一种川芎挥发油中总苯酞内酯的质量控制方法与流程

本发明涉及中药质量控制方法技术领域，具体涉及一种基于时间区间的GC-MS分离分析法，对川芎挥发油中的总苯酞内酯进行定量分析的控制方法。

背景技术：
对照品是药品质量评价和监督检验工作的关键。在实际工作中，因有些对照品本身价格昂贵，检验成本很高，而有些对照品又由于不稳定而无法提供，这些都影响了对药品含量的测定，导致药品质量难以控制，是影响药品质量的评价和监督检验的一个重要因素。川芎挥发油具有扩张血管、抗血小板聚集、镇痛、抗血栓等药理活性。中国专利CN104090045A公开了同时定量检测藁本内酯和洋川芎内酯A的方法，主要利用液相色谱-紫外检查法测定丁苯酞、藁本内酯和洋川芎内酯A对照品的响应值(即峰面积)，分别计算藁本内酯和洋川芎内酯A与丁苯酞的相对校正因子，利用相对校正因子，达到不采用藁本内酯和洋川芎内酯A对照品就可以测定中药材中两者含量的目的。中国专利CN101949899A公开了藁本内酯的定量检测方法，以丁苯酞为替代对照品，采用高效液相色谱法测定被测样品中藁本内酯和替代对照品丁苯酞的峰面积，根据丁苯酞的浓度，用校正因子计算被测成分藁本内酯的浓度。以上两篇专利分别公开了藁本内酯和洋川芎内酯A，以及藁本内酯的定量检测方法，而现有的成分分析表明川芎挥发油中发挥药理作用的主要成分为结构相似的苯酞内酯类化合物。因此，测定芎挥发油中总苯酞内酯的含量至关重要，对研究川芎挥发油的药理作用具有重大意义。目前，尚未见关于川芎挥发油中总苯酞内酯定量分析方法的相关文献报道。

技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种川芎挥发油中总苯酞内酯的质量控制方法。本发明建立了一种基于时间区间的气相色谱GC-质谱MS分离分析法分析方法，对川芎挥发油的总苯酞内酯进行了定量分析，为结构相似的有效成分群的质量控制提供了一种新方法。本发明的目的通过以下技术方案来实现：本发明的一种川芎挥发油中总苯酞内酯的质量控制方法，也即一种川芎挥发油中总苯酞内酯的定量分析方法、川芎挥发油中总苯酞内酯的检测方法，包括：以邻苯二甲酸二乙酯为内标品，以丁苯酞和藁本内酯为对照品，采用气相色谱GC-质谱MS分离分析法，分别测定被测样品中内标品的峰面积As以及丁苯酞和藁本内酯之间所有组分的峰面积之和At，根据内标的浓度Cs,用丁苯酞相对校正因子fis按下述公式计算被测成分总苯酞内酯浓度Ct：Ct＝fis×Cs×At/As其中，丁苯酞相对校正因子fis＝1.0436，丁苯酞相对校正因子fis按下式计算得到：fis＝(Ci×As)/(Cs×Ai)式中，Ci为丁苯酞的浓度，Ai为丁苯酞的峰面积。所述气相色谱的条件为：1)载气为高纯氦气；2)流速为1.0ml/min；3)程序升温：起始温度60℃，以6℃/min的速度升温至170℃，然后以1.5℃/min的速度升温至180℃，最后以25℃/min的速度升温至250℃，保持2min；4)进样口温度250℃，检测器温度280℃，分流比30:1，进样量1.0μl；所述质谱的条件为：EI离子源，温度230℃，电子能量70eV，电子倍增器高压1100V，溶剂不延迟。所述内标品、对照品和被测样品的溶液配制具体如下：(1)内标品贮备液：取邻苯二甲酸二乙酯，无水乙醇稀释成浓度为2.85mg/ml的溶液，置4℃冰箱保存，备用；(2)对照品贮备液：a.取丁苯酞，无水乙醇稀释成浓度为10.72mg/ml的溶液，置4℃冰箱保存，作为对照品贮备液A；b.取藁本内酯，无水乙醇稀释成浓度为1.75mg/ml的溶液，现用现配，作为对照品贮备液B；(3)对照品溶液：将对照品贮备液A、对照品贮备液B和内标品贮备液混合，用无水乙醇稀释定容，制得对照品溶液；所述对照品溶液中，丁苯酞、藁本内酯和内标品的浓度分别为0.2148mg/ml、0.70mg/ml和0.085mg/ml；(4)被测样品溶液：称取川芎挥发油0.01g，加无水乙醇稀释定容至1ml，摇匀，量取100μl，加入30μl内标品贮备液，用无水乙醇稀释定容至1ml棕色量瓶中，摇匀。本发明的研究意义在于川芎挥发油中含有多种结构相似的苯酞内酯类成分，它们均为药理活性成分。由于藁本内酯和洋川芎内酯A稳定性差，常常存在相互之间转化。因此本发明...