用补体抑制剂治疗慢性障碍的方法

用补体抑制剂治疗慢性障碍的方法
【专利摘要】在某些方面，本发明提供了治疗需要治疗补体介导的慢性障碍的受试者的方法。在某些方面，本发明提供了治疗需要治疗Th17-相关的障碍的受试者的方法。在某些方面，本发明提供了治疗需要治疗慢性呼吸系统障碍的受试者的方法。在某些方面，本发明提供了将补体抑制剂施用给受试者的方法。在某些实施方案中，一种治疗受试者的方法包括：根据给药方案给所述受试者施用多次剂量的补体抑制剂，所述给药方案在慢性呼吸障碍中实现延长的补体抑制作用。在某些实施方案中，受试者具有慢性阻塞性肺疾病。在某些实施方案中，受试者患有哮喘。
【专利说明】用补体抑制剂治疗慢性障碍的方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2011年6月22日提交的美国临时专利申请号61/499，895的优先权，其整个内容特此通过引用并入。
【背景技术】
[0003]呼吸系统的慢性障碍是其发生率在全世界逐渐增加的发病率和死亡率的主要原因。根据世界卫生组织估测，约8000万人患有中等至严重慢性阻塞性肺病(COPD)，超过300万人在2005年死于COPD(全球所有死亡的约5% )。在2002年，COPD是第五大死亡原因，并且估测提示，在2030年，COPD将是全世界第三大死亡原因，除非可以成功地抑制主要危险因素，特别是烟草应用。哮喘也是一个重大的全球健康问题，据估测影响全世界的3亿个体。哮喘和CCffD都可以对患者的日常功能和生活质量具有虚弱性影响，特别当严重时。这些疾病也代表健康护理成本和丧失生产力的方式的重大负担。
[0004]药理学疗法(诸如支气管扩张剂和皮质类固醇)被广泛用于治疗哮喘和C0PD。但是，尽管进行这样的干预，大部分患者经历持久的征状。此外，这些药剂可以与显著的副作用相关。需要用于治疗影响呼吸系统的障碍的额外药理学疗法。

【发明内容】

[0005]除了别的以外，本发明提供 了治疗补体介导的慢性障碍的方法，所述方法包括:给需要治疗所述障碍的受试者施用补体抑制剂。在某些方面，本发明提供了治疗呼吸系统的慢性障碍的方法，所述方法包括:给需要治疗所述障碍的受试者施用补体抑制剂。在某些实施方案中，所述障碍是哮喘。在某些实施方案中，所述障碍是C0PD。本发明的某些方面至少部分地基于下述认识:补体抑制剂在补体介导的慢性障碍(例如，补体介导的呼吸系统的慢性障碍，诸如哮喘或C0PD)的治疗中表现出长效作用。例如，在某些实施方案中，补体抑制剂的显著减轻补体介导的慢性障碍(例如，慢性呼吸障碍)的一种或多种表现的作用持续时间大于补体抑制剂在静脉内施用时基本上抑制血浆补体激活能力的作用持续时间。
[0006]在某些方面，本发明提供了一种治疗需要治疗慢性呼吸障碍或补体介导的其它慢性障碍的受试者的方法，所述方法包括:根据给药方案给所述受试者施用多次剂量的补体抑制剂，在所述给药方案中，如下平均施用连续给药:(i)在补体抑制剂的血浆浓度降低至不超过前一次给药后达到的最大血浆浓度的20%以后至少2周；(ii)在血浆补体激活能力已经恢复至前一次给药后的基线的至少50%以后至少2周；(iii)以等于补体抑制剂的终末血浆半衰期的至少2倍的间隔；或(iv)以隔开至少3周的间隔。在某些实施方案中，如下平均施用补体抑制剂的连续给药:(i)在补体抑制剂的血浆浓度降低至不超过前一次给药后达到的最大血浆浓度的20%以后2周至6周；(ii)在血浆补体激活能力已经恢复至前一次给药后的基线的至少50%以后2周至6周；(iii)以等于补体抑制剂的终末血浆半衰期的2-5倍的间隔；或(iv)以隔开3周至6周的间隔。在某些实施方案中，隔开至少4周平均施用补体抑制剂的连续给药。