专利名称：检测乙二醛、乙醛酸、乙醛的高效液相色谱方法
技术领域：
本发明涉及一种高效液相色谱检测乙二醛、乙醛酸、乙醛的方法，尤其是涉 及一种采用盐酸羟胺衍生，检测乙二醛、乙醛酸、乙醛的高效液相色谱法。属于 化学工业中的化学分析及仪器分析技术领域。
背景技术：
乙二醛(glyoxal)又称草酸醛，是最简单的"-二羰基化合物，分子中含有两 个相互连接的羰基，除了具有脂肪醛的通性外，还具有一些特殊的化学性质，可 与醇、胺、酰胺、醛和含羟基的化合物等进行加成或缩合反应，还可以与类蛋白 动物胶、纤维素、聚乙烯醇以及脲等发生交联反应，是一种用途十分广泛的化工 原料和中间体，在造纸、纺织印染、涂料、医药、建材、石化、环保等方面都有 着广泛的应用。
目前，生产乙二醛工艺主要有乙二醇气相氧化法和乙醛硝酸氧化法两种。乙 二醇空气氧化法过程简单，产品收率较高，但原料成本相对较高，且产物中含有 甲醛，难以满足医药等行业的要求。乙醛硝酸氧化法原材料成本低，反应条件温 和，突出优点是产物中不含甲醛，能满足医药、香料及日用化工等行业的要求， 近年来倍受关注。然而，关于乙醛氧化法生产乙二醛的产物及副产物的定量检测， 工业上一直以来都是采用传统的化学分析测定乙二醛、乙醛和有机酸量，工序多， 比较耗时，对反应过程各产物的定性及定量的仪器分析方法尚未解决，尤其是同 时检测各产物的研究尚未见报道。
近年来，有些学者对乙二醛、乙醛酸的分析进行了研究，如胡军等(胡军, 张新胜，吴明东，等.乙二醛阳极氧化制乙醛酸过程的化学分析方法.华东理工 大学学报,2001, 27(1): 34-37)采用康尼査罗反应测定乙二醛阳极氧化制乙醛酸的 电解液中的乙二醛含量，醛总量用亚硫酸钠法测定，乙醛酸的定量用醛总量减去 乙二醛的量，检测费时、干扰和误差都比较大；徐嘉凉等(徐嘉凉，江向东，汤 晓东，等.紫外分光光度法测定乙二醛含量的研究.分析试验室，1998, 17(5): 41-44)采用紫外分光光度法测定乙二醛的含量，取得了一定的成效，但紫外分 光光度法不够直观、易受干扰，且乙二醛和羟胺反应仅生成乙二醛二肟，而没有 乙二醛单肟的生成，理论上来说这一结论有待考证。Shigehisa Uchiyama等 (Shigehisa Uchiyama, Erika Matsushima, Hiroshi Tokunaga, et. al. Determination oforthophthalaldehyde in air using 2,4-dinitrophenylhydrazine-impregnated silica cartridge and high-performance liquid chromatography. Journal of Chromatography A, 2006, (1116): 165-171.)采用2， 4-二硝基苯肼(DNPH)作为衍生试剂检测空气 中的邻苯二醛，由于醛类物质与2， 4-二硝基苯肼反应全部转化为2， 4-二硝基 苯腙需要很长的反应时间，分析周期较长，且2， 4-二硝基苯肼有一定毒性，稳 定性差，不易操作。如何准确有效地分析乙二醛、乙醛酸、乙醛混合液中的各组 分的含量是一项亟待解决的技术问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种快速、准确，且能单独或同时检测乙二醛、乙酸 酸、乙醛的高效液相色谱分析方法，以弥补现有的分析方法检测周期长、不能同 时分析、定量检测等不足。
本发明的技术方案为 一种乙二醛、乙醛酸、乙醛的高效液相色谱(HPLC) 检测方法，具体步骤如下
A、乙二醛标准曲线的绘制
1) 、乙二醛标准溶液的配制用移液管取适量乙二醛溶液，分别用去离子
水稀释，并定容，配制5 7个浓度介于0.1g/L 2g/L之间的乙二醛标 准溶液；
