专利名称：SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊、固定化酵母细胞及其应用的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种新型SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊、SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞的制备方法及固定化酵母细胞在生物合成胞苷三磷酸中的应用。
背景技术：
纤维素硫酸钠(NaCS)作为硫酸多糖，具有抗菌、避孕等作用，并且也是组成微胶囊的主要成分，是一种可溶性聚阴离子，但是至今为止该产品还没有商品化。由于纤维素分子量、种类不同，以及反应温度，反应时间，固液比不同等而造成产品性能差异较大，所以在制备NaCS-PDMDAAC微胶囊前制备NaCS，了解其各特征参数对后续制备微胶囊有利。目前有制备的形式可分为均相法和非均相法，均相反应所得NaCS取代度较高，取代分布均勻，产品断链少，纤维素利用率高，但是制备过程中使用一些具有毒性或高危险性化学品如(DMF， S03，N204)，对环境污染严重，所以非均相法制备日益受到重视。以德国Dautzenberg博士为首的研究小组和柏林工业大学研究较多，浙江大学生物工程研究所也进行了多年研究。该方法是采用硫酸/正丙醇法制备NaCS，通过工艺优化，能制得NaCS取代度约为0. 3，适用于制备生物微胶囊。生物微胶囊技术作为一种新兴的最适合进行全细胞固定的方法，它的研究起始于 Chang首次提出的“人工细胞”。它可以将细胞，酶等大分子物质通过一层半透的囊膜阻隔在囊内的液态环境中，允许小分子营养物质自由进入及囊内代谢产物自由排出。与其它固定化技术相比，利用生物微胶囊将生物质包埋在内部的微胶囊固定化技术，具有制备简单、 损耗小、生物互适性好、后处理方便等优点；比游离细胞体系更高的菌浓及酶活；简化下游分离处理；高反应速率等。因此，微胶囊的制备及其应用技术已成为食品与发酵工业、化学分析、医疗诊断、环境净化及能源生产等各个领域的研究热点。所以研究微胶囊技术的重要性对这个时代有个不言而喻的重要性。20世纪80年代，前民主德国科学院高分子化学所的 Dautzenberg博士发明了 NaCS-PDMDAAC生物微胶囊。NaCS即纤维素硫酸钠，为聚阴离子化合物。PDMDAAC即聚二甲基二烯丙基氯化铵，为聚阳离子化合物，当这两种带不同电荷的物质混合时，在两者的界面发生络合反应，生成多聚电解质复合体(PEC)，形成一层半透膜。胞苷三磷酸(CTP)作为机体细胞内的一种正常成分，参与体内多种生理生化反应，并且是一种重要的心脑血管类生物药物，同时也是合成寡聚糖、胞苷二磷酸(⑶P)-胆碱等多种药物的中间体。上世纪70年代开始，各国学者开始研究游离干湿酵母合成CTP，转化率可达80%以上，90年代我国学者林元藻等利用酵母体内的复合酶系合成CTP进行了具体研究。固定化的研究是从90年代末开始研究，邱蔚然、唐学友等利用k-卡拉胶-魔芋多糖复配胶固定化啤酒酵母合成胞苷三磷酸，CTP转化率可达90%以上。JozefNahalka等研究了以果胶酸凝胶为载体固定化E. coli菌用于CTP等核苷三磷酸的合成。
三、技术内容本发明要解决的技术问题是提供一种新型的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊，该微胶囊制备简单，直径适中，膜层薄，机械强度甚佳，传质性能较好。为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案一种SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊，其制备包括如下步骤配制海藻酸钠(SA)和纤维素硫酸钠(NaCS)的混合溶液(即聚阴离子溶液)，其中海藻酸钠的浓度为0.5 3w/v%， 纤维素硫酸钠的浓度为3 6w/v%，将海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液滴入到4 8w/v%的聚二甲基二烯丙基氯化铵(PDMDAAC)溶液(即聚阳离子溶液)中，搅拌反应10 80min后用蒸馏水洗涤，即得所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊，置于0. 