一种复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法
【专利摘要】本发明提供一种复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，包括以下步骤：制备标准溶液、对照品溶液和供试品溶液再将其通过高效液相色谱仪检测；然后计算酚酸类化合物相对于丹参素钠的相对校正因子；再通过下述式Ⅳ所示获得复方丹参片中酚酸类化合物的含量。本发明提供的检测方法，通过对一个化合物（丹参素钠）进行检测，达到对多个化合物（丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B）的同时测定，方法简便，快速，准确，普适性好，节省人力、物力、财力，能更全面地反映复方丹参片的质量。</maths>
【专利说明】一种复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物化合物检测领域。具体涉及一种药物的检测方法，尤其涉及一种复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法。
【背景技术】
[0002]复方丹参片为临床常用的心脑血管药物，是由丹参、三七、冰片为原料加辅料制成的中药制剂，能活血化瘀、理气止痛，主要用于治疗冠心病心绞痛。复方丹参片收载于2010年版《中华人民共和国药典》一部，分为三种规格，其中规格一为薄膜衣小片，每片重0.32g，相当于饮片0.6g ;规格二为薄膜衣大片，每片重0.Sg，相当于饮片1.Sg ;规格三为糖衣片，相当于饮片0.6g。
[0003]复方丹参片的药效物质基础明确，包括丹参酮、酚酸、皂苷三大类活性成分，其中酚酸类化合物含量较高的有丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B。2010年版《中华人民共和国药典》一部复方丹参片中酚酸类化合物的含量测定只控制了丹酚酸B —个化合物，监测指标少，不足以全面反映复方丹参片的质量。
[0004]目前对复方丹参片中酚酸类化合物的多指标含量测定方法文献报道较多，但存在诸如检测指标选择不合理、对照品难得或价格昂贵、所建立的方法普适性不强等不足，无法全面、有效、准确地对复方 丹参片中酚酸类化合物各物质的含量进行检测，并且方法繁琐，费时费力。
【发明内容】
[0005]因此，本发明的目的是针对目前无法全面、有效、准确地对复方丹参片中酚酸类化合物各物质的含量进行检测的不足，提供一种复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，该方法简单，易于操作，能够全面、有效、准确地对复方丹参片中酚酸类化合物各物质的含量进行检测。
[0006]针对上述目的，本发明提供的技术方案如下:
[0007]本发明提供一种复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，包括以下步骤:
[0008]步骤1:取酚酸类化合物对照品、丹参素钠对照品和复方丹参片分别将其制成标准溶液、对照品溶液和供试品溶液；
[0009]步骤2:将步骤I制得的标准溶液、对照品溶液和供试品溶液通过高效液相色谱仪检测；
[0010]步骤3:通过下述式III所示计算所述酚酸类化合物相对于所述丹参素钠的相对校正因子:
【权利要求】
1.一种复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，包括以下步骤: 步骤1:取酚酸类化合物对照品、丹参素钠对照品和复方丹参片分别将其制成标准溶液、对照品溶液和供试品溶液； 步骤2:将步骤I制得的标准溶液、对照品溶液和供试品溶液通过高效液相色谱仪检测； 步骤3:通过下述式III所示计算所述酚酸类化合物相对于所述丹参素钠的相对校正因子:
2.根据权利要求1所述的复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，其特征在于，在步骤2和步骤3间还包括对所述酚酸类化合物进行定性检测的步骤。
3.根据权利要求2所述的复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，其特征在于，所述对酚酸类化合物进行定性检测的步骤是通过包括以下步骤的方法进行的: 1)通过下述式I所示计算所述标准溶液中所述酚酸类化合物相对于所述丹参素钠的标准相对保留值；
rk/s = tR(k)/tR(s) 式I 其中，rk/s为所述标准溶液中所述酚酸类化合物相对于所述丹参素钠的标准相对保留值，tK(k)为所述标准溶液中所述酚酸类化合物的保留时间，tK(s)为所述标准溶液中所述丹参素钠的保留时间； 2)再根据下述式II所示获得所述供试品溶液中所述酚酸类化合物相对于所述丹参素钠的相对保留值；