2) 、衍生试剂的配制称取适量盐酸羟胺，用去离子水溶解配制得1 10g/L
盐酸羟胺溶液；
3) 、乙二醛衍生制取肟化试样分别取相同体积、不同浓度的上述乙二醛
标准溶液，分别加入浓度为1 10g/L过量的盐酸羟胺溶液，盐酸羟胺 与醛基的摩尔比为1.5 : 1 50 : 1，用弱酸盐溶液调节pH为4 5后， 将所有样品体积调节一致，在10 80。C下，反应10 120分钟，得到 乙二醛肟化衍生物；
4) 、配制pH为2 5的去离子水，与色谱纯乙腈一起作为液谱分析流动相；
5) 、用高效液相色谱分析上述步骤3)所配制的不同浓度的乙二醛肟化衍
生物试样，采用紫外检测器，色谱条件为
色谱柱ZORBAX Eclipse XDB-C18， 5|mi ， 4.6x 250腿；
流动相乙腈与水的体积比为5/95 60/40;
流速0.6 2ml/min;
柱温20 50°C; 进样量1 20//L;
5检测波长200~300nm。 6)、以不同浓度的乙二醛肟化衍生物的响应峰面积对浓度作图，得到乙 二醛的标准曲线；
B、 乙醛酸标准曲线的绘制
1) 、乙醛酸标准溶液的配制分别称取不同质量的乙醛酸试样，用去离子
水溶解，并定容，配制5 ~7个浓度为0.01g/L~lg/L之间的乙醛酸标准 溶液。
2) 、按照步骤A中2)配制步骤配制盐酸羟胺；
3) 、乙醛酸衍生制取肟化试样取与步骤A中3)的乙二醛标准溶液体积
相同的，上述步骤l)中配制的不同浓度的乙醛酸标准溶液，加入与步 骤A中3)体积相同的盐酸羟胺，用弱酸盐溶液调节pH为4 5后， 将所有样品体积调节一致，在10 8(TC下，反应10 120分钟，得 到乙醛酸躬化衍生物；
4) 、采用与A中4) 6)同样的步骤绘制乙醛酸的标准曲线；
C、 乙醛标准曲线的绘制
1) 、乙醛标准溶液的配制用移液管移取适量乙醛溶液，分别用去离子水
稀释，并定容，配制5~7个浓度介于5g/L~100g/L之间的乙醛标准溶 液；
2) 、衍生试剂的配制称取盐酸羟胺，用去离子水溶解配制得10 100g/L
盐酸羟胺溶液；
3) 、乙醛衍生制取肟化试样取与步骤A中3)的乙二醛标准溶液体积相
同的、上述步骤l)中配制的不同浓度的上述乙醛标准溶液，加入与 步骤A中3)体积相同的10 100g/L盐酸羟胺，用弱酸盐溶液调节 pH为4 5后，将所有样品体积调节一致，在10 80。C下，反应10 120分钟，得到乙醛肟化衍生物；
4) 、采用与A中4)-6)同样的步骤绘制乙醛的标准曲线；
D、 未知浓度样品的衍生和检测
1) 、按照步骤A中2)配制步骤配制盐酸羟胺；
2) 、取与步骤A中3)体积相同的含有未知浓度的乙二醛、乙醛酸、乙醛
混合溶液，加入与步骤A中3)相同体积的盐酸羟胺，用弱酸盐溶液 调节pH为4 5后，将体积调节与前述一致，在10 8(TC下，反应 10 120分钟，得到衍生样品；
3) 、釆用与A中4)-5)相同的步骤对衍生样品进行高效液相色谱分析；4)、将衍生样品的检测结果分别与乙二醛标准曲线、乙醛酸标准曲线和 乙醛标准曲线进行比照，求得样品溶液中乙二醛、乙醛酸和乙醛的含
优选上述乙二醛标准溶液配制中可配制5 7个浓度为0.1g/L~lg/L之间的乙 二醛标准溶液；乙醛酸标准溶液配制中可配制5~7个浓度为0.05g/L~0.5g/L之 间的乙醛酸标准溶液；乙醛标准溶液可配制5 ~7个浓度为10g/L 100g/L之间的 乙醛标准溶液。
优选上述A、 B、 C、 D步骤中衍生过程优选盐酸羟胺与醛基的摩尔比为 2 : 1 20 : 1，在20 6(TC下，反应25 60分钟。
上述A、 B、 C、 D步骤中高效液相色谱检测过程优选流动相中的去离子水 的pH为2.5 3，采用紫外检测器。
本发明也能单独分别测试乙二醛、乙醛酸、乙醛，可分析乙醛溶液中的乙酸、 草酸等有机酸，操作时直接用液相色谱进行分析，无需盐酸羟胺衍生的步骤，其 他条件与分析乙二醛、乙醛酸、乙醛的条件完全相同。
