专利名称：一种中药清火药物的检测方法
技术领域：
本发明涉及药物质量检测的技术领域，具体涉及中药复方制剂清肺抑火片中栀
子、黄柏、苦参、大黄定性检测方法及黄芩定量检测方法。
背景技术：
目前中药清肺抑火片为卫生部药品标准中药成方制剂第二册的品种，其标准中的 检测项内仅有一般性的制剂检测，由于检测项目单一，无法对本品做准确的检测。
发明内容
为了对本品做确定的检测，我们决定选择栀子、黄柏、苦参、大黄用用薄层色谱法 检测，选择用高效液相色谱法检测黄芩。 本发明针对中药复方制剂复杂的环境经过检测条件的筛选，提供一种对中药复方 制剂清肺抑火片，以黄芩225g、栀子129g、黄柏64g、大黄193g、苦参96g、天花粉129g、知母 96g、桔梗129g、前胡64g为原料的准确检测方法，具体检测方法如下
鉴别(1)取本品2片，薄膜衣片除去包衣，研细，加50%甲醇10ml，超声处理 40分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加乙醇制成每lml含4mg的溶 液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取 上述两种溶液各2 5 ii 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯_丙酮_甲酸_水
(5:5:i:i)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清
晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 (2)取本品适量，薄膜衣片除去包衣，研细，取O. lg，加乙醚10ml，振摇提取15分 钟，滤过，弃去乙醚液，残渣加甲醇5ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓縮至lml，作为供试 品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液，照 薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2 5iU， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-醋酸(7 : 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫 外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光 斑点。 (3)取本品10片，薄膜衣片除去包衣，研细，加浓氨溶液2ml，三氯甲烷30ml，放置 过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参碱对照品， 加甲醇制成每lml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年 版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各4 6iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以
甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨溶液(2 : 3 : 4 : 0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀
碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取本品2片，薄膜衣片除去包衣，研细，加甲醇5ml，超声处理30分钟，滤过，滤 液作为供试品溶液。另取大黄对照药材0. 2g，加甲醇5ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作 为对照药材溶液。再取大黄酚、大黄素对照品，加甲醇制成每lml各含lmg的混合溶液，作
4为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶 液及对照药材溶液各4 6 ii 1、对照品溶液2 ii 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚 (30 6(TC)-甲酸乙酯-甲酸(15 :6:2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置于 氨蒸气中熏至斑点清晰。在供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相 同颜色的斑点。含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇_水_磷 酸(55 : 45 : 0.2)为流动相，检测波长为315nm。理论板数按黄吝苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加乙醇制成lml含O. lmg的溶 液，即得。 供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，或取薄膜衣片20片，除去包衣，精密 称定，研细，取0. 2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，称定重量，超声 处理(功率50W，频率50kHz) 30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇 匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液10 ii 1与供试品溶液5 10 iU， 注入液相色谱仪，测定，即得。 本发明的一种中药清火药物的检测方法具有如下优越性 1、改变了以往本制剂没有检测方法的现状，能够准确的对本制剂作出确定的检 2、在整个实验过程中，黄芩的检测人为操作少，个体差异引起的误差降到最低，数 据的观察和处理全部采用电脑软件，结果准确。
3、本方法检测方便、快捷，仅需十几分钟。
具体实施例方式
原料黄吝225g、栀子129g、黄柏64g、大黄193g、苦参96g、天花粉129g、知母96g、
桔梗129g、前胡64g 实施例1 :栀子检测方法 取本品2片，薄膜衣片除去包衣，研细，加50%甲醇10ml，超声处理40分钟，滤过， 滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加乙醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶 液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2
5yi，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5 : 5 : i : i)为展
开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与
对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例2 :黄柏检测方法 (2)取本品适量，薄膜衣片除去包衣，研细，取O. lg，加乙醚10ml，振摇提取15分 钟，滤过，弃去乙醚液，残渣加甲醇5ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓縮至lml，作为供试 品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液，照 薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2 5 iU， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-醋酸(7 : 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫 外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光
5斑点。
