炮天红养身酒中葛根素和红景天苷的含量检测方法

文档序号:6131193阅读:471来源:国知局
专利名称:炮天红养身酒中葛根素和红景天苷的含量检测方法
技术领域
本发明涉及中药、保健品,具体涉及炮天红养身酒中葛根素和红景天苷的含量检测方法。

背景技术
炮天红养生酒是由太子参,红景天,鳖甲,杜仲,白芷,决明子,枸杞子,莲子,葛根,槐米,黄精十一味中药组成的保健品,具有强身健体,提高免疫力的功能,通常应用于免疫力低下及易疲劳人群。在炮天红养身酒的原质量标准中未建立反映成分内在质量的含量测定项,因此,不能科学地控制生产过程,从而在生产中较难确保产品的质量,影响了它的功能应用,限制了市场效益,也对消费者带来不利的因素。


发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之处,研究设计能控制炮天红养生酒质量的方法。
在炮天红养生酒的十一味中药中,葛根和红景天是主要的药效成份。葛根具有解肌退热,生津,透疹,生阳止泻的作用。红景天具有益气活血,通脉平喘的作用。因此,本发明选择葛根和红景天两味药进行质量标准的建立,以提供炮天红养生酒质量的检验。
1、葛根素含量检测方法的研究试验 参照药典一部“葛根”含测方法,再对炮天红养身酒葛根中葛根素建立高效液相含测方法。
1.1 仪器与试药 Agilent 1100高效液相色谱仪,葛根素对照品(110752-200209,中国药品生物制品检定所提供,供含量测定);样品炮天红养身酒(上海雷允上药业有限公司提供,批号060801,060802,060803);甲醇为色谱纯,试剂均为分析纯。
1.2、色谱条件与系统适用性试验 1.2.1 检测波长 葛根素在250nm、306nm处有最大吸收波长。在250nm最大吸收波长峰面积最大。结合文献资料选择250nm作为检测波长。
1.2.2 色谱条件及专属性试验 色谱柱Agilent ZORBAX XDB-C18(4.6×150mm;5.0μm),柱温25℃,流动相为以甲醇:水(25:75),流速为1ml/min。
对照品的制备取葛根素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含30μg的对照品溶液。
供试品的制备取本品,精密吸取50ml,水浴蒸干,用40%乙醇溶液溶解,转移至10ml量瓶,加加40%乙醇溶液至刻度,0.45μm滤膜滤过,取续滤液,即得。
缺葛根的空白样品制备取缺葛根的空白样品,按供试品制备方法同法制备,即得空白品溶液。
供试品色谱图中具与葛根素对照品保留时间一致的色谱峰,且与其它成分的色谱峰分离良好。空白样品在葛根素保留时间处无色谱峰,不存在干扰(见附图
一)。
1.3 线性关系考察 取不同浓度的葛根素芦荟苷对照品溶液分别进样,以峰面积为纵坐标Y,进样量为横坐标X,做回归得标准曲线,结果表明葛根素在进样量0.0490~0.9800μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系,结果见下表。
表1 葛根素标准曲线
1.4 对照品溶液平行试验 精密量取0.098mg/ml葛根素对照品溶液3μl,注入液相色谱仪,进样分析,重复测定6次,记录峰面积,结果见下表。
表2 精密度试验(n=6) 1.5 稳定性试验 取同一供试品溶液分别在制备好后0小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时注入液相色谱仪,进样测定结果,其峰面积均未见明显变化,说明供试品溶液较稳定,结果见下表。
表3 稳定性试验
1.6 重复性试验 取同一批样品(批号060801)依供试品制备法制备6份供试品溶液,注入液相色谱仪,测定,结果见表5。
表4 重复性试验 结果表明该方法重复性较好 1.7 准确度试验 取已知含量的样品(批号为060801)9份,各精密吸取25ml,加入一定量的对照品,按供试品制备法制备,注入液相色谱仪,测定,结果见表6。
表5 葛根素准确度试验
结果表明该方法回收率好,提取较完全。
1.8 样品测定取样品(1)060801;(2)060802;(3)060803按正文方法测定含量,结果见下表。
表6 样品测定结果
含量限度的规定以测葛根素含量最低数据的75%计,暂定本品含葛根素(C21H22O9)计,每1ml不得少于3.5μg。
2、红景天含量检测试验 参照药典一部“红景天”含测方法,再对本品红景天中红景天苷建立高效液相含测方法。
2.1 仪器与试药 Agilent 1100高效液相色谱仪,红景天苷对照品(110818-200404,中国药品生物制品检定所提供,供含量测定);样品炮天红养身酒(上海雷允上药业有限公司提供,批号060801,060802,060803);甲醇为色谱纯,试剂均为分析纯。
2.2 色谱条件与系统适用性试验 2.2.1 检测波长 红景天苷在275nm处有最大吸收波长。结合文献资料选择275nm作为检测波长。