有益效果
本发明的乙二醛、乙醛酸、乙醛的高效液相色谱检测法，是一种具有操作方 便、自动化程度高、选择性高、检测灵敏、快速准确之优势的分析方法，且能够 达到同时测定多种组分的目的。实验结果表明，高效液相色谱检测法在快速、准 确、同时检测乙醛氧化生成乙二醛，所得的溶液试样(即乙二醛、乙醛酸、乙醛、 乙酸、草酸等的混合液)的组成时，对产物及反应物，尤其是主产物乙二醛的定 量测定取得了很好的效果，各组成物质的测定之间不会相互干扰。因此，本发明 的高效液相色谱法不仅能够快速灵敏地检测单一物种，且为乙醛氧化制备乙二醛 工艺提供了一种快速、准确的检测方法，弥补一直延用的化学分析法过程繁琐、 不能同时检测、易受干扰等不足，对于乙醛氧化制备乙二醛工艺的改进和发展具 有现实意义。有关的实验结果可从以下的实施例中进一步说明。
图1-1、 1-2分别为实施例1中用高效液相色谱检测盐酸羟胺衍生的乙二醛 的液相色谱图和标准曲线。
图2-1、 2-2分别为实施例2中用高效液相色谱检测盐酸羟胺衍生的乙醛酸 的液相色谱图和标准曲线。
图3-1、 3-2分别为实施例3中用高效液相色谱检测盐酸羟胺衍生的乙醛的 液相色谱图和标准曲线。图4为实施例4中用高效液相色谱检测盐酸羟胺衍生的乙二醛、乙醛酸和乙 醛混合溶液的液相色谱图。
图5为实施例5中用高效液相色谱检测盐酸羟胺衍生的乙醛氧化制备乙二醛 的反应产物试样中乙二醛和乙醛酸的液相色谱图。
图6-1、 6-2分别为实施例6中用高效液相色谱检测盐酸羟胺衍生的乙二醛 的液相色谱图和标准曲线。
图7-1、 7-2分别为实施例7中用高效液相色谱检测盐酸羟胺衍生的乙醛酸 的液相色谱图和标准曲线。
图8-1、 8-2分别为实施例8中用高效液相色谱检测盐酸羟胺衍生的乙醛的 液相色谱图和标准曲线。
图9为实施例9中用高效液相色谱检测盐酸羟胺衍生的乙二醛、乙醛酸和乙 醛混合溶液的液相色谱图。
具体实施例方式
下面实施例将结合附图对本发明作进一步的说明。并不因此而限制本发明。
实施例l:乙二醛标准曲线的绘制
a) 、乙二醛标准溶液的配制取40wt。/。乙二醛溶液lmL，于50mL容量瓶中， 用去离子水定容得10g/L乙二醛溶液；从该溶液中分别移取0.5， 1.5， 2， 2.5， 3.5， 4.5， 5mL于50mL容量瓶中，定容得0.1， 0.3， 0.4， 0.5， 0.7， 0.9, lg/L
乙二醛标准溶液；
b) 、乙二醛衍生制肟化物试样分别取O.l、 0.3、 0.4、 0.5、 0.7、 0.9、 1.0g/L 乙二醛标准溶液5mL，加入2g/L盐酸羟胺溶液15mL，用乙酸钠溶液调节pH后， 将所有样品体积调节一致，在40。C下，反应30分钟，得到不同浓度的乙二醛肟 化衍生物；
c) 、采用Agilent 1100型高效液相色谱仪为分析仪器，配有标准自动进样器， 可变波长扫描紫外检测器(190nm 600nm)以及Agilent色谱工作站。色谱条件 为ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱，乙腈与水(pH为3~4)的体积比为10/卯， 流速为lml/min，柱温为25°C，进样量为2//L，检测波长为220nm。依次检测 不同浓度的乙二醛肟化衍生物，采用Agilent化学工作站对实验数据进行记录处 理。乙二醛肟化衍生物(0.5g/L)的谱图见图1-1所示。图1-1中横坐标为保留 时间/min，纵坐标为吸收度/mAU,图中清晰表明乙二醛肟化衍生物具有两个谱 峰a和b，峰位分得很好，说明乙二醛与盐酸羟胺反应生成乙二醛单肟和乙二醛二肟两种衍生物。由于本实验所用高效液相色谱为反相分配色谱，因此从分子量 和极性两方面考虑，a(保留时间4.6min)为乙二醛单肟的峰，b(保留时间5.0min) 为乙二醛二肟的峰。
