专利名称：分析生物组分间非共价作用的方法
技术领域：
本发明涉及的是一种分析生物组分间非共价作用的方法，特别是用生物素与放射性同位素联合使用、标记不同的生物组分，以研究生物分子间相互作用的方法。
在生物研究领域中，我们往往需要确定某些特性未知的生物组分之间将会产生什么样的相互作用。已知的研究方法在准确度方面尚不理想。
已知在检验生物分子技术中人们通常采用一种放射性同位素标记方法对某个生物组分进行示踪检测。另外一种检验生物分子的技术是用生物素(biotin)的衍生物标记生物分子，使待检测生物组分被分离出来的检测技术。
本发明的目的是将检测生物分子技术中的放射性同位素方法与生物素方法联合使用在分析生物组分间非共价作用检验过程中，从而提供一种可准确地对其生物学性质尚未充分了解的两组生物组分之间相互作用进行分析的方法。
本发明提出的方法是由如下步骤构成的1、用生物素化试剂和放射性同位素分别标记不同的生物组分；2、将这两种已标记好的生物组分置于液相中，使其在一定的条件下相互作用；3、然后加入共价交联于固相支持物的抗生物素(avidin)或其它类似物streptavidin，混合后温育一定的时间后，再用适当缓冲液充分洗涤固相物；4、收集固相物、制备凝胶电泳样品，从而作出凝胶电泳；5、用上述电泳后的凝胶做放射性自显影；6、对经过上述步骤处理过的生物样品的自显影的结果进行比较分析，以确定那些放射性同位素标记的分子同生物素标记的分子之间存在特异性的相互作用。
具体地说，假若其中一个生物组分为A、另一生物组分为B.在组分A上用生物素化学试剂进行标记，而在组分B上用放射性同位素进行标记。然后在液相中使二者相互作用。如果二者可相互作用，则将产生一个生成物A+B。在该生成物中即含有生物素试剂也含有同位素试剂。于是，当加入共价交联于固相支持物的抗生物素时，上述生成物因其含有生物素则将与抗生物素作用而生成固相物，对该固相物进行电泳后即可产生凝胶。由于该凝胶是由A+B衍生而来的，因而其中也含有同位素。因此用放射性自显影即可很容易地检测到其是否存在。由此可以分析出A与B是否产生了非共价相互作用。
由上述叙述可以看出，采用该方法可同时利用了放射性同位素标记方法的高灵敏度及特异性好的优点和生物素化标记的生物分子易分离及易纯化的优点，因而提供了一种可准确地检验生物组分之间相互作用特性的方法。
权利要求
1.一种分析生物组分间非共价作用的方法，其特征在于该方法包括如下步骤①、用生物素化试剂和放射性同位素分别标记不同的生物组分；②、将这两种已标记好的生物组分置于液相中，使其在一定的条件下相互作用；③、然后加入共价交联于固相支持物的抗生物素(avidin)或其它类似物streptavidin，混合后温育一定的时间后，再用适当缓冲液充分洗涤固相物；④、收集固相物、制备凝胶电泳样品，从而作出凝胶电泳；⑤、用上述电泳后的凝胶做放射性自显影；⑥、对经过上述步骤处理过的生物样品的自显影的结果进行比较分析，以确定那些放射性同位素标记的分子同生物素标记的分子之间存在特异性的相互作用。
全文摘要
本发明涉及一种分析生物组分间非共价作用的方法，其特征在于该方法包括如下步骤①用生物素化试剂和放射性同位素分别标记不同的生物组分；②将这两种已标记好的生物组分置于液相中，使其在一定的条件下相互作用；③然后加入共价交联于固相支持物的抗生物素(avidin)或其它类似物streptavidin，混合后温育一定的时间后，再用适当缓冲液充分洗涤固相物；④收集固相物、制备凝胶电泳样品，从而作出凝胶电泳；⑤用上述电泳后的凝胶做放射性自显影；⑥对经过上述步骤处理过的生物样品的自显影的结果进行比较分析，以确定那些放射性同位素标记的分子同生物素标记的分子之间存在特异性的相互作用。
文档编号G01N27/447GK1142610SQ9510797
公开日1997年2月12日 申请日期1995年8月8日 优先权日1995年8月8日
发明者孙群 申请人:孙群