专利名称：一种水基胶中硼酸的高效液相色谱定量测定方法
技术领域：
本发明涉及一种水基胶中硼酸的高效液相色谱定量测定方法。
背景技术：
硼酸为白色结晶性粉末或无色微带珍珠状光泽的鳞片，有刺激性，可以用作化学试剂和生产蟑螂、甲虫杀虫剂，在医药上用作止血和防腐剂。硼砂经由食品摄取后可与胃酸作用产生硼酸。硼酸未被允许作为食品添加剂，但民间常有将硼砂或硼酸掺入粮食中作为杀虫防腐剂使用的现象，早年也有将硼酸用作食品防腐剂和膨松剂的的问题。对于胶乳中硼酸，胶乳的保存一般采取两种方式，一种是高氨保存，一种是低氨配合在O. 2-0. 25%之间含量的硼酸来保存的。
高效液相色谱法是20世纪60年代末在经典液相色谱的基础上发展起来的一种现代色谱分析方法，历史上曾出现过不同的叫法，如高压液相色谱、高速液相色谱和高分辨液相色谱。就分离原理而言，高效液相色谱采用了高压输液泵、高效微粒固定相和高灵敏度检测器，高效液相色谱具有分析速度快、分离效率好、检测灵敏度高、分析速度快、样品回收方便和操作自动化程度高等优点。该方法在生物工程、制药工业、食品工业、环境监测和石油化工等领域获得了广泛的应用。目前国内关于硼酸的高效液相色谱方法的测定有部分报道。2002年隋迎军等人报道了高效液相色谱法测定冰硼散中硼砂的含量。建立高效液相色谱法测定冰硼散中硼砂的含量。结果硼砂在进样量O. 14 O. 71 μ g .m]-1范围内有良好的线性关系，r = O. 9992。结论建立含量测定方法简便，准确，重现性好。2007年陈艳等人报道了食品中硼砂的反相高效液相色谱测定法。建立反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定食品中硼砂的方法，方法的检出限为6. 4ng/kg，RSD为2. 3%，回收率为90. 63% 96. 88%，线性范围为O. 032-0. 32μ g/L，相关系数为O. 9992。1995年胡奇志等人报道了硼-姜黄素络合物的高效液相色谱研究及应用。研究了在非水体系中硼与质子化的姜黄素形成的络合物以无水甲醇为溶剂，在C18色谱柱上用甲醇-水(80 20V/V)作流动相(1.00mL/min)分离并检测.硼的校正曲线线性范围为
O.4 3. 2μ g/25mL，硼的校测限为O. 08ng.此法用于复合硼肥的分析，结果令人满意。这些方法的前处理方法多采用浓硫酸混酸质子化的方法处理后进高效液相色谱仪测定的，然而。浓硫酸对操作者有一定的危险性，并且易于对仪器设备造成腐蚀，目前，关于水基胶中硼酸的测定方法，文献鲜有报道，而本测定方法安全、易行并且对仪器设备不会造成损伤。对于测定水基胶中硼酸含量具有重现性好、可操作型强等优点。
发明内容
本发明公开了一种用高效液相色谱法测定水基胶中硼酸的方法。其特征在于，该方法包括以下步骤
(I)称取水基胶样品，加入水溶解于三角瓶中得到溶液，然后超声振荡，离心；(2)取上述溶液的上层清液加入三角瓶中，在三角瓶中加入显色剂溶液，混合均匀后在水浴锅上蒸干；加入溶剂转移至容量瓶中，用溶剂稀释至刻度，混匀；(3)溶液液体采用高效液相色谱仪进行分析；(4)采用峰面积与浓度正比的关系用外标法定量。所述步骤(I)的水基胶样品的称样量为O. l-2g ;加入水的体积为lO-lOOOmL，超声振荡时间10-30min ;离心机转速4000-12000转；离心时间为5_30min。所述步骤(2)中溶液上层清液取O. l-2mL ;显色剂溶液为姜黄素草酸溶液，显色剂 的用量为2-8mL。所述步骤(2)水浴锅温度为30-60度，容量瓶体积为20_100mL。所述步骤(2)中溶剂为甲醇、95%乙醇或无水乙醇中任意一种。所述步骤⑶色谱柱采用反相色谱柱,流动相比例甲醇水=10-90 90-10，色谱柱柱温20-35°C ;高效液相色谱控制流速在O. 2 lmL/min ;采用紫外检测器检测，检测波长500-600nm。与现有技术相比，本发明的有益效果为该方法的测定步骤是经过稀释、超声，离心后的试样中加入姜黄素-草酸显色剂在水浴锅上恒温水浴。蒸干后得到的固体用溶剂溶解定容于容量瓶中。采用高效液相色谱法测定硼-姜黄素络合物的峰面积，对照标准曲线从而计算硼酸的含量。此方法快速可靠，简单易行。