d)、比较不同浓度乙二醛肟化衍生物的谱图，发现乙二醛单肟与乙二醛二肟 的峰面积之比保持恒定，因此可用乙二醛单肟的峰面积作为定量依据绘制标准工 作曲线，如图l-2所示。从图l-2可见，采用本方法测定的乙二醛浓度C (g/L) 与其衍生得到的乙二醛单肟的谱峰面积A之间，在0.01 lg/L浓度范围内表现 出很好的线性关系。线性回归方程为y=-11.414 +2619.82bc，线性回归系数 R=0.9999，乙二醛的检测限为0.00142g/L。
实施例2:乙醛酸标准曲线的绘制
a) 、乙醛酸标准溶液的配制称取0.1g乙醛酸于100mL容量瓶中，用去离 子水定容得lg/L乙醛酸溶液；从该溶液分别移取2.5， 5， 7.5， 10， 12.5， 15, 17.5 mL于50mL容量瓶中，定容得0.05, 0.1， 0.15， 0.2， 0.25， 0.3， 0.35 g/L
乙醛酸标准溶液；
b) 、乙醛酸衍生制肟化物试样分别取0.05， 0.1， 0.15， 0.2， 0.25， 0.3， 0.35g/L乙醛酸标准样品溶液5mL，加入15mL2g/L盐酸羟胺溶液，利用乙酸钠 溶液调节pH后，将所有样品体积调节一致，在4(TC下，反应30分钟，得到不 同浓度的乙醛酸肟化衍生物。
c) 、在与实施例1相同的色谱条件下，依次检测不同浓度的乙醛酸肟化衍生 物，采用Agilent化学工作站对实验数据进行记录处理。乙醛酸肟化衍生物
(O.lg/L)的谱峰如图2-1所示。图2-1中横坐标为保留时间/min，纵坐标为吸 收度/mAU。从图2-1可知，乙醛酸肟化衍生物只有一个谱峰，保留时间为4.0min， 说明乙醛酸与盐酸羟胺反应只生成一种衍生物；
d) 、以不同浓度的乙醛酸肟化衍生物的响应峰面积对浓度作图，得到乙醛酸 的标准工作曲线，如图2-2所示。图2-2表明，采用本方法测定的乙醛酸浓度C
(g/L)与其衍生得到的乙醛酸肟的谱峰面积A之间，在0.05 0.35g/L浓度范围 内表现出很好的线性关系。线性回归方程为y=0.271+194.357;c ，线性回归系数 R=0.9995 ，乙醛酸的检测限为0.0135g/L。
实施例3:乙醛标准曲线的绘制
a) 、乙醛标准溶液的配制分别移取1.25， 2.5， 5， 7.5， 10mL的40wt。/o乙 醛溶液，置于50mL容量瓶中，并定容得IO， 20， 40， 60， 80g/L乙醛标准溶液；
b) 、乙醛衍生制肟化物试样分别取IO， 20， 40， 60， 80g/L的乙醛标准溶液5mL，加入50g/L盐酸羟胺溶液15mL，用乙酸钠调节pH后，将所有样品体 积调节一致，在4(TC下，反应30分钟，得到不同浓度的乙醛后化衍生物；
c) 、在与实施例1相同的色谱条件下，依次检测不同浓度的乙醛膀化衍生物， 采用Agilent化学工作站对实验数据进行记录处理。乙醛肟化衍生物(60g/L)如 图3-1所示。图3-1中横坐标为保留时间/min，纵坐标为吸收度/mAU。从图3-1 可知，乙醛肟化衍生物只有一个谱峰，保留时间为5.6min，说明乙醛与盐酸羟胺 反应只生成一种衍生物；
d) 、以不同浓度的乙醛肟化衍生物的响应峰面积对浓度作图，得到乙醛的标 准曲线，如图3-2所示。图3-2表明，采用本方法测定的乙醛浓度C (g/L)与其 衍生得到的乙醛肟的谱峰面积A之间，在10 80g/L浓度范围内表现出很好的 线性关系。线性回归方程为y=-3.354+6.194x ，线性回归系数R=0.9975，乙醛的 检测限为lg/L。
