一种荧光光谱偏振度和偏振角的测量方法
【专利摘要】本发明公开了一种荧光光谱偏振度和偏振角的测量方法,用于解决传统的荧光各向异性测量中不同测量偏振角和误差随荧光偏振角度变化的问题,其特征在于:采用荧光测量中常用的L测量方式,通过旋转检偏偏振器,将检偏偏振器的偏振方向调整至与起偏偏振器的出射光线(完全偏振光)的偏振方向平行,然后将检偏偏振器顺时针旋转0度、45度、90度和135度时,分别用光谱仪测量并记录荧光光谱强度,并使用得到的荧光光谱强度计算得到偏振度和偏振角。与现有技术相比,本发明的有益效果是能同时得到荧光偏振度和偏振角,而且偏振度更加准确。
【专利说明】一种焚光光谱偏振度和偏振角的测量方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及涉及一种偏振光谱分析技术,特别涉及一种荧光光谱偏振度和偏振角 的测量方法,适用于光谱生物材料分析,属于光谱分析【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 传统偏振光谱技术,是通过探测荧光光谱的偏振度或是各向异性来进行生物反应 分析。与生物或材料的荧光机理和电子结构相关联的偏振角并没有进行测量,在偏振度测 量中,默认突光偏振方向与入射光的偏振方向一致,即:偏振角为0度。而实际情况是偏振 角是随入射光的波长而变化,其值不确定,因此传统偏振度测量方法不准确。特别是当荧光 的实际偏振角为45度时,使用传统测量方法测量偏振度的值总为0,其误差率达到100%。
[0003] 在已有文献中,还未找到荧光的偏振角的测量方法,偏振度的测量存在不准确等 缺点。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是为了克服上述已有技术的缺陷,提出一种荧光光谱偏振度和偏振 角的测量方法。
[0005] 本发明方法是通过下述技术方案实现的。
[0006] 本发明的一种荧光光谱偏振度和偏振角的测量方法,其具体步骤如下:
[0007] 步骤1 :将激光光源(1)、起偏偏振器(2)、比色皿(3)、检偏偏振器(4)以及光谱仪 (5)放置于同一水平面(用符号P)上。比色皿(3)中装载待测样品。
[0008] 步骤2 :激光光源⑴发出的连续激光入射至起偏偏振器(2),其出射光为完全偏 振光,偏振方向垂直于水平面P ;
[0009] 步骤3 :步骤2中所述完全偏振光入射至比色皿(3)中的待测样品上,激发出荧 光。所述完全偏振光的入射方向垂直于比色皿(3)的侧表面(用符号Q1表不)。
[0010] 步骤4 :检偏偏振器⑷平行于与比色皿⑶的表面Q1相邻的表面(用符号Q2表 示)。步骤3中所述荧光入射至检偏偏振器(4),其出射光线进入光谱仪(5)。
[0011] 步骤5 :将检偏偏振器(4)的偏振方向调整至与步骤2中所述完全偏振光偏振方 向平行。
[0012] 步骤6 :使用光谱仪(5)测量并记录荧光的光谱强度(用符号I (0)表示)。
[0013] 步骤7 :将检偏偏振器⑷沿顺时针方向旋转45度,并使用光谱仪(5)测量并记 录此时的荧光光谱强度(用符号I (45)表示)。
[0014] 步骤8 :将检偏偏振器(4)沿顺时针方向再旋转45度,并使用光谱仪(5)测量并 记录此时的荧光光谱强度(用符号I (90)表示)。
[0015] 步骤9 :将检偏偏振器⑷沿顺时针方向再旋转45度,并使用光谱仪(5)测量并 记录此时的荧光光谱强度(用符号I (135)表示)。
[0016] 步骤10 :使用公式(1)计算荧光偏振度(用符号D0P表示),使用公式(2)计算荧
【权利要求】
1. 一种荧光光谱偏振度和偏振角的测量方法,其特征在于:其具体步骤如下: 步骤1 :将激光光源(1)、起偏偏振器(2)、比色皿(3)、检偏偏振器(4)以及光谱仪(5) 放置于同一水平面P)上;比色皿(3)中装载待测样品; 步骤2 :激光光源(1)发出的连续激光入射至起偏偏振器(2),其出射光为完全偏振光, 偏振方向垂直于水平面P ; 步骤3 :步骤2中所述完全偏振光入射至比色皿(3)中的待测样品上,激发出荧光;所 述完全偏振光的入射方向垂直于比色皿(3)的侧表面Q1 ; 步骤4 :检偏偏振器⑷平行于与比色皿⑶的表面Q1相邻的表面Q2 ;步骤3中所述 荧光入射至检偏偏振器(4),其出射光线进入光谱仪(5); 步骤5 :将检偏偏振器(4)的偏振方向调整至与步骤2中所述完全偏振光偏振方向平 行; 步骤6 :使用光谱仪(5)测量并记录荧光的光谱强度1(0); 步骤7 :将检偏偏振器(4)沿顺时针方向旋转45度,并使用光谱仪(5)测量并记录此 时的荧光光谱强度1(45); 步骤8 :将检偏偏振器(4)沿顺时针方向再旋转45度,并使用光谱仪(5)测量并记录 此时的荧光光谱强度1(90); 步骤9 :将检偏偏振器(4)沿顺时针方向再旋转45度,并使用光谱仪(5)测量并记录 此时的荧光光谱强度1(135); 步骤10 :使用公式(1)计算荧光偏振度DOP,使用公式(2)计算荧光偏振角AOP ;
【文档编号】G01N21/21GK104048922SQ201410299522
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2014年6月26日 优先权日:2014年6月26日
【发明者】陈思颖, 牟涛涛, 张寅超, 郭磐, 陈和 申请人:北京理工大学