一种用液相色谱法分离测定盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的方法
【专利摘要】本发明属分析化学领域，本发明公开了一种用液相色谱法分离检测盐酸鲁拉西酮中间体3?(1?哌嗪基)?1,2?苯并异噻唑及其有关物质的方法，该方法采用辛烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的离子对试剂?缓冲盐溶液?有机相为流动相，可以定量测定盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质的含量，从而有效控制盐酸鲁拉西酮生产过程中反应物的纯度，减少副反应的发生和杂质的生成，提高产物收率和质量。本发明方法专属性强，准确度高，操作简便。
【专利说明】
一种用液相色谱法分离测定盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的 方法
技术领域
[0001] 本发明属于分析化学领域，具体涉及液相色谱法分离测定盐酸鲁拉西酮中间体及 其有关物质的方法。
【背景技术】
[0002] 盐酸鲁拉西酮是一种非典型抗精神病药物，临床上用于精神分裂症的治疗，可以 改善认知功能。盐酸鲁拉西酮化学名为（3aR，4S，7R，7aS)-2-{ (1R，2R)-2-[4-( 1，2-苯并异 噻唑-3-基)哌嗪-1-亚甲基]环己基甲基}六氢化-4,7-桥亚甲基-2H-异吲哚-1，3-二酮盐酸 盐，分子式为C 28H36N4〇2S ? HC1。盐酸鲁拉西酮中间体化学名为3-( 1-哌嗪基)-1，2-苯并异噻 挫，分子式为C11H13N3S，结构式为：
在合成盐酸鲁拉西酮的过程中，需要控制一些重要中间体的纯度，以减少副反应的发 生和杂质的生成，从而提高产物收率和纯度。对于盐酸鲁拉西酮中间体3-(1_哌嗪基)-1，2_ 苯并异噻唑，需要控制的有关物质有2个，即1，2-苯并异噻唑-3-酮(有关物质1 )，结构式为：
3_氯-1H-异吲哚(有关物质2)，结构式为：
盐酸鲁拉西酮中间体中的杂质去除不完全，将会引起副反应的发生和杂质的生成，从 而影响药物纯度和质量。因此，实现分离测定盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质，可以保证 合成盐酸鲁拉西酮过程中反应物的纯度，提高产物收率和质量，在盐酸鲁拉西酮的生产及 其质量控制方面具有重要的现实意义。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种分析盐酸鲁拉西酮中间体3-(1_哌嗪基)_1，2_苯并异 噻唑的化学纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现盐酸鲁拉西酮中间体与其有关物质 的分离和测定，以保证盐酸鲁拉西酮中间体的纯度，减少副反应的发生，从而有效控制盐酸 鲁拉西酮终产品的质量。
[0004] 本发明所述的一种测定盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质的方法，是采用辛烷基 硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的离子对试剂-缓冲盐溶液-有机相为流动相； 上述所说的色谱柱以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂，选自Phenomenex、Kromas i 1和 Apollo等品牌的色谱柱。
[0005] 上述所说的有机相选自甲醇、乙腈、异丙醇或四氢呋喃中的一种或几种。
[0006] 上述所说的缓冲盐可为磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、高氯酸盐，优选磷酸盐。
[0007] 上述所说的离子对试剂可为庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、十二烷基硫酸钠、十二烷基 磺酸等，优选庚烷磺酸钠。
[0008] 本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现： 1) 取盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质样品适量，分别用甲醇或流动相溶解样品，配 制成每1 mL含盐酸鲁拉西酮及其有关物质0.1~1.5 mg的样品溶液； 2) 设置流动相流速为0.5~1.5 mL/min，检测波长205~280 nm; 3) 流动相A为5~25 mmol/L磷酸二氢钾和庚烷磺酸钠溶液，pH为4.0~7.0;流动相B为乙 臆。 4) 取1)的样品溶液10~50 yL注入液相色谱仪，完成盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质 的分离测定。其中： 高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津高效液相色谱仪： LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-lOASvp 色谱柱：C8(Phenomenex，250X4.6 mm,5 ym) 流动相:A:20 mmol/L磷酸二氢钾和10 mmol/L庚烷磺酸钠溶液(pH 6.0) B:乙腈 流速：1.0 mL/min 检测波长：230 nm 进样体积:10 yL 洗脱梯度:_
本发明采用08(?11611〇1]161161，250\4.6 1111]1，5 111]1)色谱柱，能够有效地分离测定盐酸鲁 拉西酮中间体及其有关物质。本发明解决了盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质的分离测定 问题，保证了盐酸鲁拉西酮生产过程中中间体的纯度，减少了副反应的发生，实现了盐酸鲁 拉西酮的质量可控。
【附图说明】
[0009] 图1为实施例1时空白溶剂的液相色谱图； 图2为实施例1时盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质液相色谱图； 图3为实施例1时盐酸鲁拉西酮中间体液相色谱图； 图4为实施例2时盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质液相色谱图。。
[0010]
【具体实施方式】： 以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。以下通过实例形式，对本 发明涉及的盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质检测方法作进一步的详细说明，但不应将此 理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实例，凡基于本发明所述内容实现的技术均属于 本发明的范围。