实施例4:配制0.1g/L乙二醛、0.1g/L乙醛酸和20g/L乙醛的混合溶液，取 5ml该混合溶液，加入10g/L盐酸羟胺溶液15mL，利用乙酸钠溶液调节pH后， 将体积调节至与绘制标准曲线时一致，在40'C下，反应30分钟。液相色谱分析 结果如图4所示。图4中横坐标为保留时间/min，纵坐标为吸收度/mAU。从图4 可知，在相应的乙二醛单肟和乙二醛双肟、乙醛酸肟、乙醛肟的保留时间处出现 四个峰a， b， c， d，分离度较好，表明该测定方法对检测乙二醛、乙醛酸、乙醛 具有很好的选择性。将乙二酸单肟、乙醛酸肟、乙醛肟的峰面积分别代人乙二醛 标准曲线回归方程、乙醛酸标准曲线回归方程和乙酸标准曲线回归方程，得乙二 醛浓度0.0999g/L、乙醛酸浓度为0.09997g/L、乙酸浓度为19.14g/L，检测结果与 配制的实际浓度几乎一致，表明该测定方法用于检测乙二醛、乙醛酸和乙醛的混 合溶液是准确可靠的。
实施例5:采用该法对乙醛氧化制备乙二醛的反应产物溶液进行检测取
lmL乙醛氧化制备乙二醛的反应产物溶液，定容至100mL，即稀释100倍，从 中取5mL样品，加入2g/L盐酸羟胺溶液15mL，用乙酸钠溶液调节pH后，将 体积调节至与绘制标准曲线时一致，在40'C下，反应30分钟。液相色谱检测结 果见图5。图5中横坐标为保留时间/min，纵坐标为吸收度/mAU。从图5可见， 在相应的乙二醛单肟和乙二醛双肟、乙醛酸肟的保留时间处出现三个峰a， b， c， 且峰的分离度很好。除此之外没有其他的谱峰，说明此时溶液中的乙醛浓度低于 其检测限，另外副产物乙酸、草酸对乙二醛和乙醛酸肟化衍生物的检测也没有干 扰。将乙二醛单肟的峰面积和乙醛酸肟的峰面积分别代人乙二醛标准工作曲线回归方程和乙醛酸标准工作曲线回归方程，得到样品中乙二醛的浓度为0.543g/L、 乙醛酸浓度为0.103g/L，分别乘以100得54.3g/L和10.3g/L。
实施例6:乙二醛标准曲线的绘制
a) 、乙二醛标准溶液的配制同实施例1中a)步骤；
b) 、乙二醛衍生制肟化物试样分别取O.l、 0.3、 0.4、 0.5、 0.7、 0.9、 l.Og/L 乙二醛标准溶液10mL，加入5g/L盐酸羟胺溶液20mL，用乙酸钠溶液调节pH 后，将所有样品体积调节一致，在55。C下，反应40分钟，得到不同浓度的乙二 醛肟化衍生物；
c) 、采用Agilent 1100型高效液相色谱仪为分析仪器。色谱条件为ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱，乙腈与水(pH为3~4)的体积比为25/75，流速为 1.2ml/min，柱温为35'C，进样量为1;/L，检测波长为250nm。依次检测不同浓 度的乙二醛肟化衍生物，采用Agilent化学工作站对实验数据进行记录处理。乙 二醛肟化衍生物(0.5g/L)的谱图见图6-1所示。图中a (保留时间3.7min)为 乙二醛单肟的峰，b (保留时间4.1min)为乙二醛二肟的峰。
d) 、用乙二醛单肟的峰面积作为定量依据绘制标准工作曲线，如图6-2所示。 从图6-2可见，乙二醒浓度C (g/L)与其衍生得到的乙二醛单肟的谱峰面积A 之间，在0.01 lg/L浓度范围内表现出很好的线性关系。线性回归方程为yi.964 十2212.552x，线性回归系数11=0.9996，乙二醛的检测限为0.00131g/L。
实施例7:乙醛酸标准曲线的绘制
a) 、乙醛酸标准溶液的配制同实施例2中a)步骤；
b) 、乙醛酸衍生制肟化物试样分别取0.05， 0.1， 0.15， 0.2， 0.25， 0.3， 0.35g/L乙醛酸标准样品溶液10mL，加入20mL5g/L盐酸羟胺溶液，利用乙酸钠 溶液调节pH后，将所有样品体积调节一致，在55'C下，反应40分钟，得到不 同浓度的乙醛酸肟化衍生物。
c) 、在与实施例6相同的色谱条件下，依次检测不同浓度的乙醛酸肟化衍生 物，采用Agilent化学工作站对实验数据进行记录处理。乙醛酸肟化衍生物
(O.lg/L)的谱峰如图7-l所示，保留时间为3.1min。
