专利名称：一种藿香正气口服液中甘草的鉴别方法
技术领域：
本发明涉及中成药中有效成分的质量控制方法，具体来说，是藿香正气口服液中甘草的鉴别方法。
背景技术：
藿香正气散，是千古名方之一，功用解表化湿，理气和中。主治夏季和秋季外感风寒，内伤湿滞证，表现为发冷、头疼、呕吐、拉肚子，腹胀，舌苔很厚，为夏季感冒良方。由传统中药藿香正气水改进而成的藿香正气口服液，是根据中医学理论制成的纯中药制剂，解表化湿，理气和中。用于外感风寒、内伤湿滞或夏伤暑湿所致的感冒，症见头痛昏重、胸膈痞闷、脘腹胀痛、呕吐泄泻；胃肠型感冒见上述证候者，口服，一次5 10ml，一日 2次，现收载于《中国药典》2010年版一部。藿香正气口服液的制备方法包括以下步骤苍术80g、陈皮80g、厚朴(姜制)80g、 白芷120g、茯苓120g、大腹皮120g、生半夏80g、甘草浸膏10g、广藿香油O. 8ml、紫苏叶油 O. 4ml ;制备方法是取厚朴加60%乙醇加热回流I小时，取乙醇液备用；苍术、陈皮、白芷加水蒸馏，收集蒸馏液，蒸馏后的水溶液滤过，备用；大腹皮加水煎煮二次，滤过；茯苓加水煮沸后于80°C温浸二次，滤过；生半夏用水泡至透心后，另加干姜6. Sg,加水煎煮二次，滤过。合并上述各滤液，浓缩至相对密度I. 10 I. 20，(50°C测)，加入甘草浸膏，混匀，加入 2倍量乙醇使沉淀,滤过,滤液与厚朴乙醇提取液合并，回收乙醇,加入广藿香油、紫苏叶油及上述蒸馏液，混匀，加水使全量成1025ml，用氢氧化钠溶液调节PH值至5. 8 6. 2，静置， 滤过，灌装，灭菌，即得棕色的澄清液体；味辛、微甜。目前藿香正气口服液甘草的鉴别方法是取本品30ml，用乙醚振摇提取2次，每次 10ml，弃去乙醚液，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇液，用水洗涤2 次，每次10ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材lg，加乙醚20ml，加热回流15分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加甲醇 20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用正丁醇振摇提取3次，同法制成对照药材溶液。再取甘草酸铵对照品，加甲醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正丁醇-甲醇-氨溶液(8—10) (5 I. 5 2)为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。执行该标准时发现，其方法重现性较差，相同质量的产品不同人员不同实验室检验结果差异较大，在与对照品色谱相应的位置上，无相同颜色的斑点或者斑点很微弱以至于无法看清。甘草的鉴别方法有很多，举例如下中国专利申请200910168454. 9 (公开号为CN101991785A)公开了一种银翘解毒软胶囊药物及其制备方法与质量检测方法。其中甘草的鉴别方法为取银翘解毒软胶囊内容物2-4g，加10-30%的盐酸10-30ml及三氯甲烷20_30ml，置水浴上回流O. 5-1. 5小时，放冷，分取三氯甲烷层，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至5ml，作为供试品溶液；另取甘草次酸对照品，加甲醇制成每IOml含O. Omg的溶液，作为对照品溶液；照高效液相色谱法， 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-O. I %磷酸溶液比例为60-80 30为流动相， 检测波长为240-260nm，理论板数按甘草次酸计算应不低于1000，分别取上述两种溶液各 5-20 μ I进行测定，供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。中国专利申请200910211268. 9(公开号为CN101897942A)公开了一种温脾益肾，泄浊祛瘀的药物组合物的检测方法，该发明中提供了甘草的检测方法取相当于原药材5-15的温脾益肾、泄浊祛痰的药物组合物，加3ml盐酸和20ml氯仿，加热回流O. 5-2小时，放冷，滤过，蒸干，残渣加无水乙醇溶解使其成1ml，作为供试品溶液，另取甘草对照药材
O.5g，加3ml盐酸和20ml氯仿，加热回流O. 5-2小时，放冷，滤过，蒸干，残渣加无水乙醇溶解使成Iml,作为对照药材溶液；再取甘草次酸对照品,加无水乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以3-7 8-15 2-6 O. 4-0. 8的石油醚-苯-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钥酸乙醇溶液，在110°C加热至斑点显色清洗，置日光下检视，供试品色谱中，分别在对照药材和对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色斑点。上述两种方法中，甘草使用了氯仿(即三氯甲烷)做溶剂进行的鉴别，用氯仿提取有阴性干扰，鉴别方法专属性差。本发明就是为了克服上述缺陷，建立一种专属性强、重现性好的甘草的鉴别方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种藿香正气口服液中甘草的鉴别方法。