实施例3 :苦参的检测方法 (3)取本品10片，薄膜衣片除去包衣，研细，加浓氨溶液2ml，三氯甲烷30ml，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参碱对照品，加甲醇制成每lml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各4 6iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以
甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨溶液(2 : 3 : 4 : 0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀
碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例4 :大黄的检测方法 (4)取本品2片，薄膜衣片除去包衣，研细，加甲醇5ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取大黄对照药材0. 2g，加甲醇5ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取大黄酚、大黄素对照品，加甲醇制成每lml各含lmg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液及对照药材溶液各4 6 ii 1、对照品溶液2 ii 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30 6(TC)-甲酸乙酯-甲酸(15 :6:2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置于氨蒸气中熏至斑点清晰。在供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 实施例5 :黄芩苷含量的检测方法含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇_水_磷酸(55 : 45 : 0.2)为流动相，检测波长为315nm。理论板数按黄吝苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加乙醇制成lml含O. lmg的溶液，即得。 供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，或取薄膜衣片20片，除去包衣，精密称定，研细，取0. 2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70 %乙醇25ml，称定重量，超声处理(功率50W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液10 ii 1与供试品溶液5 10 ii 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
权利要求
一种中药清火药物的检测方法，以黄芩、栀子、黄柏、大黄、苦参、天花粉、知母、桔梗、前胡为原料其特征在于照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(55∶45∶0.2)为流动相，检测波长为315nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加乙醇制成1ml含0.1mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，或取薄膜衣片20片，除去包衣，精密称定，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇25ml，称定重量，超声处理(功率50W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2. —种中药清火药物的检测方法，以黄芩、栀子、黄柏、大黄、苦参、天花粉、知母、桔梗、前胡为原料其特征在于取本品2片，薄膜衣片除去包衣，研细，加50%甲醇10ml，超声处理40分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加乙醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2 5 iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5 :5:i:i)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3. —种中药清火药物的检测方法，以黄芩、栀子、黄柏、大黄、苦参、天花粉、知母、桔梗、前胡为原料其特征在于取本品适量，薄膜衣片除去包衣，研细，取O. lg，加乙醚10ml，振摇提取15分钟，滤过，弃去乙醚液，残渣加甲醇5ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓縮至lml，作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2 5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-醋酸(7 : 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
4. 一种中药清火药物的检测方法，以黄芩、栀子、黄柏、大黄、苦参、天花粉、知母、桔梗、前胡为原料其特征在于取本品10片，薄膜衣片除去包衣，研细，加浓氨溶液2ml，三氯甲烷30ml，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参碱对照品，加甲醇制成每lml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各4 6 ii 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯_丙酮-乙酸乙酯-浓氨溶液(2 :3:4: 0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5. —种中药清火药物的检测方法，以黄芩、栀子、黄柏、大黄、苦参、天花粉、知母、桔梗、前胡为原料其特征在于取本品2片，薄膜衣片除去包衣，研细，加甲醇5ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为 供试品溶液。另取大黄对照药材0. 2g，加甲醇5ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为对照 药材溶液。再取大黄酚、大黄素对照品，加甲醇制成每lml各含lmg的混合溶液，作为对照 品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液及对 照药材溶液各4 6iil、对照品溶液2ia，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30 6(TC)-甲酸乙酯-甲酸(15 : 6 : 2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置于氨蒸气 中熏至斑点清晰。在供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的斑点。
全文摘要
本发明涉及中药复方制剂清肺抑火片的中栀子、黄柏、苦参、大黄定性检测方法及黄芩定量检测方法。用薄层色谱法检测栀子、黄柏、苦参、大黄，用高效液相色谱法检测黄芩的含量。在复杂的中药复方制剂中，本方法也能对含量微少的成分达到快速、准确地检测其含量。
文档编号G01N30/00GK101762640SQ200810154400
公开日2010年6月30日 申请日期2008年12月26日 优先权日2008年12月26日
发明者刘伟, 刘新元, 王欣 申请人:天津中新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