r, k/s=t, R(k)/t, E(s) 式II其中，r/ k/s为所述供试品溶液中所述酚酸类化合物相对于所述丹参素钠的相对保留值，t' K(k)为所述供试品溶液中所述酚酸类化合物的保留时间，t' K(s)为所述供试品溶液中所述丹参素钠的保留时间； 3)比较所述标准溶液中所述酚酸类化合物相对于所述丹参素钠的标准相对保留值和所述供试品溶液中所述酚酸类化合物相对于所述丹参素钠的相对保留值。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，其特征在于，所述酚酸类化合物选自丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B中的任意一种或多种及丹参素钠。
5.根据权利要求4所述的复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，其特征在于，所述丹参素的相对校正因子为1.11 ;或所述原儿茶醒的相对校正因子为4.55^4.96,所述原儿茶醛的相对校正因子优选为4.76 ;或所述迷迭香酸的相对校正因子为1.59^1.78，所述迷迭香酸的相对校正因子优选为1.69 ;或所述紫草酸的相对校正因子为1.32~1.44，所述紫草酸的相对校正因子优选为1.38 ;或所述丹酚酸B的相对校正因子为1.41-1.57，所述丹酚酸B的相对校正因子优选为1.51。
6.根据权利要求4或5所述的复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，其特征在于，所述丹参素的标准相对保留值为1.0O ;或所述原儿茶醛的标准相对保留值为1.41-1.49，所述原儿茶醛的标准相对保留值优选为1.44;或所述迷迭香酸的标准相对保留值为2.75-2.97，所述迷迭香酸的标准相对保留值优选为2.85 ;或所述紫草酸的标准相对保留值为2.90-3.16，所述紫草酸的标准相对保留值优选为3.00 ;或所述丹酚酸B的标准相对保留值为3.37^3.79，所述丹酚酸B的标准相对保留值优选为3.50。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，其特征在于，在步骤I中，取所述酚酸类化合物对照品、所述丹参素钠对照品和所述复方丹参片分别通过加入甲醇溶液中溶解，制成标准溶液、对照品溶液和供试品溶液，优选地，Wug/HiL计，所述酚酸类化合物对照品与甲醇溶液的质量体积比为10~5000:1，优选为10~1000:1 ； 或优选地，以μ g/mL计，所述丹参素钠对照品与甲醇溶液的质量体积比为10~5000:1，优选为 10 ~1000:1 ； 或优选地，以g/mL计，所述复方丹参片与甲醇溶液的质量体积比为1:20~100 ； 更优选地，所述甲醇溶液的体积比浓度为60%，还优选地，所述复方丹参片加入甲醇后还经过超声处理； 最优选地，所述超声处理具体为:在功率250W、频率33kHz的条件下，超声处理15~60mino
8.根据权利要求1至7中任一项所述的复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，其特征在于，在步骤2中，所述高效液相色谱法包括以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，为以乙腈为流动相A，0.3%磷酸水为流动相B，按下述条件进行梯度洗脱: O至5分钟:流动相A与流动相B的体积比为5:95 ； 5至25分钟:流动相A与流动相B的体积比由5:95匀速变化至23:77 ； 25至60分钟:流动相A与流动相B的体积比为23:77。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用紫外检测器，检测波长为225~235nm。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，其特征在于，在步骤2中，理论板数按丹参素钠峰计算应不低于6000。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的复方丹参片中酚酸类化合物的检测方法，其特征在于，在步骤4中，所述外标法包括以下步骤: a.取所述酚酸类化合物对照品和所述复方丹参片分别将其制成对照品溶液和供试品溶液； b.将步骤a制得的对照品溶液和供试品溶液通过高效液相色谱仪进行测定； c.通过比较峰面积得出所 述复方丹参片中所述酚酸类化合物的含量。
【文档编号】G01N30/02GK103776908SQ201210396406
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2012年10月17日 优先权日:2012年10月17日
【发明者】吴笛, 叶秋雄, 李楚源 申请人:广州白云山和记黄埔中药有限公司