d) 、以不同浓度的乙醛酸肟化衍生物的响应峰面积对浓度作图，得到乙醛酸 的标准工作曲线，如图7-2所示。图7-2表明，乙醛酸浓度C (g/L)与其衍生得 到的乙醛酸肟的谱峰面积A之间，在0.05 0.35g/L浓度范围内表现出很好的线 性关系。线性回归方程为乂=-0.886+157.2861 ，线性回归系数R=0.9989，乙醛酸 的检测限为0.0101g/L。
11实施例8:乙醛标准曲线的绘制
a) 、乙醛标准溶液的配制同实施例3中a)步骤；
b) 、乙醛衍生制肟化物试样分别取IO， 20， 40， 60， 80g/L的乙醛标准溶 液10mL，加入100g/L盐酸羟胺溶液20mL，用乙酸钠调节pH后，将所有样品 体积调节一致，在55。C下，反应40分钟，得到不同浓度的乙酸肟化衍生物；
c) 、在与实施例6相同的色谱条件下，依次检测不同浓度的乙醛肟化衍生物， 采用Agilent化学工作站对实验数据进行记录处理。乙醛肟化衍生物(60g/L)如 图8-l所示，保留时间为4.7min。
d) 、以不同浓度的乙醛肟化衍生物的响应峰面积对浓度作图，得到乙醛的标 准曲线，如图8-2所示。图8-2表明，采用本方法测定的乙醛浓度C (g/L)与其 衍生得到的乙醛肟的谱峰面积A之间，在10 80g/L浓度范围内表现出很好的 线性关系。线性回归方程为y^l.818+5.125x ，线性回归系数R=0.9981 ，乙醛的 检测限为0.985g/L。
实施例9:同实施例4配制乙二醛、乙酸酸、乙醛的混合溶液，取10ml该混 合溶液，加入20g/L盐酸羟胺溶液20mL，利用乙酸钠溶液调节pH后，将体积调 节至与绘制标准曲线时一致，在55'C下，反应40分钟。液相色谱分析结果如图 9所示。从图9可知，在相应的乙二醛单肟和乙二醛双肟、乙醛酸肟、乙醛肟的 保留时间处出现四个峰a， b， c， d，分离度较好，表明该测定方法对检测乙二醛、 乙醛酸、乙醛具有很好的选择性。将乙二醛单肟、乙酸酸肟、乙醛肟的峰面积分 别代人乙二醛标准曲线回归方程、乙醛酸标准曲线回归方程和乙醛标准曲线回归 方程，得乙二醛浓度0.0994g/L、乙醛酸浓度为0:0998g/L、乙醛浓度为19.58g/L， 检测结果与配制的实际浓度几乎一致，表明该测定方法用于检测乙二醛、乙醛酸
和乙醛的混合溶液是准确可靠的。
1权利要求
1、一种检测乙二醛、乙醛酸、乙醛的高效液相色谱(HPLC)方法，具体步骤如下A、乙二醛标准曲线的绘制1)、乙二醛标准溶液的配制用移液管取适量乙二醛溶液，分别用去离子水稀释，并定容，配制5～7个浓度介于0.1g/L～2g/L之间的乙二醛标准溶液；2)、衍生试剂的配制称取适量盐酸羟胺，用去离子水溶解配制得1～10g/L盐酸羟胺溶液；3)、乙二醛衍生制取肟化试样分别取相同体积、不同浓度的上述乙二醛标准溶液，分别加入浓度为1～10g/L盐酸羟胺溶液，盐酸羟胺与醛基的摩尔比为1.51～50∶1，用弱酸盐溶液调节pH为4～5后，将所有样品体积调节一致，在10～80℃下，反应10～120分钟，得到乙二醛肟化衍生物；4)、配制pH为2～5的去离子水，与色谱纯乙腈一起作为液谱分析流动相；5)、用高效液相色谱分析上述步骤3)所配制的不同浓度的乙二醛肟化衍生物试样，采用紫外检测器，色谱条件为色谱柱ZORBAX Eclipse XDB-C18，5μm，4.6×250mm；流动相乙腈与水的体积比为5/95～60/40；流速0. 6～2ml/min；柱温20～50℃；进样量1～20μL；检测波长200～300nm。6)、以不同浓度的乙二醛肟化衍生物的响应峰面积对浓度作图，得到乙二醛的标准曲线；B、乙醛酸标准曲线的绘制1)、乙醛酸标准溶液的配制分别称取不同质量的乙醛酸试样，用去离子水溶解，并定容，配制5～7个浓度为0.01g/L～1g/L之间的乙醛酸标准溶液。