本发明提供的藿香正气口服液中甘草的鉴别方法，包含供试品溶液的配制、对照药材溶液的配制、对照品溶液的配制和薄层色谱分析，其中供试品的取样量为5ml，用5ml 水稀释；对照药材的取样量为O. 5g ;供试品溶液的制备和对照药材溶液的制备过程中，在用正丁醇萃取前，加盐酸O. 2ml酸化。本发明提供的藿香正气口服液中甘草的鉴别方法包括以下步骤I)取藿香正气口服液5ml，加水5ml，摇匀，用乙醚振摇提取2次，每次10ml，弃去乙醚液，加盐酸O. 2ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇液， 用水洗涤2次，每次10ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；2)另取甘草对照药材O. 5g，加乙醚20ml，加热回流15分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐酸
O.2ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，同法制成对照药材溶液；3)再取甘草酸铵对照品，加甲醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液；4)照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各 4μ I,分别点于同一娃胶GF254薄层板上，以正丁醇-甲醇-氨溶液(8 — 10) (5 : I. 5 : 2) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明提供藿香正气口服液中的甘草的鉴别方法具有以下优点
I、中国药典2010年版一部中公开的标准中I)取样量30ml，斑点严重拖尾；2)因样品取样量减少至5ml,不利于萃取充分；3)因为甘草对照药材用量由Ig减少到O. 5g点样量4μ 1，所以相当取对照药材
O.5g点样量2 μ I。以对照药材(Ig)溶液2 μ I及供试品溶液4 μ I点样分离效果比较好。 故确定甘草对照药材(Ig — 2ml)溶液2 μ 1，供试品(5ml — 2ml)溶液4 μ I。为保持对照药材溶液和供试品溶液点样量一致，确定将甘草对照药材用量减少至O. 5g，制成对照药材溶液2ml，点样4 μ I。4)在用正丁醇萃取后的水溶液中，仍可检出甘草酸，说明正丁醇提取的不充分，会影响鉴别效果。与中国药典2010年版一部中公开的标准相比，本发明提供的鉴别方法具有以下区别(I)将样品取样量由30ml减少至5ml,可明显减少斑点拖尾,说明原标准的取样量过大；(2)增加了将样品溶液“加水5ml”稀释的步骤，加水后药液与氯仿接触面较大，可以充分萃取有效成分；(3)将对照药材取样量由Ig减少至O. 5g ；(4)供试品溶液制备和对照药材溶液制备过程中，在用正丁醇萃取前，增加了 “加盐酸O. 2ml”酸化的步骤，在按照现行《中国药典》2010年版一部规定的方法基础上，仅在制备供试品溶液和对照药材溶液过程中，正丁醇萃取之前，将溶液加盐酸Iml使之酸化。结果表明萃取后的水溶液中，甘草酸含量显著减少。2、现有鉴别方法无对应斑点或者斑点很微弱以至于无法看清，重现性较差，相同质量的产品不同人员不同实验室检验结果差异较大。与现有鉴别方法相比，本发明提供的鉴别方法有鉴别斑点清晰，重现性好，专属性强。
图I :藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱，从左至右依次为1、甘草酸铵对照品溶液4μ I ;2、甘草对照药材溶液①1μ I ;3、甘草对照药材溶液①2μ I ;4、甘草对照药材溶液①4μ I ;5、供试品溶液(太极11020087批)4μ I ;6、供试品溶液(亚东1107003 批)①2μ I ;7、供试品溶液(亚东1107003批)①4μ I ;图2 :藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱，从左至右依次为1、甘草酸铵对照品溶液4μ I ;2、甘草对照药材溶液①2μ I ;3、甘草对照药材溶液②2μ I ;4、甘草对照药材溶液②4μ I ;5、供试品溶液(亚东1107003批)②Iy I ;6、供试品溶液(亚东1107003 批)②2μ I ;7、供试品溶液(亚东1107003批)②4μ I ;图3 :藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱，从左至右依次为1、甘草酸铵对照品溶液4 μ I ;2、甘草对照药材溶液③2 μ I ;3、甘草对照药材溶液②2 μ I ;4、供试品溶液(亚东 IlO7OO3批)③2μ I ;5、供试品溶液(亚东IlO7OO3批)④2μ I ;图4:藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱，从左至右依次为1、甘草酸铵对照品溶液4μ I ;2、甘草对照药材溶液③1μ I ;3、甘草对照药材溶液③2μ I ;4、甘草对照药材溶液③4μ I ;5、供试品溶液(亚东1107003批)③Iy I ;6、供试品溶液(亚东1107003 批)③2μ I ;7、供试品溶液(亚东1107003批)③4μ ;图5 :藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱，从左向右依次为1、甘草酸铵对照品溶液4μ I ;2、甘草对照药材溶液④4μ I ;3、供试品溶液(亚东1107003批)③4μ I ;4、供试品溶液(亚东1107003批)③4μ I ;5、供试品溶液(亚东1107003批)③4μ I ;6、藿香正气口服液阴性溶液4μ I ；图6 :藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱，从左至右依次为1、甘草酸铵对照品溶液4μ I ;2、甘草对照药材溶液④4μ I ;3、供试品溶液(亚东1107003批)③4μ I ;4、供试品溶液(亚东1107003批)③4μ I ;5、供试品溶液(亚东1107003批)③4μ I ;6、藿香正气口服液阴性溶液4μ I ；图7 :藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱，从左至右依次为1、甘草酸铵对照品溶液4μ I ;2、甘草对照药材溶液④4μ I ;3、藿香正气口服液(亚东1107003批)4 μ I ;4、藿香正气口服液(亚东1107004批)4 μ I ;5、藿香正气口服液(亚东1107005批)4 μ I ；图8 :藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱，从左至右依次为1、甘草酸铵对照品溶液4μ I ;2、甘草对照药材溶液④4μ I ;3、藿香正气口服液(太极10121254批)4 μ I ;4、藿香正气口服液(太极11020087批)4μ I ;5、藿香正气口服液(太极11050113) 4 μ I。
具体实施例方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例I :《中国人民共和国药典》2010年版一部1231页鉴别的(4)I、试剂与试药藿香正气口服液北京亚东生物制药有限公司，批号为1107003、1107004、 1107005。太极集团重庆涪陵制药厂有限公司，批号:10121254、11020087、11050113。对照品及对照药材甘草酸铵对照品(供含量测定用，中国药品生物制品检定所提供)批号110731-200615 ;甘草对照药材(供鉴别测定用，中国药品生物制品检定所提供)，批号:120904-200914。2、原鉴别方法I)取藿香正气口服液30ml，用乙醚振摇提取2次，每次10ml，弃去乙醚液，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次10ml，弃去水液， 正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。2)另取甘草对照药材lg，加乙醚20ml，加热回流15分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用正丁醇振摇提取3次，同法制成对照药材溶液。3)再取甘草酸铵对照品，加甲醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶 GF254薄层板上，以正丁醇-甲醇-氨溶液(8— 10) (5 I. 5 2)为展开剂，展开，取出， 晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。结果见附图1，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，无相同颜色的斑点或者斑点很微弱以至于无法看清。
(注为便于与以下修改方法制成的供试品溶液、对照药材溶液相区别，用本方法制备的供试品溶液分别标示为供试品溶液(亚东1107003批)①、供试品溶液(太极 11020087批)；对照药材溶液标示为甘草对照药材溶液①，下同)。在申请人执行实施例I的方法时发现在用正丁醇萃取后的水溶液中，仍可检出甘草酸。因此，在按照现行《中国药典》2010年版一部规定的方法基础上，仅在制备供试品溶液和对照药材溶液过程中，正丁醇萃取之前，将溶液加盐酸Iml使之酸化。结果表明萃取后的水溶液中，甘草酸含量显著减少。实施例2 :改进标准I、正丁醇萃取前盐酸酸化I. I 酸化I)取藿香正气口服液30ml，用乙醚振摇提取2次，每次10ml，弃去乙醚液，加盐酸 lml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次 10ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液②。2)另取甘草对照药材lg，加乙醚20ml,加热回流15分钟,滤过,弃去乙醚液,药洛挥干溶剂，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，加盐酸 lml，摇匀，用正丁醇振摇提取3次，同法制成对照药材溶液②。3)照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述各溶液(甘草酸铵对照品溶液4 μ 1，对照药材溶液①2 μ 1，对照药材溶液②2 μ 1、4 μ 1，供试品溶液