9w/v%氯化钠溶液中保存。NaCS的制备好坏是制备微胶囊好坏的关键，一般而言，使得纤维素硫酸钠的取代度达到0. 35左右，粘度达到30cp左右就可以，取代度越高粘度越小，粘度小则制备微胶囊的强度就不够。本发明具体推荐所述的纤维素硫酸钠通过如下方法制备将98%的浓硫酸与100%的正丙醇以体积比1 0.5 3在0 8°C下混合，得到磺化剂；利用脱脂棉作为纤维素与磺化剂混合，其中磺化剂的体积用量以纤维素的质量计为5 30ml/g，在温度为-5 5°C下反应20 70min，反应液经后处理得到所述的纤维素硫酸钠。进一步，在纤维素硫酸钠的制备过程中，优选将98%的浓硫酸与100%的正丙醇以体积比1 0.5 1.5的比例混合，更优选以体积比1 1的比例混合，以得到磺化剂。进一步，优选98%的浓硫酸与100%的正丙醇的混合温度为4°C。进一步，在纤维素硫酸钠的制备过程中，优选磺化剂的体积用量以纤维素的质量计为10 20ml/g，更优选为20ml/g。进一步，在纤维素硫酸钠的制备过程中，优选反应温度为-2 2°C，更优选为2°C; 优选反应时间为50 70min，更优选为60min。本发明优选所述的纤维素硫酸钠通过如下方法制备将98%的浓硫酸与100%的正丙醇以体积比1 0. 5 1. 5在4°C下混合，得到磺化剂；利用脱脂棉作为纤维素与磺化剂混合，其中磺化剂的体积用量以纤维素的质量计为10 20ml/g，在温度为-2 2°C下反应50 70min，反应液经后处理得到所述的纤维素硫酸钠。本发明最优选所述的纤维素硫酸钠通过如下方法制备将98%的浓硫酸与100% 的正丙醇以体积比1 1在4°c下混合，得到磺化剂；利用脱脂棉作为纤维素与磺化剂混合，其中磺化剂的体积用量以纤维素的质量计为20ml/g，在温度为2°C下反应60min，反应液经后处理得到所述的纤维素硫酸钠。在纤维素硫酸钠的制备过程中，所述的后处理可采用常规方法，如采用如下步骤处理所述反应液经真空抽滤得到固体产物，用正丙醇浸没洗涤3次以上，所得固体产物用水溶解后，用NaOH溶液调节pH到8 9，真空抽滤除去不溶纤维素得到滤液，用乙醇将滤液中的NaCS析出，干燥后用粉碎机粉碎，即得到纤维素硫酸钠产品。本发明公开的NaCS制备方法可以得到得率高，黏度适中，副产物少，溶解度好，且取代度适合的NaCS。进一步，在SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊的制备过程中，所述海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液中，海藻酸钠的浓度优选为0. 5 1. 5w/v%，纤维素硫酸钠的浓度优选为4w/ v%。所述聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液的浓度优选为4 6w/v%。进一步，将所得混合液滴入到聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液中，优选搅拌反应40 60mino本发明在将所得混合液滴入聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液的过程中，可以根据需要控制的微胶囊的大小选择滴入方式，比如选择注射器滴加时，可以控制注射器针头的大小，也可以根据需要对 针头进行处理。本发明优选通过打磨成平头的9#针头的注射器将混合液滴加到聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液中。本发明要解决的第二个技术问题是通过将酵母与聚阴离子溶液混合滴入聚阳离子溶液中制备固定化酵母，提供一种SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞。本发明所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞，其制备包括如下步骤 配制海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液，其中海藻酸钠的浓度为0. 