专利名称：甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵在蔬菜中残留的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种检测蔬菜中杀菌剂农药量的方法。
背景技术：
现有技术中对甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵在蔬菜中残留的检测方法一般一次只能测出一种农药的残留量，三种农药需进行至少三次检测，工作步骤复杂，检测灵敏度也不理想。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能将蔬菜中残留的甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵一次检测出来，检测方便，准确度高的甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵在蔬菜中残留的检测方法。
本发明的技术解决方案是一种甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵在蔬菜中残留的检测方法，其特征是依次包括下列步骤①取样取不少于1000g蔬菜样品，取可食部分，轻轻擦去样品表面的附着物，采用对角线分割法，取对角部分，将其切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，制成样品，放入分装容器中备用；②提取准确称取20g菜样，加入20ml乙腈，在匀浆机中匀浆处理后用滤纸过滤，滤液收集到装有3g～5g氯化钠的50ml具塞量筒中，振荡后，在室温下静置10分钟，使乙腈相和水相分层；
③将氨基柱用5ml乙腈预洗条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即吸入乙腈相溶液，弃去2～3ml溶液后收集洗脱液，待测；④制作标准曲线用稀释仪配制浓度分别为0.05mg/l、0.1mg/l、0.5mg/l、1.0mg/l、5.0mg/l的甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵混标溶液，待将仪器状态稳定后，用系列标准溶液进样，保留时间定性，以峰面积和标样浓度制作标准曲线，然后对步骤③收集的洗脱液进行样品检测，外标法定量；上述测定的仪器条件为高效液相色谱仪 Agilent HPLC1100稀释仪 GILSON 402二极管阵列检测器 DAD 波长 236色谱柱 Agilent TC-C18Analytical 4.6×250mm5-Micron柱温 20℃流动相 乙腈∶水＝52∶48(v/v)流速 1ml/min进样量 10μl。
可以根据下列公式计算出残留量X=CV×1000M×1000]]>式中X——样品中农药残留量；mg/kgC——被测样液的浓度；ng/ulV——加入提取样品中的乙腈体积；mlM——样品质量；g
本发明能将蔬菜中残留的甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵一次检测出来，检测方便，准确度高。选择236nm作为检测波长，甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵三种农药在紫外区的吸收整体效果好，而且干扰因素少。
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
图1是甲基硫菌灵标准曲线图。
图2是多菌灵标准曲线图。
图3是甲霜灵标准曲线图。
图4是0.5mg/l甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵标液图谱。
图5是1.0mg/l甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵标液图谱。
图6是本发明实施例蔬菜样品空白图谱。
图7是添加为0.2mg/l甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵的蔬菜样品图谱。
图8是添加为1.0mg/l甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵的蔬菜样品图谱。
图9是添加为5.0mg/l甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵的蔬菜样品图谱。
附图中Area面积；Amount量；Jiajiliujunling甲基硫菌灵；duojunling多菌灵；jiashuangling甲霜灵；
具体实施例方式一种甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵在蔬菜中残留的检测方法，依次包括下列步骤①取样取不少于1000g蔬菜样品，取可食部分，轻轻擦去样品表面的附着物，采用对角线分割法，取对角部分，将其切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，制成样品，放入分装容器中备用；②提取准确称取20g菜样，加入20ml乙腈，在匀浆机(型号IKA-T25)中匀浆处理后用滤纸过滤，滤液收集到装有3g～5g氯化钠的50ml具塞量筒中，剧烈振荡后，在室温下静置10分钟，使乙腈相和水相分层；③将氨基柱(500mg；6ml；安捷伦制造)用5ml乙腈预洗条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即吸入乙腈相溶液，弃去2～3ml溶液后收集洗脱液，待测；④制作标准曲线用稀释仪配制浓度分别为0.05mg/l、0.1mg/l、0.5mg/l、1.0mg/l、5.0mg/l的甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵混标溶液，待将仪器状态稳定后，用系列标准溶液进样，保留时间定性，以峰面积和标样浓度制作标准曲线，然后对步骤③收集的洗脱液进行样品检测，外标法定量；上述测定的仪器条件为高效液相色谱仪 Agilent HPLC 1100稀释仪 GILSON 402二极管阵列检测器 DAD 波长 236色谱柱 Agilent TC-C18Analytical 4.6×250mm5-Micron柱温 20℃流动相 乙腈∶水＝52∶48(v/v)流速 1ml/min
进样量10μl。
可以根据下列公式计算出残留量X=CV×1000M×1000]]>式中X——样品中农药残留量；mg/kgC——被测样液的浓度；ng/ulV——加入提取样品中的乙腈体积；mlM——样品质量；g。
用在蔬菜空白样品中加入0.2～5.0mg/l甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵的方法验证本发明方法的可靠性，结果显示回收率蔬菜中添加甲霜灵0.2～5.0mg/kg，回收率为78.52％～98.05％。相对标准偏差(RSD)1.32％～10.54％。添加多菌灵0.2～5.0mg/kg，回收率为86.97％～112.74％。相对标准偏差1.01％～8.60％。添加甲基硫菌灵0.2～5.0mg/kg，回收率为93.90％～111.14％。相对标准偏差3.01％～8.05％。实验结果详见下表
由此可以看出本方法的优越性一是方法简便、易行；二是检测所用时间短，一次前处理及上机检测出三种农药；三是消耗化学试量少，品种也少。
权利要求
1.一种甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵在蔬菜中残留的检测方法，其特征是依次包括下列步骤①取样取不少于1000g蔬菜样品，取可食部分，轻轻擦去样品表面的附着物，采用对角线分割法，取对角部分，将其切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，制成样品，放入分装容器中备用；②提取准确称取20g菜样，加入20ml乙腈，在匀浆机中匀浆处理后用滤纸过滤，滤液收集到装有3g～5g氯化钠的50ml具塞量筒中，振荡后，在室温下静置10分钟，使乙腈相和水相分层；③将氨基柱用5ml乙腈预洗条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即吸入乙腈相溶液，弃去2～3ml溶液后收集洗脱液，待测；④制作标准曲线用稀释仪配制浓度分别为0.05mg/l、0.1mg/l、0.5mg/l、1.0mg/l、5.0mg/l的甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵混标溶液，待将仪器状态稳定后，用系列标准溶液进样，保留时间定性，以峰面积和标样浓度制作标准曲线，然后对步骤③收集的洗脱液进行样品检测，外标法定量；上述测定的仪器条件为高效液相色谱仪Agilent HPLC1100稀释仪GILSON 402二极管阵列检测器DAD波长236色谱柱Agilent TC-C18Analytical 4.6×250mm5-Micron柱温20℃流动相 乙腈∶水＝52∶48(v/v)流速1ml/min进样量10μl。
全文摘要
本发明公开了一种甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵在蔬菜中残留的检测方法，包括取样、提取、制作标准曲线、检测等步骤。本发明能将蔬菜中残留的甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵一次检测出来，检测方便，准确度高。选择236nm作为检测波长，甲霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵三种农药在紫外区的吸收整体效果好，而且干扰因素少。
文档编号G01N1/04GK1959406SQ200610097540
公开日2007年5月9日 申请日期2006年11月3日 优先权日2006年11月3日
发明者殷春杭, 钱允辉 申请人:南通市农产品质量检验测试中心