多酚物质的hplc分离检测、大花红景天质量检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种多酪混合物的高效液相色谱分离与定量检测方法，特别是设及一 种对包括没食子酸、红景天巧等6种组分在内的高效液相色谱检测方法及其应用。W及大 花红景天质量检测方法。
【背景技术】
[0002] 大花红景天巧hodiola crenulata)又名宽瓣红景天、宽叶景天、圆景天，1977年 初次被中国药典收录。《中华人民共和国药典》（2005版）明确规定红景天的药材来源为大 花红景天干燥根及根茎。根据国家食品药品监督管理总局（C抑A)公开数据，目前已获批上 市的相关产品包括9个含红景天原药材的药品及85个含有红景天药材的保健食品。由于 红景天用途广泛，尤其在医药、保健食品领域使用较广，因此有必要建立更接近于原药材的 综合质量评价体系和方法。
[000引《中华人民共和国药典》（2005版）把红景天巧（C14肥007)作为大花红景天质量 控制的指标，用于定性和定量检测。并具体公开了照高效液相色谱法0PLC)测定的方法 (《中华人民共和国药典》（2005版）附录VI的。现有技术"HPLC同时测定大花红景天提 取物中没食子酸、红景天巧、酪醇、对香豆酸的含量"（《中国实验方剂学杂志》2013年5月 第10期）公开了一种大花红景天中4种成分含量测定方法，可W作为红景天药材的质量评 价方法。现有技术"HPLC法同时测定大花红景天中的4个酪类成分的含量"（《北方药学》 2011年第8卷第7期）公开了一种同时测定大花红景天中没食子酸、红景天巧、酪醇和没食 子酸己醋的含量的HPLC方法。现有方法对红景天药材中同时分离与检测的成分仅4种，数 量有限，难W实现对红景天药材的全面质量控制。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的就是针对现有技术的不足，提供一种高效液相色谱分析方法，该方 法能够对红景天中6种成分实现同时分离，并对测定各成分含量，既能够用于对红景天成 分的分离，也可W用于红景天药材的质量检测。该方法也能对混合溶液中的6种成分进行 分离。
[0005] 为实现上述目的，本发明首先提供一种高效液相色谱检测方法，其技术方案如 下：
[0006] 一种多酪物质的高效液相色谱分离检测方法，包括选择色谱条件、供试品和/或 对照品溶液配制、进样检测过程，其特征在于；所述供试品和/或对照品包括没食子酸、 红景天巧、酪醇、儿茶素、没食子酸己醋、对香豆酸6种组分中至少之一，所述色谱条件是 C18色谱柱、柱温25°C，流动相是己膳与0. 04%磯酸溶液混合溶液，己膳体积百分比7%? 20 %，梯度洗脱，检测波长275nm。
[0007] 上述高效液相色谱分离检测方法用于同时分离检测供试品中没食子酸和/或红 景天巧和/或酪醇和/或儿茶素和/或没食子酸己醋和/或对香豆酸6种多酪类物质成分。 色谱柱采用C18色谱柱、柱温25°C，流动相采用己膳与0. 04%磯酸溶液混合溶液，其中己膳 体积百分比7%?14%，采用梯度洗脱，检测波长275皿。
[000引在优化条件下，梯度洗脱条件是；Omin?lOmin时，流动相己膳体积百分比7% ; lOmin?25min时，流动相己膳体积百分比7%?14%;25min W后，流动相己膳体积百分比 14%?20%。
[0009] 上述高效液相色谱分离检测方法，当供试样品选用红景天提取液时，可W对红景 天中6种成分进行同时分离，因而可W实现对红景天药材的质量检测。一般地，红景天提取 液采用红景天超声波提取液。
[0010] 本发明高效液相色谱检测方法可W应用于红景天药材质量检测，尤其是大花红景 天（Miodiola crenulata)药材的质量检测。
[0011] -种利用上述高效液相色谱检测方法实现的大花红景天烟lodiola crenulata) 药材质量检测方法，同时检测样品中没食子酸、红景天巧、酪醇、儿茶素、没食子酸己醋、对 香豆酸6种多酪类物质组分的含量。
[0012] 与现有技术相比，本发明的有益效果是；（1)本发明公开了一种可W同时分离检 测供试品中没食子酸和/或红景天巧和/或酪醇和/或儿茶素和/或没食子酸己醋和/或 对香豆酸6种多酪类物质成分的高效液相色谱方法；（2)本发明检测方法可W对红景天提 取液中6种成分进行分离检测；（3)本发明检测方法可W应用于红景天药材质量检测与控 制；(4)提供了一种大花红景天药材质量检测方法；（5)本发明检测方法中高效液相色谱方 法色谱条件常规，对样品无需特殊处理，实用及适用性高。
【附图说明】
[0013] 图1是实施例一对照品混合溶液色谱图。
[0014] 图2是实施例一大花红景天提取物色谱图。
[0015] 图3是实施例二大花红景天提取物色谱图。
[0016] 附图中的数字标记分别是：
[0017] 1没食子酸2红景天巧3酪醇4儿茶素5没食子酸己醋6对香豆酸
【具体实施方式】
[0018] 下面结合附图，对本发明的优选实施例作进一步的描述。
[0019] 实施例一
