人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒及其用途
【专利摘要】本发明公开了人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒，包括试剂R1、试剂R2、校准品，试剂R1包括Tris缓冲液、β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体、粗纳米胶乳颗粒；试剂R2包括Tris缓冲液、β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体、细纳米胶乳颗粒；校准品为β人绒毛膜促性腺激素校准液。本发明采用胶乳增强免疫比浊法定量测定血清中人绒毛膜促性腺激素的浓度，测量结果准确，检测过程方便快捷，测定结果稳定，采用双纳米乳胶技术，测定线性范围宽，可以达到100000IU/L，而现有的其它方法的测定线性范围不超过20000IU/L；并且适合现有各种全自动生化分析仪，检验成本低，适合临床批量开展该项目测定。
【专利说明】人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒及其用途
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医学检验领域，特别涉及人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒及其用 途。
【背景技术】
[0002] 人绒毛膜促性腺激素是由胎盘的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，它是由α和β 二聚体的糖蛋白组成。其中，α-亚单位与垂体前叶激素所共有，β-亚单位是人绒毛膜促 性腺激素所特异的，临床上常用于早期妊娠的诊断。通常使用的早孕检测试纸是通过定性 检测尿液中人绒毛膜促性腺激素，来检测是否妊娠。但是，在异常妊娠与胎盘功能的判断、 滋养细胞肿瘤的诊断和病情监测以及其它一些肿瘤的辅助诊断及病情监测中就需要定量 检测血清中人绒毛膜促性腺激素的浓度值。目前市场上β人绒毛膜促性腺激素（β-HCG) 测定试剂盒主要采用酶联免疫吸附法（ELISA)和化学发光免疫法。前者只能定性或半定量 测定人血清中的β-HCG的浓度，并且测定过程烦琐，速度慢，人为因素影响大；后者需要专 用的全自动化学发光仪，价格昂贵；且两者测定范围都较窄。
【发明内容】
[0003] 为了解决上述问题，本发明提供一种人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒，采用 胶乳增强免疫比浊法，即将β-HCG单克隆抗体标记在聚苯乙烯纳米颗粒表面，与样本 中的β-HCG进行特异性的抗原抗体反应，出现浊度，而纳米颗粒放大了该浊度信号。在 570-700nm波长下检测其吸光度的变化，其变化程度与样本中的β-HCG含量成正比。通过 与标准曲线对照，可以计算样本中的β-HCG浓度。本发明要解决的技术问题是：现有的血 清中的β-HCG的浓度测定过程烦琐，速度慢，人为因素影响大；价格昂贵；测定范围都较 窄。
[0004] 本发明中的技术方案为：人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒，其特征在于，包括 试剂R1、试剂R2、校准品，所述试剂R1包括Tris缓冲液、β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗 体、粗纳米胶乳颗粒；所述试剂R2包括Tris缓冲液、β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体、 细纳米胶乳颗粒；所述校准品为β人绒毛膜促性腺激素校准液。
[0005] 上述方案中，所述试剂R1中粗纳米乳胶颗粒为180-300纳米胶乳颗粒；所述试剂 R2中细纳米乳胶颗粒为50-180纳米胶乳颗粒。
[0006] 上述方案中，所述试剂R1中：Tris缓冲液的摩尔浓度为lOOmM，β人绒毛膜促性 腺激素单克隆抗体的重量占比为1%，180-300纳米胶乳颗粒的重量占比为1.5%。;所述试剂 R2中：Tris缓冲液的摩尔浓度为80mM，β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的重量占比为 0. 5%，50-180纳米胶乳颗粒的重量占比为2%〇。
[0007] 上述方案中，所述试剂R1中还含有1%。的防腐剂，所述试剂R2中还含有1%。的防 腐剂。
[0008] 上述方案中，所述试剂盒还包括质控品，所述质控品为β人绒毛膜促性腺激素质 控液1、β人绒毛膜促性腺激素质控液2、β人绒毛膜促性腺激素质控液3。
[0009] 本发明的用途：用于女性不育症的辅助诊断、辅助生育技术控制性超量刺激方案 的监测以及男性性功能低下、不育、青春期延迟，隐睾的辅助诊断。
[0010] 本发明的优点和有益效果在于：本发明提供一种人绒毛膜促性腺激素定量检测 试剂盒，采用胶乳增强免疫比浊法定量测定血清中人绒毛膜促性腺激素的浓度，测量结果 准确，检测过程方便快捷，测定结果稳定，采用双纳米乳胶技术，测定线性范围宽，可以达到 100000IU/L，而现有的其它方法的测定线性范围不超过20000IU/L ;并且适合现有各种全 自动生化分析仪，检验成本低，适合临床批量开展该项目测定。
【专利附图】
【附图说明】 图1为本发明在奥林巴斯AU400/640/2700/5400全自动生化分析仪上的参数设定表 图2为本发明实施例的测试进程图