5 3w/v%，纤维素硫酸钠的浓度为3 6w/v% ；再将酵母与海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液按照 1 5 20的质量比例完全混勻；然后将所得混合液滴入到4 8w/v%的聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液中，搅拌反应10 SOmin后用蒸馏水洗涤，即得所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞，置于0. 9w/v%氯化钠溶液中保存。在上述SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞的制备过程中，纤维素硫酸钠的要求和制备方法选择、聚阴离子溶液和聚阳离子溶液的配制、酵母与聚阴离子溶液的滴入方式以及搅拌反应时间控制等等，都与单独的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊的制备过程中相应条件类似，在此不再赘述。本发明优选将酵母与海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液按照1 5 10的质量比例完全混勻。本发明要解决的第三个技术问题是将所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞应用于生物合成胞苷三磷酸。所述应用具体为控制反应液的pH为6 7. 5，其组成为胞苷一磷酸(CMP) 30 80mmol/L，葡萄糖50 300mmol/L，氯化镁5 25mmol/L，磷酸缓冲盐(优选钠盐) 100 300mmol/L ；将SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞与反应液按照1 0. 5 3 的质量比投料，控制反应温度在25 45°C，每反应1 4h添加反应期间所消耗的葡萄糖， 添加后能与反应初期的葡萄糖浓度一样，总共添加反应1 5次；反应结束后即得到胞苷三磷酸。进一步，在所述应用中，优选所述反应液组成为胞苷一磷酸40 60mmol/L，葡萄糖100 200mmol/L，氯化镁10 20mmol/L，磷酸缓冲盐(优选钠盐)150 250mmol/ L0进一步，在所述应用中，优选将SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞与反应液按照1 0.5 1.5的质量比投料。进一步，在所述应用中，优选控制反应温度在30 40°C。进一步，在所述应用中，优选每反应1 3h添加反应期间所消耗的葡萄糖，添加后能与反应初期的葡萄糖浓度一样，总共添加反应2 4次。本发明具体推荐所述应用按照如下进行控制反应液的PH为6 7. 5，其组成为 胞苷一磷酸40 60mmol/L，葡萄糖100 200mmol/L，氯化镁10 20mmol/L，磷酸缓冲盐(优选钠盐):150 250mmol/L ；将SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞与反应液按照1 0.5 1.5的质量比投料，控制反应温度在30 40°C，每反应1 3h添加反应期间所消耗的葡萄糖，添加后能与反应初期的葡萄糖浓度一样，总共添加反应2 4次；反应结束后即得到胞苷三磷酸。本发明利用了 SA (海藻酸钠)/NaCS-PDMDAAC微胶囊，其为一种新型中空微胶囊， 并且是一种多组分生物微胶囊体系，其中阴离子为两种高聚物，由此而增加的可调参数增大了微胶囊制备的自由度，为制备出性能更好的微胶囊提供了空间。与现有技术相比，本发明的有益效果在于
(1)采用本发明中的NaCS制备方法，可以得到得率高、黏度适中、副产物少、溶解度好、且取代度适合制备微胶囊的NaCS。(2) 一步法就可以得到微胶囊，并且可以通过改变聚阴离子SA与NaCS和聚阳离子 PDMDAAC的浓度，反应时间等来调整和优化微胶囊的特性参数，如膜厚，微胶囊直径，机械强度及传质性能。(3)在本发明条件下利用制备的NaCS制备得到的微胶囊直径适中，膜层薄，机械强度甚佳，传质性能较好。(4)本发明的微胶囊化学性质稳定，不被磷酸盐等物质溶解，也不溶于大部分有机溶剂(如乙醇、丙酮等)。(5)本发明微胶囊固定化酵母生物合成胞苷三磷酸适用于高浓度胞苷酸合成胞苷三磷酸，并且相对于游离酵母，其酶促反应时间可缩短2-4小时。(6)本发明得到的固定化酵母可以反复利用5次以上，且转化率可达70 %。