在某些实施方案中，在血浆补体激活能力已经恢复至前一次给药后的正常范围内以后至少2周，平均施用补体抑制剂的连续给药。在某些实施方案中，在补体抑制剂的血浆浓度降低至不超过前一次给药后达到的最大血浆浓度的10%以后至少2周，平均施用补体抑制剂的连续给药。在某些实施方案中，在补体抑制剂的血浆浓度降低至不超过前一次给药后达到的最大血浆浓度的5%以后至少2周，平均施用补体抑制剂的连续给药。在某些实施方案中，其中至少部分地基于在受试者群体中测得的补体抑制剂血浆浓度、补体抑制剂血浆半衰期和/或血浆补体激活能力的值，确定给药方案。在某些实施方案中，至少部分地基于被治疗的受试者的补体抑制剂血浆浓度、补体抑制剂血浆半衰期和/或血浆补体激活能力的值，确定给药方案。
[0007]在包含给药的任何方法的某些实施方案中，施用至少5次给药。
[0008]在某些实施方案中，受试者需要治疗哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)或二者。在某些实施方案中，受试者需要治疗严重哮喘。
[0009]在某些实施方案中，通过呼吸途径施用补体抑制剂。在某些实施方案中，使用喷雾器、计量剂量吸入器或干粉吸入器，施用补体抑制剂。在某些实施方案中，使用振动网喷雾器，施用补体抑制剂。
[0010]在某些实施方案中，通过静脉内途径施用补体抑制剂。
[0011]在某些实施方案 中，补体抑制剂作用于C3或补体级联中的C3的上游。在某些实施方案中，所述补体抑制剂会抑制C3、C5或因子B的裂解。
[0012]在某些实施方案中，补体抑制剂包含抗体、适体、肽、多肽或小分子。
[0013]在某些实施方案中，补体抑制剂包含结合C3、C5、因子B或因子D的抗体、适体、肽、多肽或小分子。
[0014]在某些实施方案中,补体抑制剂包含坎普他汀(compstatin)类似物。
[0015]在某些实施方案中，补体抑制剂包含坎普他汀类似物，其序列包含SEQID NO:14,
21、28、29、32、33、34 或 36。
[0016]在某些实施方案中，补体抑制剂包含坎普他汀类似物，其序列包含SEQID NO:3-41中的任一个。
[0017]在某些实施方案中，补体介导的障碍是Thl7_相关的障碍。
[0018]在某些实施方案中，任何治疗方法包括:检测受试者中或得自受试者的样品中的Th 17生物标志物。在某些实施方案中，在包含体液的样品中检测Th 17生物标志物，其中所述体液任选地选自血液、BAL流体、痰、鼻分泌物或尿或它们的组合。在某些实施方案中,所述生物标志物包含至少一种由Thl7细胞产生的细胞因子或促进Thl7细胞的形成、存活或活性的细胞因子。在某些实施方案中，Thl7生物标志物的水平相对于参照的增加指示，所述受试者需要一剂补体抑制剂。在某些实施方案中，所述参照是在没有遭受所述障碍的人的正常范围内，或者是当所述障碍得到良好控制时所述受试者的基线值。在某些实施方案中，所述Thl7生物标志物在施用一剂补体抑制剂之前进行检测，并充当所述受试者需要一剂补体抑制剂的指标。在某些实施方案中，所述生物标志物在施用一剂补体抑制剂之前进行检测，并充当所述受试者需要一剂补体抑制剂的指标，且所述方法包括:在检测所述生物标志物以后的预定时间段内施用补体抑制剂。在某些实施方案中，预定时间段是1、2、3、4、
5、6或7天或2、3或4周。
