内酰胺酶检测试纸条的利记博彩app
【专利摘要】一种内酰胺酶检测试纸条，由纳米金微孔试剂(8)、试纸条(9)和青霉素G微孔试剂(10)组成，其特征在于：所述的纳米金微孔试剂(8)包括背板(1)，所述的背板(1)上从左至右分别贴有带标记的保护膜贴纸(5-1)、样品垫(2)、纤维素膜(3)、吸水垫(4)和保护膜贴纸(5-2)，所述的纤维素膜(3)上分别设有控制线C线(7)和检测线T线(6)，所述的C线(7)标记的是青霉素结合蛋白6特异性单克隆抗体，所述的T线(6)标记的是氨苄青霉素-牛血清白蛋白结合物。本实用新型灵敏度高，检测范围广，检测速度快，操作方便。
【专利说明】内酰胺酶检测试纸条
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物检测领域，具体为一种内酰胺酶检测试纸条。
【背景技术】
[0002]P -内酰胺酶抗生素(P-Lactam antibiotics)是一大类含有0内酰胺环结构的抗生素，主要包括青霉素类、头孢菌素类、头霉素类、碳青霉烯类和单环(6-内酰胺等，在畜牧业生产中有广泛应用。尤其是在奶牛生产中，该类药物常被用来治疗奶牛乳房炎和其他细菌性感染等，由此就导致了药物可能残留在牛奶中，可能会对人体健康造成威胁。
[0003](6-内酰胺酶是一种天然存在的蛋白质，具有分解多种抗生素使其效用降低或者无效的作用。动物体内往往含量极低。由于基因工程技术的出现，不法分子将人工合成的^ -内酰胺酶添加到牛奶中，以分解其中的抗生素残留，制造所谓的“无抗奶”来欺骗下游企业和消费者，给乳业产业造成了严重后果。我国卫生部2009年的《全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治近期工作重点及要求》中就明确提出了严厉打击在牛奶中人工添加违法添加(6-内酰胺酶。
[0004]检测0 -内酰胺酶的方法较多，有碘量法、微生物培养抑制法以及液相色谱法等，其原理均是利用3-内酰胺酶可以分解抗生素的特性。这些方法虽然检测准确性较好，但检测耗时长，在基层奶站收奶时难以迅速给出检测结果，无法满足实际需要。因此有必要开发出快速方便的检测(6-内酰胺酶的方法。
【发明内容】
[0005]本申请的目的在于提供一种内酰胺酶检测试纸条，以解决试纸条不能对牛奶中 内酰胺酶的大规模筛选进行检测的问题。
`[0006]为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案:
[0007]一种内酰胺酶检测试纸条，由纳米金微孔试剂(8)、试纸条(9)和青霉素G微孔试剂(10)组成，其特征在于:所述的纳米金微孔试剂(8)包括背板(I)，所述的背板(I)上从左至右分别贴有带标记的保护膜贴纸(5-1)、样品垫(2)、纤维素膜(3)、吸水垫(4)和保护膜贴纸(5-2)，所述的纤维素膜(3)上分别设有控制线C线(7)和检测线T线(6)，所述的C线(7)标记的是青霉素结合蛋白6特异性单克隆抗体，所述的T线(6)标记的是氨苄青霉素-牛血清白蛋白结合物，所述的纳米金微孔试剂(8)内设有青霉素结合蛋白6层(8-1)，所述的青霉素G微孔试剂(10)内设有青霉素G层(10-1)。
[0008]进一步，所述的青霉素G微孔试剂(10)还包括青霉素G微孔试剂塑料微孔(10-2)，以及盖在青霉素G微孔试剂塑料微孔(10-2)上的青霉素G微孔试剂塑料盖(10-3)。
[0009]进一步，所述的青霉素G微孔试剂塑料微孔(10-2)上设有作为加样体积的青霉素G微孔试剂加样刻度线(10-4)。
[0010]进一步，8个青霉素G微孔试剂(10)组成一排。[0011]进一步，所述的纳米金微孔试剂(8)还包括塑料微孔(8-2)，以及盖在塑料微孔(8-2)上的塑料盖(8-3)。
[0012]进一步，所述的塑料微孔(8-2)上设有作为加样体积的加样刻度线(8-4)。
[0013]进一步,8个纳米金微孔试剂(8)组成一排。
[0014]进一步，所述的试纸条(9)的宽度为0.8cm，偏差范围为0.78^0.82cm。
[0015]进一步，所述的纳米金微孔试剂(8)、试纸条(9)和青霉素G微孔试剂(10)的个数按照1:1:1的比例密封于包装袋或者包装瓶中，保存在4-8°C温度下。
[0016]本实用新型专利检测方便，操作简单，耗时仅8分钟，成本低廉，可用于牛奶中^ -内酰胺酶掺假的大规模筛选检测，为牛奶质量安全提供保障。
【专利附图】
【附图说明】