具体实施例方式下面通过具体实施例对本发明的技术方案做进一步说明，但本发明的保护范围不限于此下列实施例中用到的仪器和试剂如下主要仪器高效液相色谱仪；NDJ-I旋转式黏度；紫外分光光度计；搅拌器；粉碎机主要试剂聚二甲基二烯丙基氯化铵(PDMDAAC)，广东金华大化学试剂有限公司；海藻酸钠(SA)，上海生化所；废啤酒酵母，购自杭州西湖啤酒厂；胞苷一磷酸(CMP)、胞苷二磷酸 (⑶P)及胞苷三磷酸(CTP)(质量分数> 99% )，购自上海生工生物工程有限公司。其他试剂皆为分析纯。实施例一1、取IOOmL浓硫酸和IOOmL正丙醇在低温下放置一段时间后，在4°C下利用恒流泵缓缓地将正丙醇滴入到浓硫酸中，在加入过程中，持续搅拌，使两溶液混合均勻防止局部过热。称取IOg脱酯棉加入到浓硫酸和正丙醇的混合液中，混合均勻，在2°C下反应60min。 将反应液倒入砂芯漏斗中，真空泵抽滤下，得到固体，用正丙醇混勻浸泡，真空泵抽滤，连续浸泡三次以上，将反应残余的硫酸冲洗干净。将洗涤好的反应物倒入150ml蒸馏水中，混合搅拌溶解，滴加10% NaOH溶液。调节pH至8 9，倒入砂芯漏斗中真空抽滤。除去不溶棉花，得到NaCS溶液。然后加入200mL左右无水乙醇至NaCS溶液中，搅拌使尽可能多的NaCS 沉淀出来。静置一段时间后倒入砂芯漏斗中真空抽滤。得到NaCS固体，80°C烘箱干燥后，利用粉碎机粉碎，得到NaCS粉末。其中得率约100%，的NaCS黏度为35cp，溶解度为 100g/L，取代度通过PDMDAAC检测为0. 38。.2、取0. 3g海藻酸钠和1. 5g NaCS加入到30mL蒸馏水中，搅拌混勻，得到聚阴离子溶液。取20mL 25% (wt)的PDMDAAC溶液加入到80mL水中，充分搅拌混勻，得到聚阳离子溶液。打磨9#针头针尖，磨平后得到的胶囊直径更小且球形度更好。利用打磨成平头的9# 针头和注射器将以上得到的聚阴离子溶液滴入到聚阳离子溶液中，搅拌反应60min，将得到的微胶囊用蒸馏水洗涤表面剩余的PDMDAAC溶液，洗净后置于0. 9% NaCl溶液中保存。其中所得到微胶囊的直径约为2. 6mm,膜厚约为100 μ m,机械强度可承受约4牛顿的正面压力，传质性能无机磷约20min达到平衡，葡萄糖约60min可达到平衡，胞苷一磷酸约ISOmin 可达到平衡。3、取0. 3g海藻酸钠和1. 5g NaCS加入到30mL蒸馏水中，搅拌混勻，得到聚阴离子溶液，取12g湿酵母(含水率为73%)加入聚阴离子溶液中，搅拌均勻。取20mL 25% (wt) 的PDMDAAC溶液加入到SOmL水中，充分搅拌混勻，得到聚阳离子溶液。打磨9#针头针尖， 利用打磨成平头的9#针头和注射器将以上得到的酵母聚阴离子溶液滴入到聚阳离子溶液中，搅拌反应60min，将得到的固定化酵母用蒸馏水洗涤表面剩余的PDMDAAC溶液，洗净后置于0.9% NaCl溶液中保存。4、由于CMP具有一定的酸性，所以配置250mmol/L pH = 7. 5的磷酸钠缓冲盐 20mL，加入CMP 60mmol/L,葡萄糖200mmol/L，氯化镁15mmol/L，最终使整个反应液的pH = 6. 5后，再加入30g固定化酵母，在反应温度为35°C下反应2h后，在反应液中添加反应期间所消耗的葡萄糖，添加后能与反应初期的葡萄糖浓度一样，总共添加2次，即反应6h后，利用薄层色谱定性检测，HPLC定量检测，CTP转化率可达79. 7%实施例二1、取125mL浓硫酸和75mL正丙醇在低温下放置一段时间后，在4°C下利用恒流泵缓缓地将正丙醇滴入到浓硫酸中，在加入过程中，持续搅拌，使两溶液混合均勻防止局部过热。称取15g脱脂棉花，加入到浓硫酸和正丙醇的混合液中，混合均勻，在_2°C下反应 50min。将反应液倒入砂芯漏斗中，真空泵抽滤下，得到固体，用正丙醇混勻浸泡，真空泵抽滤，连续浸泡三次以上，将反应残余的硫酸冲洗干净。将洗涤好的反应物倒入150ml蒸馏水水中，混合搅拌溶解，滴加10%Na0H溶液。调节pH至8 9，倒入砂芯漏斗中真空抽滤。除去不溶棉花，得到NaCS溶液。然后加入200mL左右无水乙醇至NaCS溶液中，搅拌使尽可能多的NaCS沉淀出来。静置一段时间后倒入砂芯漏斗中真空抽滤。得到NaCS固体，80°C烘箱干燥后，利用粉碎机粉碎，得到NaCS粉末。其中得率约90%，1 %的NaCS黏度为40cp，溶解度为85g/L，取代度通过PDMDAAC检测为0. 33。2、取0. 5g海藻酸钠和1. 2gNaCS加入到30mL蒸馏水中，搅拌混勻，得到聚阴离子溶液。