[0019]在某些方面，一种治疗需要治疗补体介导的慢性障碍的受试者的方法包括:(a)给所述受试者施用至少一剂补体抑制剂；和(b)针对受试者中或得自受试者的样品中的Thl7生物标志物,监测所述受试者。在某些实施方案中,所述方法进一步包括:(c)给所述受试者施用至少一剂额外的补体抑制剂。在某些实施方案中，步骤(b)包括:检测受试者中或得自受试者的样品中的Thl7生物标志物。在某些实施方案中，步骤(b)包括:检测所述生物标志物的水平相对于参照的增加，其中增加的水平指示，所述受试者需要一剂补体抑制剂。在某些实施方案中，步骤(b)包括:检测所述生物标志物的水平相对于参照的增加，其中增加的水平指示，所述受试者需要一剂补体抑制剂，且所述方法进一步包括:(c)给所述受试者施用至少一剂额外的补体抑制剂。在某些实施方案中，步骤(b)包括:检测所述生物标志物的水平相对于参照的增加，其中增加的水平指示，所述受试者需要一剂补体抑制剂，且所述方法进一步包括:(c)在检测生物标志物的预定时间内，给所述受试者施用至少一剂额外的补体抑制剂。在某些实施方案中，预定时间段是1、2、3、4、5、6或7天或2、3或4周。在某些实施方案中，方法进一步包括:给所述受试者施用抗_Thl7试剂。
[0020]在某些实施方案中，抗_Thl7试剂包含抑制Thl7细胞的形成或活性的试剂。在某些实施方案中，抗_Thl7试剂包含这样的药剂:其抑制由Thl7细胞产生的细胞因子的产生或活性，或者其促进Thl7细胞的形成或活性。在某些实施方案中，抗_Thl7试剂包含这样的药剂:其抑制IL-Ιβ、IL-6、IL-21、IL-22、IL-17或IL-23的产生或活性。在某些实施方案中，抗-Thl7试剂包含抗体、小分子、适体、多肽或RNAi剂。在某些实施方案中，抗_Thl7试剂包含抗体、小分子、适体或多肽，其结合IL-10、IL-6、IL-21、IL-22、IL-17*IL-23*结合前述任一种的受体。
[0021]在某些方面，提供了一种药物组合物，其包含补体抑制剂和抗_Thl7试剂。在某些实施方案中，其中所述补体抑制剂会抑制C3活性或C3激活。在某些实施方案中，所述补体抑制剂包含坎普他汀类似物。在某些实施方案中，其中所述抗_Thl7试剂包含抗体、小分子、适体或多肽，其结合IL-1 β、IL-6、IL-21、IL-22、IL-17或IL-23或结合前述任一种的受体。
[0022]在某些方面，一种治疗补体介导的障碍的方法包括:给有此需要的受试者施用包含补体抑制剂和抗_Thl7试剂的组合物。
[0023]在某些方面，一种治疗Thl7_相关的障碍的方法包括:给有此需要的受试者施用补体抑制剂和抗_Thl7试剂。
[0024]在某些方面，提供了一种破坏DC-Th 17-B-Ab-C-DC循环的方法，所述方法包括:给有此需要的受试者施用包含补体抑制剂和抗_Thl7试剂的组合物。
[0025]在某些方面，一种治疗的方法Thl7_相关的障碍包括:给有此需要的受试者施用补体抑制剂和抗_Thl7试剂。
[0026]在某些方面，一种治疗的方法Thl7_相关的障碍包括:给有此需要的受试者施用包含补体抑制剂和抗_Thl7试剂的组合物。
[0027]在某些方面，提供了一种破坏DC-Th 17-B-Ab-C-DC循环的方法，所述方法包括:给有此需要的受试者施用包含补体抑制剂和抗_Thl7试剂的组合物。
[0028]在某些实施方案中，任一种方法包括:针对DC-Th 17-B-Ab-C-DC循环的证据，监测所述受试者。
[0029]在某些实施方案中，任一种方法包括:针对DC-Thl7-B-Ab_C循环的证据，监测所述受试者，和至少部分地基于所述监测的结果，给所述受试者施用补体抑制剂、抗_Thl7试剂、或包含补体抑制剂、抗_Thl7试剂的组合物。
[0030]在某些实施方案中，任一种方法包括:针对Thl7生物标志物，监测所述受试者。
[0031]在某些实施方案中，任一种方法包括:针对Thl7生物标志物，监测所述受试者，和至少部分地基于所述监测的结果，给所述受试者施用补体抑制剂、抗_Thl7试剂、或包含补体抑制剂、抗_Thl7试剂的组合物。
