专利名称：一种治疗冠心病心绞痛药物的检测方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体涉及ー种治疗冠心病心绞痛药物的检测方法。
背景技术：
心血管疾病为目前发病率最高的四种疾病之一，其中冠心病和心绞痛较为常见。在老年人群中有较高的发病率。随着我国进入老龄化社会，对该类治疗药物的需求也越来越大。益心舒胶囊(标准号WS3-b-2620_97)在治疗冠心病心绞痛方面有好的疗效。其配方如下人參150g、麦冬150g、五味子100g、黄芪150g、丹參200g、川芎IOOg,山楂150g。制备方法如下以上七味，取人參粉碎细粉后备用。五味子、丹參用85%こ醇回流提取2次，第一次3小时，第二次I. 5小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度I. 15 I. 12(20°C )， 得醇浸膏。其余麦冬等加水煎煮2次，第一次2. 5小时，第二次I. 5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至约500ml，加入等量85%こ醇，充分搅拌后，静置过夜，滤去沉淀物，滤液回收こ醇并浓缩至相对密度I. 30 I. 36 (80°C )，得水提浸膏。将上述ニ种浸膏合并后，加入人參细粉及适量淀粉，混合均匀，制粒，干燥，装胶囊，制成1000粒，即得。该药物具有益气复脉，活血化瘀，养阴生津的作用。用于气阴两虚，心肌脉结代，胸闷不舒、胸痛及冠心病心绞痛见有上述症状者。在现有的益心舒胶囊的检测方法中，并未考察人參皂苷Re (C48H82O18)的含量。为进ー步控制该产品的质量，保证检测人员的身体健康，减少环境污染，需要对该产品的检测进行改进，从而更进一歩保证该产品的质量和疗效。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种治疗冠心病心绞痛药物的检测方法，该检测方法能够有效控制药物的质量，使药物质量达到稳定、可控、高效及安全的标准，从而更好地满足医疗需要。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。一种治疗冠心病心绞痛药物的检测方法，该药物由以下重量份的药材制成人參100-500重量份，麦冬100-500重量份，五味子100-300重量份，黄芪150-450重量份，丹參200-600重量份，川芎100-300重量份，山楂200-400重量份，微晶纤维素300-500重量份，甘露醇50-200重量份；该检测方法包括采用高效液相色谱法检测所述药物中的人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1，其中，所述高效液相色谱的条件包括采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱； 采用こ腈溶液为流动相A，水为流动相B，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的过程为第0-25分钟，流动相Aこ腈溶液为15%体积，流动相B水为85%体积；第25-70分钟，流动相Aこ腈溶液为15-22%体积，流动相B水为85-78%体积 ’第70-80分钟，流动相A乙腈溶液为22-30%体积，流动相B水为78-70%体积；第80-105分钟，流动相A乙腈溶液为30-40%体积，流动相B水为70-60%体积；第105-120分钟，流动相A乙腈溶液为40-15%体积，流动相B水为60-85%体积。梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱。在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期，广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子达到良好的分离目的。本发明梯度洗脱的优点1)缩短分析周期；2)提高分离能力；3)峰型得到改善，很少拖尾；4)增加灵敏度。由于本发明治疗冠心病心绞痛药物中化学成分比较多，采用梯度洗脱能明显体现成分定量。在上述检测方法中，所述高效液相色谱的条件还包括柱温为25 40°C，优选为30。。。在上述检测方法中，所述高效液相色谱的条件还包括检测波长为203nm ;流速为 1mT, mirr1。在上述检测方法中，对照品溶液的制备方法如下精密称取人参阜苷Rb1、人参阜苷Rg1对照品适量，加甲醇制成每Iml各含0. 2mg的混合溶液，作为对照品溶液。在上述检测方法中，供试品溶液的制备方法如下取所述药物适量，研细，取约4g，精密称定，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液25ml,蒸干,残洛用水20ml分次转溶至分液漏斗中，用三氯甲烧萃取3次,每次15ml,弃去三氯甲烷液，水层用水饱和的正丁醇萃取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用0. 5% NaOH溶液洗涤4次，每次15ml，合并碱洗液，用水饱和的正丁醇萃取2次，每次10ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗3次，每次15ml，分取正丁醇层，置水浴上蒸干，残渣用20%乙腈溶解，并定容至5ml，作为供试品溶液。在上述检测方法中，所述药物的制备方法如下I)将所述的人参粉成细粉，备用；2)将所述量的五味子、丹参加入6-12倍体积的85%乙醇回流提取，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度I. 10-1. 35的清膏，备用；3)将所述量的麦冬、黄芪、川弯、山楂加6-12倍体积的水煎煮，煎液滤过，加等体积的85%的乙醇，充分搅拌后，静置过夜，得醇沉液；4)将步骤3)所得醇沉液，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度
1.20-1.40的清膏，备用；5)将步骤2)和步骤4)所得的清膏合并，加入步骤I)所得人参细粉及300-500重量份的微晶纤维素和50-200重量份甘露醇混匀，制成微丸。在上述检测方法中，所述药物的制备方法如下I)将所述量的人参粉成细粉，备用；2)将所述量的五味子、丹参加入8倍体积的85%乙醇回流提取，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度I. 15-1. 12的清膏，备用；
