，进样量为化1，W实施例1的色谱条件平行试验，测得样品中仙茅巧的含量见表2， RSD为1.6%，试验表明ASE提取方法重复性良好，结果详见表3。
[0化4] 表3 [00551
[0056] 实施例1的萃取方法的精确度测试
[0057] 采用实施例1的ASE萃取方法和药典的萃取方法对仙茅进行萃取，仙茅为4批，批号 分别为 1508090,151118,20150701,141201;
[005引实施例1的ASE萃取方法对同一批次的仙茅采用相同型号规格但是不同的机器进 行平行测试两次，分别为ASEl和ASE2表示。
[0059] 图2中标号2的图谱为样品1508090按照药典所记载的方法得到的色谱图；
[0060] 图2中标号1的图谱为样品1508090按照实施例1所记载的方法得到的色谱图。
[0061] 具体测试结果见下表4;
[0062] 要 4
[0063]
[0064] 上所还的仪刃本发明的较佳买施例，化巧本发明的精种和原则范困内所作的任 何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种仙茅中仙茅苷的测定方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1:将仙茅粉碎后米用ASE萃取法萃取得到萃取液； 所述的步骤1具体为:Sl 1:将仙茅粉碎后，过筛； S12:称取1重量份仙茅粉，与0.5重量份娃藻土混合均勾待用； S13:将S12中的混合物移入预先放好过滤膜的萃取池中，加入适量的硅藻土至达到萃 取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取;萃取结束后得到萃取液； 萃取条件为:萃取溶剂为甲醇；萃取温度90°C;静态萃取时间5min;冲洗体积100%;静 态循环次数2次； 步骤2:将萃取液稀释、离心、过滤后，得到上清液； 步骤3:将上清液采用液相色谱法进行分析； 其中，液相色谱法的分析条件为： a) 仪器:液相色谱仪 b) 色谱柱规格:碳18液相色谱柱3mm*100_3. Ομπι (：)柱温:40°〇 d) 流速:0 · 5mL/min e) 流动相：甲醇和0.1 wt %磷酸溶液的混合物，其中甲醇和0 . lwt %磷酸溶液的体积比 为 19:81 f) 检测波长：285nm〇2. 根据权利要求1所述的仙茅中仙茅苷的测定方法，其特征在于，所述的萃取池的体积 为10ml。3. 根据权利要求1所述的仙茅中仙茅苷的测定方法，其特征在于，所述的静态萃取的压 力为 1500psi。4. 根据权利要求1所述的仙茅中仙茅苷的测定方法，其特征在于，所述的静态萃取的吹 扫时间为100s。5. 根据权利要求1所述的仙茅中仙茅苷的测定方法，其特征在于，步骤2具体为:将萃取 液用甲醇稀释后在1500r/min的条件下离心并过滤，保留滤液。6. 根据权利要求1所述的仙茅中仙茅苷的测定方法，其特征在于，液相色谱分析所用的 仪器为Thermo U-3000双三元液相色谱仪。7. 根据权利要求1所述的仙茅中仙茅苷的测定方法，其特征在于，所述的ASE萃取法所 采用的仪器为ASE350快速溶剂萃取仪。
【文档编号】G01N30/02GK105954387SQ201610255424
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年4月22日
【发明人】陈学松, 王丽丽, 韦涛, 梁美艳, 黄新惠
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所