[0032]在某些方面，一种治疗患有补体介导的障碍或处于该障碍风险中的受试者的方法，所述方法包括:针对DC-Thl7-B-Ab-C-DC循环的证据，监测所述受试者，和至少部分地基于所述监测的结果，给所述受试者施用补体抑制剂。在某些实施方案中，所述方法进一步包括:给所述受试者施用抗_Thl7试剂。
[0033]在某些方面，一种治疗患有补体介导的障碍或处于该障碍风险中的受试者的方法，所述方法包括:针对DC-Thl7-B-Ab-C-DC循环的证据，监测所述受试者，和至少部分地基于所述监测的结果，给所述受试者施用补体抑制剂和抗_Thl7试剂。
[0034]在某些方面，一种治疗患有Thl7_相关的障碍或处于该障碍风险中的受试者的方法，所述方法包括:针对DC-Thl7-B-Ab-C-DC循环的证据，监测所述受试者，和至少部分地基于所述监测的结果，给所述受试者施用补体抑制剂。
[0035]在某些实施方案中，所述方法进一步包括:给所述受试者施用抗_Thl7试剂。
[0036]在某些方面，提供了一种治疗患有Thl7_相关的障碍或处于该障碍风险中的受试者的方法，所述方法包括:针对DC-Thl7-B-Ab-C-DC循环的证据，监测所述受试者，和至少部分地基于所述监测的结果，给所述受试者施用补体抑制剂和抗_Thl7试剂。在某些实施方案中，所述补体抑制剂会抑制C3活性或C3激活。在某些实施方案中，所述补体抑制剂包含坎普他汀类似物。`
[0037]在至少部分地涉及抗_Thl7试剂的组合物或方法的某些实施方案中，所述抗-Thl7试剂包含抗体、小分子、适体或多肽，其结合IL-Ιβ、IL-6、IL-21、IL-22、IL-17或IL-23或结合前述任一种的受体。
[0038]在包括针对DC-Th 17-B-Ab-C-DC循环的证据监测受试者的任一种方法的某些实施方案中，这样的监测包括:评估受试者中或得自受试者的样品中的Thl7-相关的生物标志物。
[0039]在包括监测受试者的任一种方法的某些实施方案中，大约每1-2周、2-4周或大约每1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月进行所述监测。
[0040]在任一种方法的某些实施方案中，所述方法包括:施用补体抑制剂、抗_Thl7试剂或二者，在已经检测到DC-Th 17-B-Ab-C-DC循环的证据或增加的Thl7_相关的生物标志物水平的不超过1、2、3、4、5、6或7天或2、3或4周内进行施用。
[0041]在某些方面，提供了一种治疗需要治疗AMD的受试者的方法，所述方法包括:给所述受试者施用抗-1L-23试剂。在某些实施方案中，将所述试剂局部地施用至眼，例如，通过玻璃体内注射。在某些实施方案中，所述受试者患有干性AMD。
[0042]在本申请中提及的所有文章、书籍、专利申请、专利、其它出版物、网站和数据库通过引用并入本文。在说明书和任意并入的参考文献之间中突的情况下，以说明书(包括对其做出的任何修改)为准。除非另有说明，在本文中使用本领域接受的术语和缩写的含义。【专利附图】

【附图说明】
[0043]图1-11的图显示了支气管肺泡灌洗(BAL)流体中的指定细胞因子的浓度，在猪蛔虫(Ascaris suum)攻击0、1和2之前或之后的指定时间点在得自各个食蟹猴的样品中测量。对照动物(蓝色；三角形)；布地奈德治疗的动物(红色；+) ;CA-28治疗的动物(绿色；圆圈)。将在每个时间点的平均细胞因子浓度的图叠加，并显示为连续线以更清楚地描绘在24小时时间段内的变化。
【具体实施方式】
[0044]1.定义