[0017]图1本实用新型的试纸条(9)结构平面俯视图
[0018]图2本实用新型的试纸条(9)结构剖面示意图
[0019]图3本实用新型的纳米金微孔试剂⑶示意图
[0020]图4是纳米金微孔试剂(8)或青霉素G微孔试剂(10)成排的示意图
[0021]图5本实用新型的检测结果判定示意图
[0022]图6本实用新型的青霉素G微孔试剂(10)示意图
`[0023]背板I ;样品垫2 ;纤维素膜3 ;吸水垫4 ;带标记的保护膜贴纸5-1 ;保护膜贴纸5-2 ;!'线6 ;C线7 ;纳米金微孔试剂8 ;青霉素结合蛋白6层8-1 ;塑料微孔8_2 ;塑料盖8_3 ；加样刻度线8-4 ;试纸条9 ;青霉素G微孔试剂10 ;青霉素G层10-1 ;青霉素G微孔试剂塑料微孔10-2 ;青霉素G微孔试剂塑料盖10-3 ;青霉素G微孔试剂加样刻度线10-4
【具体实施方式】
[0024]为了使本实用新型的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本实用新型进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本实用新型，并不用于限定本实用新型。
[0025]内酰胺酶检测试纸条的组装
[0026]1.粘贴:将样品垫⑵、纤维素膜(3)、吸水垫⑷、带标记的保护膜贴纸(5-1)和保护膜贴纸(5-2)参照图2的顺序逐一贴在支持背板(I)上。样品垫(2)与纤维素膜(3)相接，纤维素膜(3)与吸水垫(4)相接，同时在样品垫(2)和吸水垫(4)上分别贴有带标记的保护膜贴纸(5-1)和保护膜贴纸(5-2)，其中样品垫(2)的带标记的保护膜贴纸(5-1)印有“MAX”标记，方便检测使用。纤维素膜(3)上分别标记了控制线C线(7)和检测线T线
(6)。C线(7)标记的是青霉素结合蛋白6特异性单克隆抗体，而T线(6)标记的是氨苄青霉素-牛血清白蛋白结合物。
[0027]2.切条:将粘贴好的试纸条(9)大板用切条机进行切割，每个试纸条(9)的宽度为0.8cm，偏差范围为0.78、.82cm，切割好的试纸条(9)储藏在室温下备用。
[0028]3.纳米金微孔试剂(8)的组装:采用自动化加样装置定量的将纳米金颗粒标记的青霉素结合蛋白6加到塑料微孔(8-2)中形成青霉素结合蛋白6层(8-1)，置于冻干机冷冻干燥。冷冻干燥的纳米金微孔试剂(8)用塑料盖(8-3)盖好，储藏于4-8°C备用，在塑料微孔(8-2)上设有作为加样体积的加样刻度线(8-4)，一般为了方便使用8个纳米金微孔试剂
(8)组成一排，供检测使用。
[0029]4.青霉素G微孔试剂(10)的组装:将青霉素G标准品溶解至:T4U/L，采用自动化加样装置定量的将青霉素G标准品加到塑料微孔(10-2)，用冻干机冷冻干燥后呈现白色或者浅白色，如图6所示，存放于青霉素G微孔试剂塑料微孔(10-2)中形成青霉素G层(10-1)。青霉素G微孔试剂塑料微孔(10-2)用合适的青霉素G微孔试剂塑料盖(10-3)密封。一般而言，如图4所示，8个微孔练成一排，与相应数量的检测试纸条、相应数量的青霉素结合蛋白6纳米金微孔试剂一起配套作为小包装密封。每个青霉素G微孔试剂(10)上有青霉素G微孔试剂加样刻度线(10-4)，作为加样体积的标记。
[0030]5.试纸条(9)、纳米金微孔试剂(8)和青霉素G微孔试剂(10)的组装:将制备好的试纸条(9)和纳米金微孔试剂(8)以及青霉素G微孔试剂(10)的个数按照1:1:1的数量比例密封于包装袋或者包装瓶中，密封好后存放于4-8°C备用，常规方法是将一条青霉素G微孔试剂(10) (8孔)、一条纳米金微孔试剂(8) (8孔)和8条试纸条(9)放置在单个独立包装中。
[0031]内酰胺酶检测试纸条的使用
[0032]1.样品的准备:
[0033]将待检测的生鲜乳取样后恢复至室温，样品应无沉淀和杂质，不能太粘稠。现场采集的样本最佳。
[0034]2.试纸条(9)的准备:
[0035]根据样品数量将需要使用的试纸条(9)从冷藏环境中突出后，静置30分钟使之恢复到室温，然后从密封包装中取出相应数量的试纸条(9)和纳米金微孔试剂(8)。所有实验操作应在水平的实验台或者相应环境上操作，环境温度无特殊限制。
[0036]3.检测操作:
[0037](I)准备阳性对照:将准备好的样品用一次性塑料吸管或者微量移液器吸取200 yl，加入到已经去掉盖的纳米金微孔试剂(8)中。注意:一个纳米金微孔试剂(8)对应一个试纸条(9)，只能检测一个样品，不能重复使用。
