一种酵母菌菌株及其应用的利记博彩app

文档序号:4863993阅读:426来源:国知局
专利名称:一种酵母菌菌株及其应用的利记博彩app
技术领域
本发明涉及一种酵母菌菌株,特别是涉及一种环境生物技术领域中的酵母菌菌株及其应用。
背景技术
畜禽养殖业规模化发展使由畜禽粪便引起的恶臭污染已成为我国环境污染的突出问题。粪便恶臭污染不但给人们生活带来不便,并且其中的多种有毒成分,如氨气、硫化氢、硫醇、甲硫醇等能够影响畜禽的生理机能,危害呼吸系统,降低机体抵抗力,诱发多种传染病,高浓度的臭气甚至导致畜禽机体呼吸中枢麻痹而死亡,从而给养殖环境带来很大危害与损失。恶臭气体的排放也对周边居民环境造成严重污染,人体长期吸入后对身体健康造成严重伤害。养殖场实施畜禽粪便恶臭污染控制与管理往往采用长期大量使用化学消毒齐U、抗生素等药物进行场区消毒和卫生防疫的方法,但大量使用化学消毒剂、抗生素等有害物质通过食物链富集进入人体,严重危及人类健康与食品安全。同时大量的化学有害物质随养殖废物的排放也对水体和土壤造成严重危害,威胁水体与农业安全。微生物除臭法是利用微生物来分解、转`化臭气成分以达到除臭目的,也称生物除臭法。微生物除臭法具有除臭效果良好、无二次污染、材料易得、设备投资、维持成本低廉的优点,正日益成为畜禽养殖场或粪尿处理场所采用的最为经济有效和最常用的除臭方法。生物除臭的核心是高效除臭功能微生物菌株,通过分离筛选高效除臭功能菌株再接种于畜禽粪便中可以有效降低其释放的恶臭强度,达到畜禽粪便恶臭原位控制目的,目前在脱臭材料中起作用的微生物主要有硝化细菌、亚硝酸菌、反硝化细菌、硫细菌等。公开号为CN102526783A、CN1411872、CN102258796A、CN102068711A、CN1810295、CN102732452A、CN102247611A的中国专利/申请均公开了生物除臭的菌剂或方法,但这些用于原位生物除臭的微生物除臭剂无一例外均采用了混合菌株制剂,且未公开菌株组合物中的各菌株组分的除臭功效。从技术原理角度讲,混合菌株的除臭效果及稳定性一般优于单菌株,但混合菌株制备除臭剂的方法复杂,一般多为先单菌株发酵,再按一定比例混合配伍成微生物除臭剂。由于混合菌株各单菌株的生理生化特性、呼吸代谢类型以及功能差别较大,各单菌株必须有自己的培养方法,因此造成混合菌株制备微生物除臭剂工艺方法比较复杂,成本较高。

发明内容
本发明的目的就是提供一种能够用于粪便除臭的酵母菌菌株,该菌株可以作为除臭微生物单独接种于粪便并有良好的除臭效果。为实现上述目的,本发明提供东方伊萨酵母菌菌株Issatchenkia orientalis保藏信息:东方伊萨酵母菌CGMCC6496已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100101),保藏日期2012年9月3日,保藏编号CGMCC N0.6496。
东方伊萨酵母菌CGMCC6496采集自四川大邑县某酒厂白酒窑泥。将采集的窖泥样品用畜禽粪便进行富集驯化,7d后进行梯度稀释,从10_2、10_4、10_6、10_8、10,稀释度下吸取0.1ml于YPED分离培养基平板涂布,30°C恒温培养。经多次分离后获得的该菌株。其中富集培养基:葡萄糖 15g、蛋白胨 2.5g、(NH4) 2S04、NaCl1.0g、KH2PO4L 0g、CaCl22H200.5g、MgS047H201.0gdK 1000ml、pH6.0、121°C、30min高温灭菌处理。YPED分离培养基:酵母提取粉酵母浸粉10g、蛋白胨20g、葡萄糖20g、孟加拉红0.03g、琼脂18g、水1000ml、pH6.0。本发明菌株在显微镜下观察,菌株细胞圆形或椭圆形,较大,大小为(2 4) umX(2 14)um;菌落白色凸起,边缘褶皱整齐,表面湿润。菌株能发酵葡萄糖,能利用葡萄糖、乳酸,不能利用硝酸盐,能利用盐酸尸铵。东方伊萨酵母菌CGMCC6496的活化液体培养基为组分为:蛋白胨20g、牛肉膏10g、葡萄糖20g,加水至1000ml,pH6.5 7.0。固体培养基在液体培养基中加入琼脂1.0% 2.0% (W/V)。东方伊萨酵母菌CGMCC6496的扩大发酵液体培养基组分为:蛋白胨5g、麦芽浸粉10g、氯化钠5g、葡萄糖20g、加水至1000ml、pH6.5 7.0。