[0045]本文中使用的术语“抗体”包括含有抗原结合位点的抗体和抗体片段。在本发明的某些实施方案中有用的抗体可以源自或衍生自不同的物种，例如，人、非人灵长类动物、啮齿动物(例如，小鼠、大鼠、兔)、山羊、鸡，和/或可以属于不同的抗体类别，例如，人类别:IgG(例如，IgGU IgG2、IgG3、IgG4)、IgM、IgA、IgD 和 IgE0 抗体片段(Fab)可以是，例如，Fab'、F(ab' )2、scFv(单链可变片段)或保留或含有抗原结合位点的其它片段。参见，例如，Allen，T.,Nature Reviews Cancer，第 2 卷，750-765，2002，和其中的参考文献。在本领域中被称作双体、微体或纳米抗体(nanobodies)的抗体可以用在不同的实施方案中。双特异性的或多特异性的抗体可以用在不同的实施方案中。IgG免疫球蛋白(例如，啮齿动物或人IgG)的重链和轻链含有4个框架区(FRl至FR4)，所述框架区分别被3个互补性决定区(⑶Rl至⑶R3)隔开。⑶R，特别是⑶R3区域，尤其是重链⑶R3，主要负责抗体特异性。抗体可以是:嵌合抗体，其中，例如，将啮齿动物起源或非人灵长类动物起源的可变结构域与人起源的恒定结构域融合；或“人源化的”抗体，其中将一些或全部构成抗原结合位点的互补性决定区(CDR)氨基酸(有时与一个或多个框架氨基酸或区域一起)从啮齿动物抗体(例如，鼠抗体)或噬菌体展示抗体“移植”至人抗体，从而保留啮齿动物或噬菌体展示抗体的特异性。因而，人源化抗体可以是重组蛋白，其中仅抗体互补性决定区具有非人起源。应当理解，对在人源化过程中涉及的抗体序列的改变，通常通过在核酸水平的技术(例如，标准重组核酸技术)来实现。在某些实施方案中，仅移植决定特异性的残基(SDR)，即在抗体-配体相互作用中最关键的CDR残基。例如，通过使用具有已知结构的抗原-抗体复合物的三维结构的数据库，或者通过抗体- 结合位点的突变分析，可以鉴别SDR。在某些实施方案中，使用这样的方案，其包括保留更多的CDR残基，即移植所谓的“缩减的”CDR，即包括所有SDR的CDR残基段。关于SDR移植的进一步讨论，参见，例如，Kashmiri, SV, Methods.36(1):25-34(2005)。关于得到人源化抗体的不同方法的综述,参见,例如，Almagro JC, FranssonJ.Humanization of antibodies.Front Biosc1.13:1619-33 (2008)。应该理解源自或衍生自”表示指定抗体序列或其部分的遗传信息的原始来源，其可以不同于最初在其中合成抗体的物种。例如，可以在其基因组整合了人免疫球蛋白基因的啮齿类动物中制备“人”结构域。参见，例如，Vaughan,等人，(1998), Nature Biotechnology, 16:535-539,例如，以制备全人抗体。抗体可以是多克隆的或单克隆的，尽管就本发明的目的而言，单克隆抗体作为治疗剂通常是优选的。用于制备特异性地结合基本上任意目标分子的抗体的方法是本领域已知的。例如，单克隆或多克隆抗体可以从天然来源(例如，从生产抗体的动物(例如，在免疫接种所述分子或其抗原片段以后)的血液或腹水液)纯化，或者可以在细胞培养物中重组地生产并例如从培养基纯化。可以使用亲和纯化，例如，蛋白A/G亲和纯化和/或使用抗原作为亲和试剂的亲和纯化。使用噬菌体展示和有关的技术，可以鉴别合适的抗体。关于其它信息，参见，例如，Kaser,M.和Howard,G.,“Making and Using Antibodies:A PracticalHandbook，，和 Sidhu, S.,“Phage Display in Biotechnology and Drug Discovery，，，CRCPress, Taylor and Francis Group, 2005。用于制备抗体片段的方法是众所周知的。例如，可以制备F(ab' )2 片段，例如，通过使用 Immunopure F (ab' ) 2Preparation Kit (Pierce),其中使用固定化的胃蛋白酶消化抗体，并在固定化的蛋白A柱上纯化。