具体实施例方式为便于理解本发明，本发明列举实施例如下。所述实施例仅仅是帮助理解本发明，而不应视为对本发明的具体限制。(I)样品的前处理准确称取Ig水基胶样品，加入50mL水溶解于IOOmL三角瓶中，超声振荡lOmin，离心lOmin。取3mL上层清液加入三角瓶中，(2)溶液配制将上述清液稀释五倍后，在三角瓶中加入显色剂溶液，混合均匀后，在55度水浴锅上蒸干，加入乙醇转移至25mL容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，混匀。(2)溶液液体采用高效液相色谱仪进行分析。按照本发明所确定的方法，将上述溶液，经0. 45 μ m微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪，选择色谱条件测定，即可得到水基胶中硼酸的含量。实施例I按照上述所述方法配制硼酸标准溶液，将上述得到的标准溶液经0. 45 μ m微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪，按照本发明所确定的方法，在如下所述的色谱条件下进行测定。结果显示出峰良好，硼酸的色谱峰与其他组分色谱峰完全分离。其中，色谱柱Extend-C18 ;流动相甲醇水(90 10体积比);色谱柱温25°C；进样量5μ L ;流速lmL/min ;检测器紫外检测器；检测波长550nm。实施例2按照上述所述方法配制水基胶样品溶液，将上述得到的标准溶液经0. 45 μ m微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪，按照本发明所确定的方法，在如下所述的色谱条件下进行测定。结果显示出峰良好，硼酸的色谱峰与其他组分色谱峰完全分离。其中，色谱柱Rx-C18 ;流动相甲醇水(80 20体积比);色谱柱温35°C ;进样量=IOyL ;流速0. 8mL/min ;检测器紫外检测器；检测波长:550nm。实施例3称取O. 5g水基胶样品,加入5OmL水溶解于IOOmL三角瓶中，超声5min,经离心机离心5min。取2mL上层清液加入三角瓶中，将上述得到的溶液经O. 45 μ m微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪，按照本发明所确定的方法，在如下所述的色谱条件下进行测定。结果显示出峰良好，硼酸的色谱峰与其他组分色谱峰完全分离。 其中，色谱柱Ecl ipse XDB ;流动相甲醇水(85 15体积比)；色谱柱温300C ;进样量:20μ L ;流速0. 7mL/min ;检测器紫外检测器；检测波长:550nm。实施例4称取Ig水基胶样品，加入IOOmL水溶解于250mL三角瓶中，振荡15min，经离心机离心15min。取O. 5mL上层清液加入三角瓶中，将上述得到的溶液经O. 45 μ m微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪，按照本发明所确定的方法，在如下所述的色谱条件下进行测定。结果显示出峰良好，硼酸的色谱峰与其他组分色谱峰完全分离。