专利名称：食用油脂中缩水甘油酯的检测方法
技术领域：
本发明属于分析化学领域，尤其涉及一种食用油脂中缩水甘油酯的检测方法。
背景技术：
缩水甘油酯类是由甘油中两个羟基缩合脱水得到环氧基和另一羟基与羧酸酯化形成的酯基两部分构成，在食用油脂生产过程中的产生的副产品，是潜在的致癌物质。食用油脂中存在的缩水甘油酯类主要来自油脂的精制过程，尤其是脱臭过程中较高的处理温度 和过长的处理时间，对缩水甘油酯及相关物质的形成影响较大。食用油脂中仅含有痕量的缩水甘油酯，国际上普遍采用的方法有间接法与直接法。间接法有德国国家标准方法和SGSHamburg方法(Kuhlman方法)，这两种方法都是基于对缩水甘油酯是形成氯丙醇的唯一前体，通过相应的处理使缩水甘油酯分解或转化为氯丙醇，GC-MS检测处理前后氯丙醇的含量变化，换算得到食用油脂中缩水甘油酯的浓度。直接法是不破坏缩水甘油酯结构的基础上，使缩水甘油酯与甘油三酯分离，不进行衍生化处理直接检测的方法。直接法有HPLC-MS法和LC-TOF-MS法。采用的方法均需要昂贵的检测仪器以及操作繁杂，不利于实际现场应用，为了克服以上问题本研究开发了快速、准确、简便的紫外分光光度法检测油脂中的缩水甘油酯。对食用油脂的安全进行有效的控制具有深远的意义。
发明内容
本发明的目的在于开发一种快速、准确、简便的缩水甘油酯的检测方法，环氧化合物可与N，N-二乙基二硫代氨基甲酸钠发生特异性反应，反应产物在278nm处具有最大吸收波长，通过吸光度的变化对缩水甘油酯进行定量分析。本发明的技术方案一种食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，其特征在于由以下步骤组成(I)油样的制备准确称取I. Og油样溶解于4mL氯仿中，丙酮定容至10mL。(2)磷酸缓冲液的配制准确称取O. 78g磷酸二氢钠溶解于IOOmL去离子水中，准确称取4. 475g磷酸氢二钠溶解于200mL去离子水中，分别取上述两种溶液97. 5mL和152. 5mL混匀(即按照体积比39:61混合)，即得到O. 05mol/L，PH=7的磷酸缓冲液，现配现用。(3) 二乙基二硫代氨基甲酸盐溶液准确称取N，N_ 二乙基二硫代氨基甲酸钠IOOmg溶解于磷酸缓冲液(PH=7)中，定容至IOOmL,需现配现用。(4)分别取5mLN，N- 二乙基二硫代氨基甲酸钠和5mL油样于15ml具塞管中，在70度下反应30分钟后冷却至室温。(5)添加85%磷酸的磷酸溶液调节反应液PH为I. 5终止反应，酸性条件使多余的N, N- 二乙基二硫代氨基甲酸钠发生分解使缩水甘油酯的衍生物更加稳定。(6)使用分光光度计在278nm处检测吸光度。上述所说的一种食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，其特征在于特定反应物N, N- 二乙基二硫代氨基甲酸钠的使用。上述所说的一种食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，其特征在于所述的磷酸缓冲溶液的配制、O. 78g磷酸二氢钠溶解于IOOmL去离子水中，4. 475g磷酸氢二钠溶解于200mL去离子水中，分别取上述两种溶液97. 5mL和152. 5mL混匀(即按照体积比39:61混合)。上述所说的一种食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，其特征在于所述的终止反应条件通过磷酸溶液调节PH至I. 5。上述所说的一种食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，其特征在于最佳检测波长为 278nm。本发明的优越性在于(I)本发明使用N，N- 二乙基二硫代氨基甲酸钠与缩水甘油酯的衍生化方法，具有非常高的反应特异性。(2)本检测方法具有快速、准确。简便的特点。·
权利要求
1.食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，其特征在于由以下步骤组成 (1)油样的制备准确称取I.Og油样溶解于4mL氯仿中，丙酮定容至10mL。
(2)磷酸缓冲液的配制准确称取O.78g磷酸二氢钠溶解于IOOmL去离子水中，准确称取4. 475g磷酸氢二钠溶解于200mL去离子水中，分别取上述两种溶液97. 5mL和152. 5mL混匀(即按照体积比39:61混合)，即得到O. 05mol/L，PH=7的磷酸缓冲液，现配现用。
(3)二乙基二硫代氨基甲酸盐溶液准确称取N，N-二乙基二硫代氨基甲酸钠IOOmg溶解于磷酸缓冲液(PH=7)中，定容至IOOmL,需现配现用。
(4)分别取5mLN，N-二乙基二硫代氨基甲酸钠和5mL油样于15ml具塞管中，在70度下反应30分钟后冷却至室温。
(5)添加85%磷酸的磷酸溶液调节反应液PH为I.5终止反应，酸性条件使多余的N, N- 二乙基二硫代氨基甲酸钠发生分解使缩水甘油酯的衍生物更加稳定。
(6)使用分光光度计在278nm处检测吸光度。
2.根据权利要求I所述的食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，其特征在于特定反应物N, N- 二乙基二硫代氨基甲酸钠的使用。
3.根据权利要求I所述的食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，其特征在于所述的磷酸缓冲溶液的配制、O. 78g磷酸二氢钠溶解于IOOmL去离子水中，4. 475g磷酸氢二钠溶解于200mL去离子水中，分别取上述两种溶液97. 5mL和152. 5mL混匀(即按照体积比39:61混合)。
4.根据权利要求I所述的食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，其特征在于所述的终止反应条件通过磷酸溶液调节PH至I. 5。
5.根据权利要求I所述的食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，其特征在于最佳检测波长为278nm。
全文摘要
本发明涉及一种食用油脂中缩水甘油酯的检测方法，采用环氧化合物与N,N-二乙基二硫代氨基甲酸钠发生特异性反应，反应产物在278nm处具有最大吸收波长，通过最大吸收波长的吸光度分析对油脂中缩水甘油酯进行定量的方法。本发明具有快速、准确、简便的特点。
文档编号G01N21/33GK102937580SQ20121043145
公开日2013年2月20日 申请日期2012年11月2日 优先权日2012年11月2日
发明者李昌模, 石贞, 尚刚, 邓斌 申请人:天津科技大学, 中粮北海粮油工业(天津)有限公司