本领域普通技术人员可以优化消化条件(诸如温度和持续时间)，以得到良好F(ab' )2产率。通过标准蛋白凝胶电泳，可以监测由消化得到的F(ab' )2的产率。通过抗体的木瓜蛋白酶消化，或通过还原F(ab' )2中的S-S键，可以得到F(ab')。本文中使用的“单链Fv”或“scFv”抗体片段包含抗体的Vh和\结构域，其中这些结构域存在于单个多肽链中。通常，scFv抗体进一步包含在Vh和\结构域之间的多肽接头，尽管在某些实施方案中，可以使用其它接头连接所述结构域。
[0046]提及数字的术语“大约”或“约”通常包括落入该数字的±10% (在某些实施方案中，±5%，在某些实施方案中，± I %，在某些实施方案中，±0.5% )内的数字，除非另有说明或另外从上下文中显而易见(这样的数字不允许地超过可能值的100%的情况除外)。
[0047]“补体激活能力”表示补体激活水平，其源自向造成最大补体激活的刺激的暴露。通常，使用得自受试者的样品(例如，血液、血浆、血清或其它流体样品，其可以适当地稀释)评估补体激活能力，所述样品样品可以在体外暴露于补体激活刺激。可以将热灭活的样品用作对照。应该理解，为了提供补体激活能力的测量，所述刺激不需要足以造成最大补体激活。例如，在确定的时间段内发生的补体激活程度可以提供补体激活能力的指示。可以测量补体激活，例如，使用合适的测定，诸如基于溶血(例如，绵羊或鸡红血细胞的裂解)、补体激活产物(例如，C3a、C3b、iC3b、C5a、MAC)的沉积或捕获等的功能测定。可以评估途径特异性的补体激活能力，例如，使用适当的刺激和测定条件(例如，钙离子在测定组合物中的存在或缺失)来激活一种或超过一种途径。例如，抗体(例如，IgM或免疫复合物)可以用于激活经典途径；脂多糖(LPS)可以用于激活旁路途径，甘露聚糖可以用于激活凝集素途径的结合甘露糖的凝集素部分等。在某些实施方案中，使用CH50试验，使用抗体敏化的绵羊或鸡红细胞作为经典补体途径的激活剂和试验样品的不同稀释液，测量样品中的总的经典补体活性，以确定产生50%裂解所需的量。通过分光光度计法可以确定溶血百分比。仍然可以实现50%裂解的样品的稀释度越高(即，样品的稀释倍数越大)，补体激活能力越大。在某些实施方案中，使用基于ELISA的测定。在某些实施方案中，基于iC3b水平来评估补体激活，例如，基本上如在PCT/US2010/035871 (W02010135717)(参见实施例)中所述。在某些实施方案中，基于C3b水平来评估补体激活，基本上如在PCT/US2008/001483 (W0/2008/097525)实施例1和2中分别所述。在某些实施方案中，使用MicroVue CH50Eq EIA Kit (经典途径)、MicroVue Bb Plus EIA Kit (旁路途径)、MicroVueiC3b EIA Kit 或 MicroVue C3a Plus EIA Kit (都得自 Quidel Corp.),评估经由经典途径的补体激活。在某些实施方案中，将补体激活产物的量标准化为在暴露于补体激活刺激之iu存在于样品中的完整C3的量。[0048]“补体组分”或“补体蛋白”是补体系统激活所涉及的蛋白或参与一种或多种补体介导的活性的蛋白。经典补体途径的组分包括例Clq、Clr、Cls、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C5b-9复合物(也被称作膜攻击复合物(MAC))，和任何上述的活性片段或酶切割产物(例如，C3a、C3b、C4a、C4b、C5a等)。旁路途径的组分包括例如因子B、因子D和备解素。凝集素途径的组分包括例如MBL2、MASP-1和MASP-2。