2.2.2 色谱条件及专属性试验 色谱柱Agilent Extend-C18(4.6×150mm;5.0μm),柱温25℃,流动相为以甲醇:水(15:85),流速为1ml/min。
对照品的制备取红景天苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含0.2mg的对照品溶液。
供试品的制备取本品,精密吸取50ml,水浴蒸干,用40%乙醇溶液溶解,转移至10ml量瓶,加加40%乙醇溶液至刻度,0.45μm滤膜滤过,取续滤液,即得。
缺红景天的空白样品制备取缺葛根的空白样品,按供试品制备方法同法制备,即得空白品溶液。
供试品色谱图中具与红景天苷对照品保留时间一致的色谱峰,且与其它成分的色谱峰分离良好。空白样品在红景天苷保留时间处无色谱峰,不存在干扰(见附图二)。
2.3 线性关系考察 取不同浓度的红景天苷对照品溶液分别进样,以峰面积为纵坐标Y,进样量为横坐标X,做回归得标准曲线,结果表明红景天苷在进样量0.3920~9.8000μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系,结果见下表。
表1 葛根素标准曲线
2.4 对照品溶液平行试验 精密量取0.99mg/ml红景天苷对照品溶液2μl,注入液相色谱仪,进样分析,重复测定6次,记录峰面积,结果见下表。
表2 精密度试验(n=6) 2.5 稳定性试验 取同一供试品溶液分别在制备好后0小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时注入液相色谱仪,进样测定结果,其峰面积均未见明显变化,说明供试品溶液较稳定,结果见下表。
表3 稳定性试验
2.6 重复性试验 取同一批样品(批号060801)依供试品制备法制备6份供试品溶液,注入液相色谱仪,测定,结果见表5。
表4 重复性试验 结果表明该方法重复性较好 2.7 准确度试验 取已知含量的样品(批号为060801)9份,各精密吸取25ml,加入一定量的对照品,按供试品制备法制备,注入液相色谱仪,测定,结果见表6。
表5 葛根素准确度试验
结果表明该方法回收率好,提取较完全。
2.8 样品测定取样品(1)060801;(2)060802;(3)060803按正文方法测定含量,结果见下表。
表6 样品测定结果
含量限度的规定以测红景天苷含量最低数据的75%计,暂定本品含红景天苷(C14H20O7)计,每1ml不得少于21μg。
基于上述试验的研究,本发明设计了炮天红养身酒中葛根素和红景天苷的含量检测方法。
本发明提供了一种炮天红酒中葛根素含量的检测方法,该方法包括下列步骤 (1)[含量测定]葛根素照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇-水(25:75)为流动相。检测波长为250nm。柱温为25℃。理论塔板数按葛根素峰计算应不低于2000。
(2)对照品溶液的制备取葛根素对照品适量,精密称定,加40%乙醇制成每1ml含30μg的葛根素对照品溶液。
(3)供试品溶液的制备取本品,精密吸取50ml,水浴蒸干,用40%乙醇溶液溶解,转移至10ml量瓶,加加40%乙醇溶液至刻度,0.45μm滤膜滤过,取续滤液,即得。
(4)测定法分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品含葛根以葛根素(C21H2009)计,每1毫升不得少于3.5μg。
本发明另一目的是提供了一种炮天红养生酒中红景天苷的含量检测方法,该方法包括下列步骤 (1)含量测定红景天苷照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇-水(15∶85)为流动相。检测波长为275nm。柱温为25℃。理论塔板数按红景天苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取红景天苷对照品适量,精密称定,加40%乙醇制成每1ml含0.2mg的红景天苷对照品溶液。
供试品溶液的制备取本品,精密吸取50ml,水浴蒸干,用40%乙醇溶液溶解,转移至10ml量瓶,加加40%乙醇溶液至刻度,0.45μm滤膜滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品含红景天以红景天苷(C14H20O7)计,每1毫升不得少于21μg。
按照本发明所提供的质量标准,可以很好的控制“炮天红养身酒”的内在质量,三批中试放样均符合《炮天红养身酒》质量标准要求,产品质量稳定,能更好地发挥保健品功能,为人类健康强身带来福音。
按照WS3-B-0203-90检验规定,对本品三批样品的取样检测,重点考察性状,乙醇量、甲醇量、含量、检查及卫生学检查项目,结果均符合规定。
实验数据 (1)性状
(2)乙醇量
(3)甲醇量
(4)装量差异
(5)含量测定