[0038](I)准备样品:将准备好的样品用一次性塑料吸管或者微量移液器吸取250 Ul牛奶样品，加入到已经去掉盖的青霉素G微孔试剂(10)中。注意:一个青霉素G微孔试剂(10)对应一个试纸条(9)，只能检测一个样品，不能重复使用。
[0039](2)混匀:用移液器将牛奶样本上下吸打若干次，使之与青霉素G微孔试剂(10)中的青霉素G标准品充分混匀。
[0040](3)加样品:将准备好的含有青霉素G的样品用一次性塑料吸管或者微量移液器吸取200 iU，加入到已经去掉盖的纳米金微孔试剂⑶中。注意:一个纳米金微孔试剂(8)对应一个试纸条，只能检测一个样品，不能重复使用。
[0041](4)混合:用微量移液器或者一次性塑料吸管上下吸打纳米金微孔试剂(8)中的液体使之充分混匀，室温静置3min。混匀后的微孔应呈现粉红色或者浅粉色等。
[0042](5)插条:取出试纸条，并将其的带标记的保护膜贴纸(5-1)插入微孔中。请不要用手指或者其他物体触碰试纸条(9)的中段，即含有T线(6)和C线(7)的纤维素膜(3)。
[0043](6)计时:插条后开始计时5分钟,观察C线(7)是否出现,如果5min内C线(7)已经出现，即可判读结果；如果C线(7)没有出现，请延长2分钟使液体爬升至C线(7)出现后判读结果。
[0044]4.结果判定:图5
[0045]阴性:如图5第I个所示，C线(7)显色，而T线(6)也显色，且T线(6)颜色较C线(7)深；
[0046]阳性:C线(7)显色，T线(6)颜色与C线(7)颜色相比较:
[0047]无效:如图5中的第4和5个所示，C线(7)不显示。
[0048]以上所述仅为本实用新型的较佳实施例而已，并不用以限制本实用新型，本实用新型涉及的材料均为已知材料，凡在本实用新型的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种内酰胺酶检测试纸条，由纳米金微孔试剂(8)、试纸条(9)和青霉素G微孔试剂(10)组成，其特征在于:所述的纳米金微孔试剂(8)包括背板(I)，所述的背板(I)上从左至右分别贴有带标记的保护膜贴纸(5-1)、样品垫(2)、纤维素膜(3)、吸水垫(4)和保护膜贴纸(5-2)，所述的纤维素膜(3)上分别设有控制线C线(7)和检测线T线(6)，所述的C线(7)标记的是青霉素结合蛋白6特异性单克隆抗体，所述的T线(6)标记的是氨苄青霉素-牛血清白蛋白结合物，所述的纳米金微孔试剂(8)内设有青霉素结合蛋白6层(8-1)，所述的青霉素G微孔试剂(10)内设有青霉素G层(10-1)。
2.根据权利要求1所述的一种内酰胺酶检测试纸条，其特征在于:所述的青霉素G微孔试剂(10)还包括青霉素G微孔试剂塑料微孔(10-2)，以及盖在青霉素G微孔试剂塑料微孔(10-2)上的青霉素G微孔试剂塑料盖(10-3)。
3.根据权利要求2所述的一种内酰胺酶检测试纸条，其特征在于:所述的青霉素G微孔试剂塑料微孔(10-2)上设有作为加样体积的青霉素G微孔试剂加样刻度线(10-4)。
4.根据权利要求3所述的一种内酰胺酶检测试纸条，其特征在于:8个青霉素G微孔试剂(10)组成一排。
5.根据权利要求4所述的一种内酰胺酶检测试纸条，其特征在于:所述的纳米金微孔试剂(8)还包括塑料微孔(8-2)，以及盖在塑料微孔(8-2)上的塑料盖(8-3)。
6.根据权利要求5所述的一种内酰胺酶检测试纸条，其特征在于:所述的塑料微孔(8-2)上设有作为加样体积的加样刻度线(8-4)。
7.根据权利要求6所述的一种内酰胺酶检测试纸条，其特征在于:8个纳米金微孔试剂(8)组成一排。
8.根据权利要求7所述的一种内酰胺酶检测试纸条，其特征在于:所述的试纸条(9)的宽度为0.8cm，偏差范围为0.78?0.82cm。
9.根据权利要求1-8任一所述的一种内酰胺酶检测试纸条，其特征在于:所述的纳米金微孔试剂(8)、试纸条(9)和青霉素G微孔试剂(10)的数量按照1:1:1的比例密封于包装袋或者包装瓶中，保存在4-8 °C温度下。
【文档编号】G01N33/577GK203385734SQ201320541341
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2013年9月2日 优先权日:2013年9月2日
【发明者】杨春江, 张晓燕, 李妍, 袁永欣, 马孝斌 申请人:北京纳百景弈生物科技有限公司