[0020] 如图1?图2所示，用本发明方法检测红景天提取液组分。
[0021] 1、供试品溶液制备
[0022] 原料；取大花红景天烟lodiola crenulata)药材，洗净、惊干、磨粉备用。
[002引取原料药材粉约2. 5g，精密称定，置50血量瓶中，加30%己醇20血，20°C超声处理 (功率250W，频率40曲幻20min，静置室温，加30%己醇稀释至刻度，摇均，精密量取5血，置 25血量瓶中，加30%己醇稀释至刻度，摇均，滤过，取续滤液，即得。
[0024] 2、对照品溶液A制备
[002引对照品：没食子酸、红景天巧、酪醇、儿茶素、没食子酸己醋、对香豆酸
[0026] 对照品溶液A ;分别取对照品适量，精密称定，加30%己醇制成每ImL含没食子 酸0. 34mg、红景天巧0. 18mg、酪醇0. 24mg、儿茶素0. 21mg、没食子酸己醋0. 23mg、对香豆酸 0. 16mg的混合溶液，即得。
[0027] 3、色谱条件
[0028] 色谱柱；Phenomenex Luna C18 色谱柱（4. 6mmX 250mm，5 y m)
[0029] 流动相；己膳与0. 04 %磯酸溶液混合溶液（己膳（A) -0. 04 %磯酸溶液炬)）
[0030] 梯度洗脱；如表1所示
[0031] 流速；1 血/min
[0032] 柱温；25°C
[003引检测波长275nm
[0034] 表1梯度洗脱条件
[0035]
【主权项】
1. 一种多酚物质的高效液相色谱分离检测方法，包括选择色谱条件、供试品和/或对 照品溶液配制、进样检测过程，其特征在于：所述供试品和/或对照品包括没食子酸、红景 天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸6种组分中至少之一，所述色谱条件是C18色 谱柱、柱温25°C，流动相是乙腈与0. 04%磷酸溶液混合溶液，乙腈体积百分比7%?20%， 梯度洗脱，检测波长275nm。
2. 根据权利要求1所述的分离检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱是Omin?IOmin 时，流动相乙腈体积百分比7% ;10min?25min时，流动相乙腈体积百分比7%?14% ; 25min以后，流动相乙腈体积百分比14%?20%。
3. 根据权利要求1所述的分离检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱是Omin?IOmin 时，流动相乙腈体积百分比9% ;10min?25min时，流动相乙腈体积百分比9%?15% ; 25min?40min时，流动相乙腈体积百分比15%?20%。
4. 根据权利要求1?3任一所述的分离检测方法，其特征在于：所述供试样品是红景 天提取液。
5. 根据权利要求4所述的分离检测方法，其特征在于：所述红景天提取液是红景天超 声波提取液。
6. 根据权利要求5所述的分离检测方法，其特征在于：所述红景天超声波提取液是取 红景天粉末在30%乙醇水溶液中采用20°C超声波处理20min，取滤液即得。
7. 根据权利要求6所述的分离检测方法，其特征在于：所述超声波条件是250W、40kHZ。
8. 根据权利要求1、2、3、5、6、7任一所述的分离检测方法在大花红景天（Rhodiola crenulata)质量检测中的应用。
9. 一种利用权利要求1、2、3、5、6、7任一所述的分离检测方法实现的大花红景天 (Rhodiola crenulata)药材质量检测方法，同时检测样品中没食子酸、红景天苷、酪醇、儿 茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸6种组分的含量。
【专利摘要】本发明公开了一种多酚物质的HPLC分离检测方法。针对现有技术对红景天药材中同时分离与检测的成分数量有限，对红景天药材的全面质量控制效果不佳的缺陷，本发明提供了一种对包括没食子酸、红景天苷等6种多酚物质组分在内的高效液相色谱检测方法及其在大花红景天药材质量检测中的应用。本方法检测方法供试品和/或对照品包括没食子酸、红景天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸6种组分中至少之一，色谱条件是C18色谱柱、柱温25℃，流动相是乙腈与0.04％磷酸溶液混合溶液，乙腈体积百分比7％～20％，梯度洗脱。本发明还提供了一种大花红景天药材质量检测方法。本发明检测方法中HPLC方法色谱条件常规，对样品无需特殊处理，实用及适用性高。
【IPC分类】G01N30-02, G01N30-06
【公开号】CN104569186
【申请号】CN201410787229
【发明人】刘青, 尼玛次仁, 顿珠, 多杰仁青, 泽仁达瓦, 米久, 益西拉姆, 罗珍, 达瓦
【申请人】西藏藏医学院
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月17日