(6)微生物检查

具体实施例方式 方法 含量测定葛根素照高效液相色谱法(中国药典2000年版附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇-水(25:75)为流动相。检测波长为250nm。柱温为25℃。理论塔板数按葛根素峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取葛根素对照品适量,精密称定,加40%乙醇制成每1ml含30μg的葛根素对照品溶液。
供试品溶液的制备取本品,精密吸取50ml,水浴蒸干,用40%乙醇溶液溶解,转移至10ml量瓶,加加40%乙醇溶液至刻度,0.45μm滤膜滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品含葛根以葛根素(C21H20O9)计,每1毫升不得少于3.5μg。
红景天苷 照高效液相色谱法(中国药典2000年版附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇-水(15:85)为流动相。检测波长为275nm。柱温为25℃。理论塔板数按红景天苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取红景天苷对照品适量,精密称定,加40%乙醇制成每1ml含0.2mg的红景天苷对照品溶液。
供试品溶液的制备取本品,精密吸取50ml,水浴蒸干,用40%乙醇溶液溶解,转移至10ml量瓶,加加40%乙醇溶液至刻度,0.45μm滤膜滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品含红景天以红景天苷(C14H20O7)计,每1毫升不得少于21μg。
取多批样品进行含量测定,数据如下
权利要求
1、一种炮天红酒中葛根素含量的检测方法,其特征在于该方法包括下列步骤
(1)[含量测定]葛根素
高效液相色谱法测定
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇-水25:75v/v为流动相;检测波长为250nm;柱温为25℃;理论塔板数按葛根素峰计算应不低于2000;
(2)对照品溶液的制备取葛根素对照品适量,精密称定,加40%乙醇制成每1ml含30μg的葛根素对照品溶液;
(3)供试品溶液的制备取本品,精密吸取50ml,水浴蒸干,用40%乙醇溶液溶解,转移至10ml量瓶,加加40%乙醇溶液至刻度,0.45μm滤膜滤过,取续滤液,即得;
(4)测定法分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品含葛根以含葛根素计,每1g不得少于3.5μg。
2、一种炮天红养生酒中红景天苷的含量检测方法,其特征在于该方法包括下列步骤
(1)含量测定红景天苷
高效液相色谱法测定
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水15:85v/v为流动相;检测波长为275nm;柱温为25℃;理论塔板数按红景天苷峰计算应不低于2000;
(2)对照品溶液的制备取红景天苷对照品适量,精密称定,加40%乙醇制成每1ml含0.2mg的红景天苷对照品溶液;
(3)供试品溶液的制备取本品,精密吸取50ml,水浴蒸干,用40%乙醇溶液溶解,转移至10ml量瓶,加加40%乙醇溶液至刻度,0.45μm滤膜滤过,取续滤液,即得;
测定法分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品含红景天以红景天苷计,每1g不得少于21μg。
全文摘要
本发明提供了炮天红养身酒中葛根素和红景天苷的含量检测方法。本品含葛根以含葛根素计,每1g不得少于3.5μg,本品含红景天以红景天苷计,每1g不得少于21μg。按照本发明所提供的质量标准,可以很好的控制“炮天红养身酒”的内在质量,产品质量稳定,能更好地发挥保健品功能,为人类健康强身带来福音。
文档编号G01N33/15GK101441201SQ20071017083
公开日2009年5月27日 申请日期2007年11月23日 优先权日2007年11月23日
发明者陈保华, 徐福莺, 薛爱珍, 姜丽珍, 杨祉雯 申请人:上海雷允上药业有限公司
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