2)、按照步骤A中2)配制步骤配制盐酸羟胺；3)、乙醛酸衍生制取肟化试样取与步骤A中3)的乙二醛标准溶液体积相同的，上述中1)配制的不同浓度的乙醛酸标准溶液，加入与步骤A中3)体积相同的盐酸羟胺，用弱酸盐溶液调节pH为4～5后，将所有样品体积调节一致，在10～80℃下，反应10～120分钟，得到乙醛酸肟化衍生物；4)、采用与A中4)～6)同样的步骤绘制乙醛酸的标准曲线；C、乙醛标准曲线的绘制1)、乙醛标准溶液的配制用移液管移取适量乙醛溶液，分别用去离子水稀释，并定容，配制5～7个浓度介于5g/L与100g/L之间的乙醛标准溶液；2)、衍生试剂的配制称取盐酸羟胺，用去离子水溶解配制得10～100g/L盐酸羟胺溶液；3)、乙醛衍生制取肟化试样取与步骤A中3)的乙二醛标准溶液体积相同的、上述步骤1)中配制的不同浓度的上述乙醛标准溶液，加入与步骤A中3)体积相同的10～100g/L盐酸羟胺，用弱酸盐溶液调节pH为4～5后，将所有样品体积调节一致，在10～80℃下，反应10～120分钟，得到乙醛肟化衍生物；4)、采用与A中4)-6)同样的步骤绘制乙醛的标准曲线；D、未知浓度样品的衍生和检测1)、按照步骤A中2)配制步骤配制盐酸羟胺；2)、取与步骤A中3)体积相同的含有未知浓度的乙二醛、乙醛酸、乙醛混合溶液，加入与步骤A中3)相同体积的盐酸羟胺，用弱酸盐溶液调节pH为4～5后，将体积调节与前述一致，在10～80℃下，反应10～120分钟，得到衍生样品；3)、采用与A中4)-5)相同的步骤对衍生样品进行高效液相色谱分析；4)、将衍生样品的检测结果分别与乙二醛标准曲线、乙醛酸标准曲线和乙醛标准曲线进行比照，求得样品溶液中乙二醛、乙醛酸和乙醛的含量。
2、 如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于配制5~7个浓度介于 0.1g/L~lg/L之间的乙二醛标准溶液。
3、 如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于配制5~7个浓度介于 0.05g/L~O.5g/L之间的乙醛酸标准溶液。
4、 如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于配制5~7个浓度介于 1 Og/L~l 00g/L之间的乙醛标准溶液。
5、 如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于步骤A、 B、 C、 D中衍生 制取肟化试样的条件是盐酸羟胺与醛基的摩尔比为2 : 1 20 : 1，在20 6(TC下，反应25 60分钟。
6、 如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于步骤A、 4)中作为流动相 之一的去离子水的pH为2.5 3。
全文摘要
本发明涉及一种检测乙二醛、乙醛酸、乙醛的高效液相色谱(HPLC)方法。检测步骤为取适量试样，加入与醛基摩尔比为1.5∶1～50∶1的盐酸羟胺作衍生试剂，在10～80℃下反应10～120分钟，得到的肟化衍生物用HPLC分析，紫外检测波长为20～300nm。HPLC分析条件为流动相为体积比为5/95～60/40的乙腈/水溶液，流速为0.6～2ml/min，柱温为20～50℃，进样量为1～20μL。本发明具有操作方便、自动化程度高、选择性高等优势，且能够同时测定多个组分。实验结果表明，测定乙二醛、乙醛酸、乙醛的混合物时，各组分的检测不会相互干扰；能够检测乙醛氧化制备乙二醛的反应产物中所有组成。
文档编号G01N30/02GK101451980SQ20081024278
公开日2009年6月10日 申请日期2008年12月30日 优先权日2008年12月30日
发明者屠春燕, 群 崔, 朱鸭梅, 王海燕 申请人:南京工业大学