3)将所述量的麦冬、黄芪、川芎、山楂加8倍体积的水煎煮，煎液滤过，加等量的85%的こ醇，充分搅拌后，静置过夜，得醇沉液；4)将步骤3)所得醇沉液，滤去沉淀物，滤液回收こ醇并浓缩至相对密度I. 30-1. 36的清膏，备用；5)将步骤2)和步骤4)所得的清膏合并，加入步骤I)所得人參细粉及400重量份的微晶纤维素和100重量份的甘露醇混匀，制成微丸。在ー个具体实施方案中，本发明的检测方法包括如下步骤一、色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A :こ腈，流动相B :7jC，按下表进行梯度洗脱；检测波长为203nm ;柱温30°C ;流速为ImL mirT1。理论板数按人參皂苷Rg1峰计 算应不低于6000。
权利要求
1.一种治疗冠心病心绞痛药物的检测方法，该药物由以下重量份的药材制成 人参100-500重量份，麦冬100-500重量份，五味子100-300重量份，黄芪150-450重量份，丹参200-600重量份，川芎100-300重量份，山楂200-400重量份，微晶纤维素300-500重量份，甘露醇50-200重量份； 该检测方法包括采用高效液相色谱法检测所述药物中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1，其中，所述高效液相色谱的条件包括 采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱； 采用乙腈溶液为流动相A，水为流动相B，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的过程为 第0-25分钟，流动相A乙腈溶液为15%体积，流动相B水为85%体积；第25-70分钟，流动相A乙腈溶液为15-22%体积，流动相B水为85-78%体积；第70-80分钟，流动相A乙腈溶液为22-30%体积，流动相B水为78-70%体积；第80-105分钟，流动相A乙腈溶液为30-40%体积，流动相B水为70-60%体积；第105-120分钟，流动相A乙腈溶液为40-15%体积，流动相B水为60-85%体积。
2.根据权利要求I所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱的条件还包括柱温为25 40°C，优选为30°C。
3.根据权利要求I或2所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱的条件还包括检测波长为203nm ;流速为ImL · mirT1。
4.根据权利要求I至3中任一项所述的检测方法，其特征在于，对照品溶液的制备方法如下 精密称取人参皂苷Rbp人参皂苷Rg1、人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每Iml各含O.2mg的混合溶液，作为对照品溶液。
5.根据权利要求I至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，供试品溶液的制备方法如下 取所述药物适量，研细，取约4g，精密称定，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣用水20ml分次转溶至分液漏斗中，用三氯甲烷萃取3次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水层用水饱和的正丁醇萃取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用O. 5% NaOH溶液洗涤4次，每次15ml，合并碱洗液，用水饱和的正丁醇萃取2次，每次IOml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗3次，每次15ml，分取正丁醇层，置水浴上蒸干，残渣用20%乙腈溶解，并定容至5ml，作为供试品溶液。
6.根据权利要求I至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物的制备方法如下 1)将所述的人参粉成细粉，备用； 2)将所述量的五味子、丹参加入6-12倍体积的85%乙醇回流提取，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度I. 10-1. 35的清膏，备用； 3)将所述量的麦冬、黄芪、川芎、山楂加6-12倍体积的水煎煮，煎液滤过，加等体积的85%的乙醇，充分搅拌后，静置过夜，得醇沉液； 4)将步骤3)所得醇沉液，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度I.20-1. 40的清膏，备用；5)将步骤2)和步骤4)所得的清膏合并，加入步骤I)所得人参细粉及300-500重量份的微晶纤维素和50-200重量份甘露醇混匀，制成微丸。
7.根据权利要求I至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物的制备方法如下 1)将所述量的人参粉成细粉，备用； 2)将所述量的五味子、丹参加入8倍体积的85%乙醇回流提取，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度I. 15-1. 12的清膏，备用； 3)将所述量的麦冬、黄芪、川芎、山楂加8倍体积的水煎煮，煎液滤过,加等量的85%的乙醇，充分搅拌后，静置过夜，得醇沉液； 4)将步骤3)所得醇沉液，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度I.30-1. 36的清膏，备用； 5)将步骤2)和步骤4)所得的清膏合并，加入步骤I)所得人参细粉及400重量份的微晶纤维素和100重量份的甘露醇混匀，制成微丸。
全文摘要
本发明提供一种治疗冠心病心绞痛药物的检测方法，该检测方法包括采用高效液相色谱法检测所述药物中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1，其中，所述高效液相色谱的条件包括采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；采用乙腈溶液为流动相A，水为流动相B，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的过程为第0-25分钟，流动相A乙腈溶液为15％体积，流动相B水为85％体积；第25-70分钟，流动相A乙腈溶液为15-22％体积，流动相B水为85-78％体积；第70-80分钟，流动相A乙腈溶液为22-30％体积，流动相B水为78-70％体积；第80-105分钟，流动相A乙腈溶液为30-40％体积，流动相B水为70-60％体积；第105-120分钟，流动相A乙腈溶液为40-15％体积，流动相B水为60-85％体积。
文档编号G01N30/02GK102768247SQ201210106229
公开日2012年11月7日 申请日期2012年4月11日 优先权日2012年4月11日
发明者梁小平, 梁起臣 申请人:梁丽