一种水产品中微囊藻毒素含量的检测方法
【专利摘要】本发明公开了一种水产品中微囊藻毒素含量的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：1）分别配置若干梯度浓度的微囊藻毒素的标准使用液，对其分别进行色谱分析，获得峰面积，并分别以所述梯度浓度和峰面积为横纵坐标绘制成标准曲线；2）吸取设定体积的样品溶液进行色谱分析，测定其峰面积，并通过步骤1）所述的标准曲线计算出样品溶液的微囊藻毒素浓度。本发明的检测方法准确方便、相对标准偏差小于2%，检出限为0.01μg/kg，且无需有机溶剂、测试快速安全、选择性好且灵敏度高，能集采样、萃取、浓缩、进样于一体，还能够与液相色谱仪联用，可手动和自动操作，使得样品处理技术及分析操作简单省时，非常适于水产品中微囊藻毒素含量的研究。
【专利说明】一种水产品中微囊藻毒素含量的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种毒素含量的检测方法，具体涉及一种水产品中微囊藻毒素的检测 方法。
【背景技术】
[0002] 微囊藻毒素（microcystins，MCs)是一类由蓝藻产生的单环七肽结构的天然肝毒 素，是水体中最常见的一种蓝绿藻毒素。目前已知存在的最普遍、含量相对较多，毒性较大 的MC主要是MC-LR。其他的如MC-YR、MC-RR、MC-LF、MC-LW也较为常见。MC在阳光照射 下非常稳定，但暴露在紫外线下可水解或发生化学异构、化学键合反应而丧失毒性，尤其当 紫外线波长接近其吸收峰最大吸收波长时，MC被迅速地降解。藻毒素很高的耐热性，加热 煮沸都不能将毒素破坏，也不能将其去除。
[0003] MC广泛存在于作为饮水来源的富营养湖泊、池塘和河流等水体中。MC不仅能直接 导致一些水生生物如鱼类、贝类及蛘类的患病及死亡，而且一些野生动植物及家畜、家禽饮 用了含有产毒藻种及藻毒素的水后，也会引起中毒甚至死亡，MC可通过食物链的生物富集 危害人类的健康。MC可通过多种途径进入人体，如通过口、鼻、皮肤等途径摄入；通过饮水 摄入；通过食用水产品或藻类食品摄入等，如鱼类处于水生生态系统食物链的较高等级，通 过生物富集作用会在体内积累比环境水中含量更高的MC，从而给人群健康带来直接的安全 隐患。因此，测定水产品中微囊藻的毒素含量是非常必要的。
[0004] 目前，微囊藻毒素检测方法主要有生物测试法，气相色谱法，酶联分析法，蛋白磷 酸酶抑制分析法和细胞毒素研究技术等。生物测试法操作简单快速，结果直观，但是却会 消耗较多的毒素，灵敏度和专一性不高，最小研究线要用半致死量和致死量来衡量；联酶分 析法操作简单，灵敏度高，能检出毒素的不同同系物，但是对多种同系物的识别需要广谱抗 体；蛋白磷酸酶抑制分析法的缺陷是不能区分特异性的同系物，而细胞毒素研究技术则是 生产工作量大，最小检出限为l(T20mg/ml，准确度不高。
【发明内容】
[0005] 为了解决上述技术问题，本发明提供一种检测方法，该检测方法无需有机溶剂、测 试快速安全、选择性好且灵敏度高，使得样品处理技术及分析操作简单省时。
[0006] 本发明所采用的技术方案是： 一种水产品中微囊藻毒素含量的检测方法，其特征在于：包括如下步骤： 1) 分别配置若干梯度浓度的微囊藻毒素的标准液，对其分别进行色谱分析，获得峰面 积，并分别以所述梯度浓度和峰面积为横纵坐标绘制成标准曲线； 2) 吸取设定体积的样品溶液进行色谱分析，测定其峰面积，并通过步骤1)所述的标准 曲线计算出样品溶液的微囊藻毒素浓度。
[0007] 优选地，所述色谱分析条件如下： 色谱柱：C18, 250mmX 4. 6mm，粒径 5 μ m ; 柱温：35°C ; 流动相：乙臆+水+二氣乙酸=(36+64+0. 10); 流速：1. 〇ml/min ; 波长：240nm ; 进样量：20 μ L。
[0008] 优选地，所述样品经过前处理获得，其步骤为：取出待检测水产品中富含微囊藻毒 素的部分，然后醇取样品并对醇取后的样品进行干燥和研磨。
[0009] 优选地，所述样品溶液最后按以下公式计算样品中微囊藻毒素的浓度：
【权利要求】
1. 一种水产品中微囊藻毒素含量的检测方法，其特征在于：包括如下步骤： 1) 分别配置若干梯度浓度的微囊藻毒素的标准液，对其分别进行色谱分析，获得峰面 积，并分别以所述梯度浓度和峰面积为横纵坐标绘制成标准曲线； 2) 吸取设定体积的样品溶液进行色谱分析，测定其峰面积，并通过步骤1)所述的标准 曲线计算出样品溶液的微囊藻毒素浓度。
2. 根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述色谱分析条件如下： 色谱柱：C18, 250mmX 4. 6mm，粒径 5 μ m ; 柱温：35°C ; 流动相：乙臆+水+二氣乙酸=(36+64+0. 10); 流速：1. 〇ml/min ; 波长：240nm ; 进样量：20 μ L。
3. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述样品经过前处理获得，其步骤 为：取出待检测水产品中富含微囊藻毒素的部分，然后醇取样品并对醇取后的样品进行干 燥和研磨。
4. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述样品溶液最后按以下公式计算 样品中微囊藻毒素的浓度： 式中：
C#--样品中微囊藻毒素的浓度，单位为μ g/g ; Cm--测试溶液中微囊藻毒素的浓度，单位为μ g/ml ; V--样品溶液的体积，单位为ml ; m〇--水产品的取样量，单位为g。
【文档编号】G01N30/02GK104155372SQ201410321722
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2014年7月7日 优先权日:2014年7月7日
【发明者】叶文婷, 雷新慧, 徐婷, 张建, 母凌燕 申请人:深圳市格瑞斯特环保技术有限公司