[0011] 实施例1 仪器与条件 高效液相色谱仪：岛津:LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-lOASvp 色谱柱：C8(Phenomenex，250X4.6 mm,5 ym) 流动相:A:20 mmol/L磷酸二氢钾和10 mmol/L庚烷磺酸钠溶液(pH 6.0) B:乙腈 流速：1.0 mL/min 检测波长：230 nm 进样体积:10 yL 洗脱梯度：
实验步骤 取盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质适量，用甲醇溶解，配制成每1 mL含盐酸鲁拉西 酮中间体及其有关物质各0.5 mg的溶液。取上述盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质溶液适 量，配制成系统适用性溶液；另取甲醇作为空白溶液。按上述色谱条件进行分析，记录色谱 图。结果见附图1~3,图1为空白溶剂色谱图；图2中保留时间11.767 min的色谱峰为盐酸鲁 拉西酮中间体，其余色谱峰为盐酸鲁拉西酮中间体的有关物质。图3中保留时间11.750 min 的色谱峰为盐酸鲁拉西酮中间体。图1~图3表明：本发明的方法可以有效地将盐酸鲁拉西酮 中间体与其有关物质分离，并可以准确进行定量检测，以计算出盐酸鲁拉西酮中间体的纯 度。
[0012] 实施例2 仪器与条件 高效液相色谱仪：岛津:LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-lOASvp 色谱柱：C8(Phenomenex，250X4.6 mm,5 ym) 流动相:A:20 mmol/L磷酸二氢钾和10 mmol/L庚烷磺酸钠溶液(pH 6.0) B:乙腈 流速：1.0 mL/min 检测波长：230 nm 进样体积:10 yL 洗脱梯度：
实验步骤 取盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质适量，用甲醇溶解，配制成每1 mL含盐酸鲁拉西 酮中间体及其有关物质各0.5 mg的溶液。取上述盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质溶液适 量，配制成系统适用性溶液;按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。结果见附图4,图4中保 留时间11.764 min的色谱峰为盐酸鲁拉西酮中间体，其余色谱峰为盐酸鲁拉西酮中间体的 有关物质。
[0013]本发明对所述盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质分析方法的以下项目进行了验 证： 系统适用性实验 取盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质适量，分别用甲醇溶解，配制成含盐酸鲁拉西酮 中间体及其有关物质的供试液。按实施例1的色谱条件进行液相色谱分析，记录色谱图。由 图2可见，在此条件下有关物质与主峰之间分离度符合要求； 进样重复性试验 将盐酸鲁拉西酮中间体供试液，按实施例1的色谱条件，重复进样6次，考察方法的重复 性。由结果可加，该方法进样重复性良好； 溶液稳定性 取盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质的供试液，按实施例1的色谱条件，分别于〇、2、4、 6、8、12、16、20、24小时后进样，考察本品定量测定时溶液稳定性，由结果可见，本样品溶液 于24小时内稳定。_
耐用性 为了进一步验证方法的稳定性，我们将色谱柱品牌、流速、柱温、缓冲溶液pH值这些条 件进行相应的微调，以考察色谱条件的耐用性； 结果表明，本方法色谱柱品牌耐用性良好，流速变化在±0. lml/min范围内，色谱峰峰 型没有变化，仅保留时间有相应的前移和后移。柱温变化± 5 °C、缓冲液pH变化± 0.2范围内 对出峰时间也无明显改变。上述考察表明本方法耐用性良好。
【主权项】
1. 一种液相色谱法分离检测盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质的方法，其特征在于： 采用反相高效液相色谱法，以辛烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例离子对试 剂-缓冲盐溶液-有机相为流动相。2. 根据权利要求1所述的分离测定方法，色谱柱选自Phenomenex、Kromasil和Apol Io等 品牌。3. 根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的有机相选自甲醇、乙腈、异丙醇和四氢 呋喃中的一种或几种。4. 根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的缓冲盐可为磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、高 氯酸盐。5. 根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的离子对试剂可为庚烷磺酸钠、辛烷磺酸 纳、十^?烷基硫酸纳、十^?烷基横酸纳。6. 根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的离子对试剂-缓冲盐溶液pH为4.0~7.0。7. 根据权利要求4所述的分离测定方法，所说的缓冲盐优选磷酸盐。8. 根据权利要求1所述的分离测定方法，其特征在于： 1) 取盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质样品适量，分别用甲醇或流动相溶解样品，配 制成每I mL含盐酸鲁拉西酮及其有关物质0.1~1.5 mg的样品溶液； 2) 设置流动相流速为0.5~1.5 mL/min，检测波长205~280 nm; 3) 流动相A为5~25 mmol/L磷酸二氢钾和庚烷磺酸钠溶液，pH为4.0~7.0;流动相B为乙 腈;流动相的洗脱梯度设置如下:__ 时间(min) I流动相A I流动相B _0__70__30_ 12__70__30_ 17__58__42_ 27__40__60_ 32__70__30_ 50__70__30_ 4) 取1)的样品溶液10~50 yL注入液相色谱仪，完成盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质 的分离测定。9. 根据权利要求8所述的测定盐酸鲁拉西酮中间体化学纯度的方法，其特征在于:流动 相A为20 mmol/L磷酸二氢钾和10 mmol/L庚烷磺酸钠溶液，用pH为6.0;流动相B为乙腈。10. 根据权利要求8所述的测定盐酸鲁拉西酮中间体化学纯度的新方法，其特征在于： 色谱柱为C8,5 ym，250X4.6 mm(I.D.)，流速为1.0 mL/min，检测波长为230 nm，室温条件 下即可检测。
【文档编号】G01N30/74GK105891392SQ201610187445
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2016年3月29日
【发明人】贾少华, 刘秋叶
【申请人】北京万全德众医药生物技术有限公司