【具体实施方式】
[0011] 下面结合实施例，对本发明的【具体实施方式】作进一步描述。以下实施例仅用于更 加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。
[0012] 本发明是一种采用胶乳增强免疫比浊法定量测定血清中人绒毛膜促性腺激素的 浓度的试剂盒，包括试剂R1、试剂R2、校准品、质控品，试剂R1内包括摩尔浓度为100mM的 Tris缓冲液、重量占比为1%的β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体、重量占比为1.5%。的 180-300纳米胶乳颗粒、1%。的防腐剂；试剂R2内包括摩尔浓度为80mM的Tris缓冲液、重 量占比为0.5%的β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体、重量占比为2%。的细纳米胶乳颗粒、 1%。的防腐剂；校准品为β人绒毛膜促性腺激素校准液；质控品为β人绒毛膜促性腺激素 质控液1、β人绒毛膜促性腺激素质控液2、β人绒毛膜促性腺激素质控液3。
[0013] 试剂盒内试剂的包装规格为试剂R130mlX 1 ;试剂R210mlX 1。试剂盒置于2-8°C 避光密封保存，自生产之日起可稳定12个月。
[0014] 按照图1所示参数表设定奥林巴斯2700全自动生化分析仪：HCG参数表（OLYMPUS AU400/640/2700/5400适用），※标准品浓度和位置请根据实际情况输入。
[0015]
[0016]
[0017]
[0018] 待测血液样本采集后进行离心处理，取血清待用；使用奥林巴斯2700全自动生化 分析仪，先将试剂R1加入到比色杯中，记录吸光度A1 ;在十秒内加入测定样品血清，于37°C 孵育1分钟；然后，加入试剂R2,充分搅拌；反应5分钟后至反应终点，记录吸光度A2。采 用两点终点法，通过与标准曲线对照，可以计算得样品血清中的HCG浓度。测试进程图见图 2,其单波长：600nm ;反应方法：终点法；反应方向：正；定标方式：非线性Logit-log(5p)或 spline。
[0019]
[0020]
[0021]
[0022] 使用本发明定量测定血清中人绒毛膜促性腺激素的浓度还可以使用于日立7060、 7180 ;罗氏C0BAS ;奥林帕斯2700 ;贝克曼CX9、DXC800 ;东芝40 ;杜邦RXL ;雅培C8000 ;迈 瑞BS300等型号的全自动生化分析仪。
[0023] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精 神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1. 人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1、试剂R2、校准品， 所述试剂R1包括Tris缓冲液、β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体、粗纳米胶乳颗粒；所述 试剂R2包括Tris缓冲液、β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体、细纳米胶乳颗粒；所述校准 品为β人绒毛膜促性腺激素校准液。
2. 根据权利要求1所述的人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒，其特征在于，所述 试剂R1中粗纳米乳胶颗粒为180-300纳米胶乳颗粒；所述试剂R2中细纳米乳胶颗粒为 50-180纳米胶乳颗粒。
3. 根据权利要求2所述的人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒，其特征在于，所述试 剂R1中：Tris缓冲液的摩尔浓度为lOOmM，β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的重量占比 为1%，180-300纳米胶乳颗粒的重量占比为1. 5%。;所述试剂R2中：Tris缓冲液的摩尔浓度 为80mM，β人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的重量占比为0. 5%，50-180纳米胶乳颗粒的重 量占比为2%。。
4. 根据权利要求3所述的人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒，其特征在于，所述试 剂R1中还含有1 %。的防腐剂，所述试剂R2中还含有1 %。的防腐剂。
5. 根据权利要求1?4任一所述的人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒，其特征在于， 所述试剂盒还包括质控品，所述质控品为β人绒毛膜促性腺激素质控液1、β人绒毛膜促 性腺激素质控液2、β人绒毛膜促性腺激素质控液3。
6. 人绒毛膜促性腺激素定量检测试剂盒的用途，用于女性不育症的辅助诊断、辅助生 育技术控制性超量刺激方案的监测以及男性性功能低下、不育、青春期延迟，隐睾的辅助诊 断。
【文档编号】G01N33/76GK104155458SQ201310616309
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2013年11月27日 优先权日:2013年11月27日
【发明者】董静平 申请人:新昌县美迪生物科技有限公司