②(亚东1107003批)1μ1、2μ 1、4μ 1)，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正丁醇-甲醇-氨溶液(8—10) (5 1.5 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。结果见附图2，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，但是点样4μ I斑点严重拖尾,说明点样量或者取样量过大，以I μ I点样量最好。甘草对照药材(Ig)溶液在相同点样量(2 μ I)情况下，修改后方法明显好于原标准方法。本方法可以鉴别出藿香正气口服液中的甘草，但是薄层分离效果不够理想，尤其是供试品溶液的制备方法需要继续优化，具体见附图2。I. 2盐酸加入量的考察I)取藿香正气口服液5ml,加水5ml,摇勻，用乙醚振摇提取2次,每次IOml,弃去乙醚液，加盐酸O. 2ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次10ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液③。2)取藿香正气口服液5ml，加水5ml，摇匀，用乙醚振摇提取2次，每次10ml，弃去乙醚液，加盐酸O. 4ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次10ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液④。3)另取甘草对照药材lg，加乙醚20ml，加热回流15分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，盐酸加
O.4ml，摇匀，用正丁醇振摇提取3次，同法制成对照药材溶液③。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述各溶液(甘草酸铵对照品溶液4 μ 1，对照药材溶液③2 μ 1，对照药材溶液②2 μ 1，供试品溶液③和④各 2 μ I),分别点于同一娃胶GF254薄层板上，以正丁醇-甲醇-氨溶液(8 — 10) (5 : I. 5 : 2) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。结果见附图3，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，方法选择的两个加盐酸量对结果的判定无明显差异。故选择较小的加盐酸量即可 (每20ml溶液或水加盐酸O. 4ml)。2、取样量及点样量的选择照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述各溶液(甘草酸铵对照品溶液4 μ I，对照药材溶液③I μ I、2 μ I、4 μ I，供试品溶液③1μ1、2μ1、4μ1)， 分别点于同一娃胶GF254薄层板上，以正丁醇-甲醇-氨溶液(8 — 10) (5 : I. 5 : 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。以对照药材(Ig)溶液2μ I点样及供试品溶液4μ I点样分离效果比较好。故确定点样量为甘草酸铵对照品溶液(2mg/ml)4l·! 1，甘草对照药材(Ig — 2ml)溶液2 μ 1，供试品(5ml — 2ml) 溶液4μ1。见附图4，如果点样量小则斑点不清晰，点样量大容易拖尾，合适的点样量斑点清晰、不拖尾，易于鉴别。为保持对照品溶液、对照药材溶液和供试品溶液点样量一致，确定将甘草对照药材用量减少至O. 5g，制成对照药材溶液2ml，点样4 μ I。3、专属性实验及不同厂家薄层板的选择另取甘草对照药材O. 5g，加乙醚20ml，加热回流15分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，加O. 2ml 盐酸，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，同法制成对照药材溶液④。另取按藿香正气口服液处方制备的甘草阴性样品5ml，同法制成阴性供试品溶液。取上述供试品溶液、甘草酸铵对照品溶液及甘草对照药材溶液，照薄层色谱法 (中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液(甘草酸铵对照品溶液4 μ I、对照药材溶液④4 μ I、供试品溶液③4 μ 1、4 μ 1、4 μ I，阴性供试品溶液4 μ I，分别点于不同厂家生产的同一硅胶GF254薄层板上，以正丁醇-甲醇-氨溶液(8 — 10) (5 : I. 5 : 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。结果供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，分离效果比较好，阴性无干扰，不同厂家生产的薄层板对检验结果无影响。最终确定藿香正气口服液中甘草的鉴别方法如实施例3所示。实施例3 :藿香正气口服液中甘草的鉴别方法I、鉴别方法I)取藿香正气口服液5ml,加水5ml,摇勻，用乙醚振摇提取2次,每次10ml,弃去乙醚液，加盐酸O. 2ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次IOml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。2)另取甘草对照药材O. 5g，加乙醚20ml，加热回流15分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐酸
O.2ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，同法制成对照药材溶液。3)再取甘草酸铵对照品，加甲醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各 4μ I,分别点于同一娃胶GF254薄层板上，以正丁醇-甲醇-氨溶液(8 — 10) (5 : I. 5 : : 2) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。2、色谱见附图5、6，均显示色谱清晰、无斑点拖尾等不良现象，且重现性强，其中附图5使用的薄层板是由青岛海洋化工分厂生产，附图6使用的薄层板是由青岛渔民硅胶试剂厂生产。3、样品的重现性检验按照确定的方法对本公司三批藿香正气口服液样品(北京亚东生物制药有限公司，批号1107003、1107004、1107005)及市售三批太极藿香正气口服液样品(太极集团重庆涪陵制药厂有限公司，批号10121254、11020087、11050113)进行检验，结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，具体见附图7、8。虽然，上文中已经用一般性说明具体实施方式
及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
权利要求
1.藿香正气口服液中甘草的鉴别方法，包含供试品溶液的配制、对照药材溶液的配制、 对照品溶液的配制和薄层色谱分析，其特征在于，供试品的取样量为5ml，用5ml水稀释；对照药材取样量为0. 5g ;供试品溶液制备和对照药材溶液制备过程中，在用正丁醇萃取前， 加盐酸0. 2ml酸化。
2.根据权利要求I所述的鉴别方法，其特征在于，供试品溶液的制备方法包括以下步骤取藿香正气口服液5ml，加水5ml，摇匀，用乙醚振摇提取2次，每次10ml，弃去乙醚液， 加盐酸0. 2ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇液，用水洗涤 2次，每次10ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，制成供试品溶液。
3.根据权利要求I所述的鉴别方法，其特征在于，对照药材溶液的制备方法包括以下步骤取甘草对照药材0. 5g,加乙醚20ml,加热回流15分钟,滤过,弃去乙醚液,药洛挥干溶剂，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐酸0. 2ml, 摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，同法制成对照药材溶液。
4.根据权利要求1-3任一项所述的鉴别方法，其特征在于，该方法包括以下步骤1)取藿香正气口服液5ml，加水5ml，摇匀，用乙醚振摇提取2次，每次IOml，弃去乙醚液，加盐酸0. 2ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次IOml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次10ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；2)另取甘草对照药材0.5g，加乙醚20ml，加热回流15分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐酸0.2ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，同法制成对照药材溶液；3)再取甘草酸铵对照品，加甲醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液；4)照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4iU，分别点于同一硅胶GF254薄层板上， 以正丁醇-甲醇-氨溶液(8—10) (5 1.5 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
全文摘要
本发明涉及藿香正气口服液中甘草的鉴别方法，包含供试品溶液的配制、对照药材溶液的配制、对照品溶液的配制和薄层色谱分析，供试品的取样量为5ml，用5ml水稀释；对照药材取样量为0.5g；供试品溶液制备和对照药材溶液制备过程中，在用正丁醇萃取前，加盐酸0.2ml酸化。现有鉴别方法无对应斑点或者斑点很微弱以至于无法看清，重现性较差，相同质量的产品不同人员不同实验室检验结果差异较大。与现有鉴别方法相比，本发明提供的鉴别方法有鉴别斑点清晰，重现性好，专属性强。
文档编号G01N30/90GK102590436SQ20121006904
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月15日 优先权日2012年3月15日
发明者付建家, 付立家, 赵敏姿, 马云 申请人:北京亚东生物制药有限公司