灵芝三萜的测定方法
【专利说明】灵芝三萜的测定方法
[0001]
技术领域
[0002]本发明涉及药物成分测定方法，具体涉及灵芝三萜的测定方法。
【背景技术】
[0003]灵芝三萜是灵芝的主要活性成分之一，已知分离到的三萜类物质有上百种，要测定这一类物质的含量，中国药典在第三增补版中规定了一个以齐墩果酸计灵芝三萜及甾醇的方法，但此方法存在一定的局限性，就是特异性较差，不能够做到只测定灵芝三萜含量。
【发明内容】
[0004]本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一种以高效液相色谱法对灵芝三萜进行测定的方法。
[0005]为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为:灵芝三萜的测定方法，是采用高效液相色谱法测定灵芝三萜中主要成分灵芝酸A和灵芝酸B的含量。
[0006]进一步的，上述的灵芝三萜的测定方法，具体操作过程为:将干燥的灵芝子实体，粉碎成40目的细粉，精密称取5g，加入10ml氯仿，超声提取30min，超声波功率为40W，25KHz，得到的灵芝超声提取液，将灵芝超声提取液蒸干，蒸干后的残渣以甲醇溶解定容至25ml，以0.2 μπι微孔滤膜过滤，再以高效液相色谱法进行测定即可；高效液相色谱法具体条件为:采用规格为150mmX4.6mm，5 μπι的WondaSil C18色谱柱，紫外分光检测，流动相为乙腈-0.03%磷酸梯度洗脱，条件是:0-20min，乙腈比例为20%，20_45min，乙腈比例为30%，45-80min，乙腈比例为40%，柱温为30°C，流速为1.0ml/min,进样量为20 μ 1，波长为254nm。
[0007]进一步的，上述的灵芝三萜的测定方法，以外标法分别计算灵芝酸A、B的含量，以二者含量之和乘以系数2-8，质量标准为0.4%。
[0008]本发明的有益效果为:本发明提供的灵芝三萜的测定方法，以灵芝三萜中的主要成分灵芝酸A和B为代表，用HPLC法测定其含量，以一个代表灵芝总三萜的换算系数，折算总三萜的含量，本方法克服了以齐墩果酸为标准品的比色法存在的特异性差，结果偏高的问题，以高效液相色谱法测定，结果准确性大幅提高。
【具体实施方式】
[0009]实施例1:
灵芝三萜的测定方法，是采用高效液相色谱法测定灵芝三萜中主要成分灵芝酸A和灵芝酸B的含量，具体操作过程为:将干燥的灵芝子实体，粉碎成40目的细粉，精密称取5g，加入10ml氯仿，超声提取30min，超声波功率为40W，25KHz，得到的灵芝超声提取液，将灵芝超声提取液蒸干，蒸干后的残渣以甲醇溶解定容至25ml，以0.2 μπι微孔滤膜过滤，再以高效液相色谱法进行测定即可；高效液相色谱法具体条件为:采用规格为150_X4.6mm，5 μπι的WondaSil C18色谱柱，紫外分光检测，流动相为乙腈-0.03%磷酸梯度洗脱，条件是:0-20min，乙臆比例为20%，20-45min，乙臆比例为30%，45-80min，乙臆比例为40%，柱温为30°C，流速为1.0ml/min,进样量为20 μ I，波长为254nm。
[0010]最后，以外标法分别计算灵芝酸A、B的含量，以二者含量之和乘以系数5，质量标准为0.4% ;以本方法测定了 30个灵芝样品，合格率70%。
[0011]最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.灵芝三萜的测定方法，其特征在于，是采用高效液相色谱法测定灵芝三萜中主要成分灵芝酸A和灵芝酸B的含量。2.根据权利要求1所述的灵芝三萜的测定方法，其特征在于，具体操作过程为:将干燥的灵芝子实体，粉碎成40目的细粉，精密称取5g，加入10ml氯仿，超声提取30min，超声波功率为40W，25KHz，得到的灵芝超声提取液，将灵芝超声提取液蒸干，蒸干后的残渣以甲醇溶解定容至25ml，以0.2 μπι微孔滤膜过滤，再以高效液相色谱法进行测定即可；高效液相色谱法具体条件为:采用规格为150mmX4.6mm，5ym的WondaSil C18色谱柱，紫外分光检测，流动相为乙腈-0.03%磷酸梯度洗脱，条件是:0-20min，乙腈比例为20%，20_45min，乙腈比例为30%，45-80min，乙腈比例为40%，柱温为30°C，流速为1.0ml/min,进样量为20 μ 1，波长为254nm。3.根据权利要求1所述的灵芝三萜的测定方法，其特征在于，以外标法分别计算灵芝酸A、B的含量，以二者含量之和乘以系数2-8，质量标准为0.4%。
【专利摘要】本发明公开了灵芝三萜的测定方法，是采用高效液相色谱法测定灵芝三萜中主要成分灵芝酸A和灵芝酸B的含量。本发明的有益效果为：本发明提供的灵芝三萜的测定方法，以灵芝三萜中的主要成分灵芝酸A和B为代表，用HPLC法测定其含量，以一个代表灵芝总三萜的换算系数，折算总三萜的含量，本方法克服了以齐墩果酸为标准品的比色法存在的特异性差，结果偏高的问题，以高效液相色谱法测定，结果准确性大幅提高。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105044237
【申请号】CN201510401174
【发明人】谢刚, 盘玉淑, 黄盛群, 刘长斯
【申请人】广西仙草堂制药有限责任公司
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年7月10日