取25mL25% (wt)的PDMDAAC溶液加入到75mL水中，充分搅拌混勻，得到聚阳离子溶液。打磨9#针头针尖，磨平后得到的胶囊直径更小且球形度更好。利用打磨成平头的9# 针头和注射器将以上得到的聚阴离子溶液滴入到聚阳离子溶液中，搅拌反应80min，将得到的微胶囊用蒸馏水洗涤表面剩余的PDMDAAC溶液，洗净后置于0. 9% NaCl溶液中保存。其中得到微胶囊的直径约为2. 3mm,膜厚约为85 μ m,机械强度可承受约4牛顿的正面压力，传质性能无机磷约20min达到平衡，葡萄糖约60min可达到平衡，胞苷一磷酸约ISOmin可达到平衡。3、取0. 5g海藻酸钠和1. 2gNaCS加入到30mL蒸馏水中，搅拌混勻，得到聚阴离子溶液，取8g湿酵母加入聚阴离子溶液中，搅拌均勻。取25mL25% (wt)的PDMDAAC溶液加入到75mL水中，充分搅拌混勻，得到聚阳离子溶液。打磨9#针头针尖，利用打磨成平头的9# 针头和注射器将以上得到的酵母聚阴离子溶液滴入到聚阳离子溶液中，搅拌反应SOminJf 得到的固定化酵母用蒸馏水洗涤表面剩余的PDMDAAC溶液，洗净后置于0. 9% NaCl溶液中保存。4、由于CMP具有一定的酸性，所以配置200mmol/L pH = 7. 8的磷酸钠缓冲盐 20mL,加入CMP 40mmol/L,葡萄糖150mmol/L，氯化镁10mol/L，最终使整个反应液的pH = 7 后，再加入20 g固定化酵母，在反应温度为30°C下反应1. 5h后，在反应液中添加反应期间所消耗的葡萄糖，添加后能与反应初期的葡萄糖浓度一样，总共添加3次，即反应6h后，利用薄层色谱定性检测，HPLC定量检测，CTP转化率可达75%。总之，本发明制备的纤维素硫酸钠(NaCS)及微胶囊的各种特征显著，而用微胶囊固定化酵母细胞生物合成胞苷三磷酸得到的转化率较高且使用与其他核苷三磷酸的合成。
权利要求
1.一种SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊，其特征在于所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊的制备方法包括如下步骤配制海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液，其中海藻酸钠的浓度为 0. 5 3w/v %，纤维素硫酸钠的浓度为3 6w/v %，将海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液滴入到4 8w/v%的聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液中，搅拌反应10 SOmin后用蒸馏水洗涤，即得所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊。
2.如权利要求1所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊，其特征在于所述的纤维素硫酸钠通过如下方法制备将98%的浓硫酸与100%的正丙醇以体积比1 0. 5 3在0 8°C下混合，得到磺化剂；利用脱脂棉作为纤维素与磺化剂混合，其中磺化剂的体积用量以纤维素的质量计为5 30ml/g，在温度为-5 5°C下反应20 70min，反应液经后处理得到所述的纤维素硫酸钠。
3.如权利要求2所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊，其特征在于所述的纤维素硫酸钠通过如下方法制备将98%的浓硫酸与100%的正丙醇以体积比1 0.5 1.5在4°C下混合，得到磺化剂；利用脱脂棉作为纤维素与磺化剂混合，其中磺化剂的体积用量以纤维素的质量计为10 20ml/g，在温度为-2 2°C下反应50 70min，反应液经后处理得到所述的纤维素硫酸钠。
4.如权利要求1 3之一所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊，其特征在于所述海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液中，海藻酸钠的浓度为0. 5 1. 5w/v%，纤维素硫酸钠的浓度为4w/v% ；所述聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液的浓度为4 6w/v%。