其中，色谱柱Ecl ipse Plus ;流动相甲醇水(75 15体积比)；色谱柱温30 0C ;进样量=IOyL ;流速0. 85mL/min ;检测器紫外检测器；检测波长:550nm。实施例5称取2g水基胶样品，加入150mL水溶解于250mL三角瓶中，超声15min，经离心机离心20min。取ImL上层清液加入三角瓶中，按照上述所述方法配制水基胶样品溶液，将上述得到的标准溶液经O. 45 μ m微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪，按照本发明所确定的方法，在如下所述的色谱条件下进行测定。结果显示出峰良好，硼酸的色谱峰与其他组分色谱峰完全分离。其中，色谱柱Z0RBAX ODS ;流动相甲醇水(50 50体积比)；色谱柱温25°C;进样量15 μ L ;流速0. 2mL/min ;检测器紫外检测器；检测波长550nm。
权利要求
1.一种水基胶中硼酸的高效液相色谱定量测定方法，其特征在于，该方法包括以下步骤 (1)称取水基胶样品，加入水溶解于三角瓶中得到溶液，然后超声或振荡、离心； (2)取上述溶液的上层清液加入三角瓶中，在三角瓶中加入显色剂溶液，混合均匀后在水浴锅上蒸干；加入溶剂转移至容量瓶中，用溶剂稀释至刻度，混匀； (3)溶液液体采用高效液相色谱仪进行分析； (4)采用峰面积与浓度正比的关系用外标法定量。
2.根据权利要求I所述的水基胶中硼酸的高效液相色谱定量测定方法，其特征在于所述步骤(I)的水基胶样品的称样量为O. l-2g ;加入水的体积为lO-lOOOmL，超声或振荡时间10-30min ;离心机转速4000-12000转；离心时间为5_30min。
3.根据权利要求I所述的水基胶中硼酸的高效液相色谱定量测定方法，其特征在于，所述步骤(2)中溶液中上层清液取O. l-2mL ;显色剂溶液为姜黄素草酸溶液，显色剂的用量为 2_8mL。
4.根据权利要求I所述的水基胶中硼酸的高效液相色谱定量测定方法，其特征在于，所述步骤(2)水浴锅温度为30-60度，容量瓶体积为20-100mL。
5.根据权利要求I所述的水基胶中硼酸的高效液相色谱定量测定方法，其特征在于，所述步骤(2)中溶剂为甲醇、95%乙醇或无水乙醇中任意一种。
6.根据权利要求I所述的水基胶中硼酸的高效液相色谱定量测定方法，其特征在于，所述步骤(3)色谱柱采用反相色谱柱，流动相比例甲醇水=10-90 90 —10，色谱柱柱温20— 35°C ;高效液相色谱控制流速在O. 2 lmL/min ;采用紫外检测器检测，检测波长500_600nmo
全文摘要
本发明公开了一种水基胶中硼酸的高效液相色谱定量测定方法。该方法包括以下步骤(1)称取水基胶样品，加入水溶解于三角瓶中得到溶液，然后超声振荡，离心；(2)取上述溶液的上层清液加入三角瓶中，在三角瓶中加入显色剂溶液，混合均匀后在水浴锅上蒸干；加入溶剂转移至容量瓶中，用溶剂稀释至刻度，混匀；(3)溶液液体采用高效液相色谱仪进行分析；(4)采用峰面积与浓度正比的关系用外标法定量。该方法在经过稀释、超声，离心后的试样中加入姜黄素-草酸显色剂在水浴锅上恒温水浴。蒸干后得到的固体用溶剂溶解定容于容量瓶中。采用高效液相色谱法测定硼-姜黄素络合物的峰面积，对照标准曲线从而计算硼酸的含量。此方法快速可靠，简单易行。
文档编号G01N30/06GK102879494SQ20121036297
公开日2013年1月16日 申请日期2012年9月26日 优先权日2012年9月26日
发明者吴晶晶, 黄泰松, 李小兰, 陈志燕, 周芸, 韩云辉, 胡斌, 范忠, 黄世杰, 孟冬玲, 蒋锦峰, 叶长文 申请人:广西中烟工业有限责任公司