补体组分还包括可溶性补体组分的细胞结合受体，其中这样的受体在可溶性补体组分结合以后介导这样的可溶性补体组分的一种或多种生物活性。这样的受体包括例如C5a受体(C5aR)、C3a受体(C3aR)、补体受体I (CRl)、补体受体2 (CR2)、补体受体3 (CR3、也被称作⑶45)等。应当理解，术语“补体组分”无意包括充当补体激活的“触发剂”的那些分子和分子结构，例如抗原-抗体复合物、存在于微生物或人工表面上的外来结构等。 [0049]“补体调节蛋白”是参与调节补体活性的蛋白。补体调节蛋白可以减量调节补体活性，例如，通过抑制补体激活或通过灭活一种或多种被激活的补体蛋白或加速一种或多种被激活的补体蛋白的衰变。补体调节蛋白的例子包括Cl抑制剂、C4结合蛋白、簇连蛋白、玻璃体结合蛋白、CFH、因子1、以及细胞结合蛋白CD46、CD55、CD59、CR1、CR2和CR3。
[0050]本文中关于两个或更多个部分使用的“连接的”是指，所述部分彼此以物理方式结合或连接以形成足够稳定的分子结构，以致所述部分在形成连接的条件下(并且优选在使用新分子结构的条件下，例如在生理条件下)保持结合。在本发明的某些优选实施方案中，所述连接是共价连接。在其它实施方案中，所述连接是非共价的。各部分可直接或间接连接。当两个部分直接连接时，它们彼此共价键合，或者足够紧邻以致两个部分之间的分子间力保持其结合。当两个部分间接连接时，它们各自共价地或非共价地连接至第三部分，所述第三部分保持所述两个部分之间的结合。一般而言，当将两个部分说成通过“连接基团”或“连接部分”连接时，所述两个被连接的部分之间的连接是间接的，并且通常所述被连接的部分各自共价地键合至连接部分。使用“接头”可以连接2个部分。接头可以是与要连接的实体在合理时间段内在符合所述实体(其部分可以根据条件经过适当保护)的稳定性的条件下足量反应以产生合理产率的任何合适部分。通常，所述接头含有至少2个官能团，其中之一与第一实体反应，另一个官能团与第二实体反应。应当理解，在接头已经与要连接的实体反应以后，术语“接头”可以表示得到的结构的源自所述接头的部分，或者至少表示不包括反应过的官能团的部分。连接部分可以包含这样的部分:其不参与与要连接的实体的键，且其主要目的可以是使所述实体在空间上彼此分离。这样的部分可以被称作“隔离物”。
[0051]本文中使用的“多肽”表示氨基酸的聚合物，任选包括一个或多个氨基酸类似物。蛋白是由一个或多个多肽组成的分子。肽是相对较短的多肽，长度通常介于约2个与60个氨基酸之间，例如长度介于8个与40个氨基酸之间。术语“蛋白”、“多肽”和“肽”可互换使用。本文中使用的多肽可以含有氨基酸，例如蛋白质中天然存在的氨基酸、蛋白质中非天然存在的氨基酸和/或不为氨基酸的氨基酸类似物。本文中使用的氨基酸的“类似物”可以是在结构上类似于氨基酸的不同氨基酸，或在结构上类似于氨基酸的除氨基酸外的化合物。已知大量本领域公知的在蛋白质中常见的20种氨基酸(“标准”氨基酸)的类似物。可以修饰多肽中的一个或多个氨基酸，例如，通过添加化学实体，如糖基、磷酸酯基、法呢基、异法呢基、脂肪酸基团、用于连接、官能化或其它修饰的接头等。某些非限制性的合适的类似物和修饰描述于W02004026328和/或下面。多肽可以例如在N末端被乙酰化和/或例如在C末端被酰胺化。
[0052]一般而言，使用本领域已知的任意合适的方法，可以得到或生产多肽。例如，多肽可以分离自天然来源，使用重组DNA技术在合适的表达系统(例如，通过重组宿主细胞或转基因的非人动物或植物)中体外或体内生产，通过化学方式诸如固相肽合成和/或使用包括合成肽的化学连接的方法进行合成(参见，例如，Kent, S.，J Pept Sc1.,9(9) =574-93,2003和美国
【发明者】塞德里克·弗朗索瓦, 帕斯卡尔·德沙特莱 申请人:艾普莱斯制药公司