5.如权利要求1 3之一所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊，其特征在于将所得混合液滴入到聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液中，搅拌反应40 60min。
6.如权利要求1 3之一所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊，其特征在于将所述的混合液通过打磨成平头的9#针头的注射器滴入到聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液中。
7.一种SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞，其特征在于所述的SA/ NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞的制备包括如下步骤配制海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液，其中海藻酸钠的浓度为0. 5 3w/v%，纤维素硫酸钠的浓度为3 6w/v%， 将酵母与海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液按照1 5 20的质量比例完全混勻，然后将所得混合液滴入到4 8w/v%的聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液中，搅拌反应10 SOmin 后用蒸馏水洗涤，即得所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞。
8.如权利要求7所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞，其特征在于将酵母与海藻酸钠和纤维素硫酸钠的混合溶液按照1 5 10的质量比例完全混勻。
9.如权利要求7所述的SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞在生物合成胞苷三磷酸中的应用，其特征在于所述应用具体为控制反应液的pH为6 7. 5，其组成为胞苷一磷酸30 80mmol/L，葡萄糖50 300mmol/L，氯化镁5 25mmol/L，磷酸缓冲盐100 300mmol/L ；将SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞与反应液按照1 0. 5 3的质量比投料，控制反应温度在25 45°C，每反应1 4h添加反应期间所消耗的葡萄糖，添加后能与反应初期的葡萄糖浓度一样，总共添加反应1 5次；反应结束后即得到胞苷三磷酸。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于所述应用具体为控制反应液的PH为6 7. 5，其组成为胞苷一磷酸40 60mmol/L，葡萄糖100 200mmol/L，氯化镁10 20mmol/L，磷酸缓冲盐150 250mmol/L ；将SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞与反应液按照1 0. 5 1. 5的质量比投料，控制反应温度在30 40°C，每反应1 3h添加反应期间所消耗的葡萄糖，添加后能与反应初期的葡萄糖浓度一样，总共添加反应2 4 次；反应结束后 即得到胞苷三磷酸。
全文摘要
本发明公开了一种SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊、固定化酵母细胞及其应用。本发明采用聚电解质成膜原理，以海藻酸钠(SA)和NaCS为聚阴离子，聚二甲基二烯丙基氯化铵(PDMDAAC)为聚阳离子，两者通过界面络合反应得到一层半透膜的中空微胶囊。另外通过酵母与聚阴离子混合滴入聚阳离子中制备固定化酵母细胞。然后以胞苷一磷酸为底物，利用固定化酵母生物转化胞苷三磷酸，转化率可达80％以上。
文档编号B01J13/02GK102172499SQ201110034448
公开日2011年9月7日 申请日期2011年1月31日 优先权日2011年1月31日
发明者应国清, 张杨, 易喻, 梅建凤, 王鸿 申请人:浙江工业大学