一种头孢地尼反应终点的液相检测方法
【专利摘要】一种头孢地尼反应终点的液相检测方法，包括以下步骤：1)稀释反应液，过滤；2)流动相配置，A流动相：1000mL水相中含26mL10％四丁基氢氧化铵水溶液、磷酸调节pH等于5.0，B流动相：乙腈；3)流动相体积比A：B＝525～600：475～400，流速1mL/min，C18填料，柱温25度，检测波长210～300nm，进样体积10μL；4)以7-AVCA在液相色谱中的峰面积小于0.5％为反应终点。本发明的有益效果在于：在不改变其他色谱条件下，调整混合流动相各组分的比例，使7-AVCA与相邻共存物之间的分离度大于1.5，达到完全的基线分离，准确的判断反应终点，方法简便，可操作性强。
【专利说明】一种头孢地尼反应终点的液相检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种分析检测方法，尤其涉及一种头孢地尼反应终点的液相检测方法。
【背景技术】
[0002]头孢地尼合成步骤包括:缩合，脱保护和精制三步。在缩合反应一步中，由中间体7-AVCA和活性酯反应生成头孢地尼。HPLC检测反应液，7-AVCA〈0.5%时，即判定为反应终点。当活性酯来源不同厂家时，带入反应液的杂质也不同，当7-AVCA与相邻两杂质形成三连峰，无法准确积分得到7-AVCA的含量，即7-AVCA —直大于0.5 %，无法准确判断反应是否达到终点，直接影响产物的纯度和质量。方便快捷的调整液相检测方法，判断反应终点对整个工艺流程尤为重要。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种头孢地尼反应终点的液相检测方法，用于实现对头孢地尼合成过程中反应终点的快速、准确的判断。
[0004]为实现上述目的，本发明的包括以下步骤:
[0005]I)取ImL头孢地尼反应液,加入1mL乙腈稀释,0.45 μ m有机针式过滤头过滤；
[0006]2)流动相配置，A流动相:1000mL水相中含26mL 10%四丁基氢氧化铵水溶液、磷酸调节pH等于5.0, B流动相:乙腈；
[0007]3)以步骤2)中的流动相体积比A:B = 525?600:475?400，流速lmL/min，色谱柱:250mmX 4.6mm不锈钢柱、C18填料、填料粒径5 μ m，柱温25度，检测波长210?300nm，进样体积1yL;
[0008]4)以头孢地尼反应液中原料7-AVCA在液相色谱中的峰面积小于0.5%为反应终点。
[0009]进一步，所述流动相体积比A:B = 600:400时，分离度大于1.5，完全分离。
[0010]进一步，所述头孢地尼反应液中原料7-AVCA在液相色谱中的保留时间为
11.3min。
[0011]本发明的有益效果在于:在不改变其他色谱条件下，调整混合流动相各组分的比例，使7-AVCA与相邻共存物之间的分离度大于1.5，达到完全的基线分离，能更加准确的判断反应终点，方法简便，可操作性强。
【具体实施方式】
[0012]本发明的包括以下步骤:、
[0013]I)取ImL头孢地尼反应液，加入1mL乙腈稀释，0.45 μ m有机针式过滤头过滤；
[0014]2)流动相配置，A流动相:1000mL水相中含26mL 10%四丁基氢氧化铵水溶液、磷酸调节pH等于5.0, B流动相:乙腈；
[0015]3)以步骤2)中的流动相体积比A:B = 525?600:475?400，流速lmL/min，色谱柱:250mmX 4.6mm不锈钢柱、C18填料、填料粒径5 μ m，柱温25度，检测波长210?300nm，进样体积1yL;
[0016]4)以头孢地尼反应液中原料7-AVCA在液相色谱中的峰面积小于0.5%为反应终点。
[0017]进一步，所述流动相体积比A:B = 600:400时，分离度大于1.5，完全分离。
[0018]进一步，所述头孢地尼反应液中原料7-AVCA在液相色谱中的保留时间为
11.3min。
[0019]实施例:
[0020]取ImL头孢地尼反应液,加入1mL乙腈稀释,0.45 μ m有机针式过滤头过滤；流动相采用:A流动相:1000mL水相中含26mL 10%四丁基氢氧化铵水溶液、磷酸调节pH等于5.0, B 流动相:乙腈,A:B = 600:400 ;流速 lmL/min,色谱柱:250mmX4.6mm 不锈钢柱、C18填料、填料粒径5 μ m，柱温25度，检测波长210?300nm，进样体积10 μ L ;结果7-AVCA在液相色谱中的保留时间为11.3min，分离度大于1.5。
[0021]以上对本发明的一个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。
【权利要求】
1.一种头孢地尼反应终点的液相检测方法，包括以下步骤: 1)取ImL头孢地尼反应液,加入1mL乙腈稀释,0.45 μ m有机针式过滤头过滤； 2)流动相配置，A流动相:1000mL水相中含26mL10%四丁基氢氧化铵水溶液、磷酸调节pH等于5.0, B流动相:乙腈； 3)以步骤2)中的流动相体积比A:B = 525?600:475?400，流速lmL/min，色谱柱:250mmX4.6mm不锈钢柱、C18填料、填料粒径5 μ m，柱温25度，检测波长210?300nm，进样体积1yL; 4)以头孢地尼反应液中原料7-AVCA在液相色谱中的峰面积小于0.5%为反应终点。
2.根据权利要求1所述的一种头孢地尼反应终点的液相检测方法，其特征在于:所述流动相体积比A:B = 600:400时，分离度大于1.5，完全分离。
3.根据权利要求1所述的一种头孢地尼反应终点的液相检测方法，其特征在于:所述头孢地尼反应液中原料7-AVCA在液相色谱中的保留时间为11.3min。
【文档编号】G01N30/34GK104330507SQ201410542200
【公开日】2015年2月4日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】孟繁静, 廖飞, 王凡 申请人:天津医药集团津康制药有限公司