固体培养基在液体培养基中加入琼脂1.0% 2.0% (WO。本发明还提供东方伊萨酵母菌CGMCC6496在粪便除臭中的应用方法。将经活化培养与扩大培养的东方伊萨酵母菌CGMCC6496菌液接种到畜禽粪便中,15°C 30°C条件下培养30d,能够显著降低粪便的臭气强度(0U)、氨气浓度(1^/1113)、硫化氢浓度(11^/1]13)等多项臭味指标。由于来自畜禽养殖或粪尿处理场的臭气中最主要成分是氨气与硫化氢,因此东方伊萨酵母菌CGMCC6496所具备的消除氨气与硫化氢的浓度的效果使其可以应用于粪便除臭,例如畜禽养殖或粪尿处理场。东方伊萨酵母菌CGMCC6496应用于粪便除臭可以采用直接接种(如喷洒到粪便)的方法,实现臭气原位控制。东方伊萨酵母菌CGMCC6496菌株应用于粪便除臭的技术原理在于东方伊萨酵母菌CGMCC6496菌株接种至粪便中后, 可以在粪便中良好生长,占据有利生态位,抑制产恶臭微生物生长繁殖,降低粪便恶臭释放强度,实现了恶臭原位源头控制。本发明提供的东方伊萨酵母菌CGMCC6496可以进一步加工成除臭菌剂。例如以麦麸为填充剂的除臭菌剂制备:将东方伊萨酵母菌CGMCC6496菌株在扩大发酵液体培养基中30°C、160rpm条件振荡培养24h制得液体除臭菌剂,将液体除臭菌剂与灭菌麸皮按质量比1:1 (质量/质量)混合后,置于40°C恒温培养箱中烘干培养20h 24h,至含水量为15% 20%,即为固体除臭菌剂。与现有技术相比,本发明的有益效果是:(I)提供了新的酵母菌:东方伊萨酵母菌CGMCC6496 ;(2)东方伊萨酵母菌CGMCC6496可以应用于粪便的生物除臭;(3)东方伊萨酵母菌CGMCC6496从被畜禽粪便污染长期胁迫选择环境中筛选得到,不会对周围环境和生态平衡造成危害,符合生态安全法规;(4)除臭效果稳定,受温度影响小,在温度15°C条件下仍具有较好的效果;(5)东方伊萨酵母菌CGMCC6496仅须单一菌株即可应用于粪便除臭,使用方面,包装、运输便利,易形成商品化,相比较与现有技术均采用混合菌株制剂用于粪便除臭有明显的技术优势;(6)东方伊萨酵母菌CGMCC6496可以通过原位除臭方法有效除臭,相较于异位除臭方法(如土壤除臭法、珍珠岩棉除臭法、堆肥除臭法、活性污泥除臭法、泥炭土除臭法和锯末除臭法等)除臭操作简单易行、无需配套设备与技术、投资规模小。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明的技术内容作进一步描述。实施例一东方伊萨酵母菌CGMCC6496应用于畜粪便除臭。1、培养基及接种菌液制备固体活化培养基:蛋白胨20g、牛肉膏10g、葡萄糖20g、水1000ml、琼脂15g 20g、pH6.5 7.0。121°C、30min高温灭菌处理。液体扩大发酵培养基:蛋白胨5g、麦芽浸粉10g、氯化钠5g、葡萄糖20g、水1000ml> pH6.5 7.0。121°C、30min高温灭菌处理。将东方伊萨酵母菌CGMCC6496菌株接种到固体活化培养基,活化培养24h得活化菌种,待用;将活化的菌 种接入液体扩大发酵培养基,300C、160rpm振荡培养24h 72h得接种菌液(菌液浓度107 108CFU/ml ),待用。2、粪便除臭处理将接种菌液IOml接种于装有200g新鲜猪粪的IL烧杯中(接种量5%,V/W),保鲜膜密封烧杯;同时做不加菌液的对照,每组实验设置三个重复;处理温度30°C,15d后测定恶臭强度、氨气浓度、硫化氢浓度,测定结果如下表I。表1CGMCC6496菌株除臭效果(30°C)
权利要求
1.东方伊萨酵母菌菌株Issatchenkiaorientalis,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期2012年9月3日,保藏编号CGMCC N0.6496。
2.根据权利要求1所述的东方伊萨酵母菌CGMCC6496应用于粪便除臭。
3.根据权利要求2所述的应用方法,其特征在于:是粪便原位除臭。
4.根据权利要求2或3所述的应用方法,其特征在于:是将活化培养与扩大培养后的东方伊萨酵母菌CGMCC6496菌液应用于粪便除臭。
5.根据权利要求4所述的应用方法,其特征在于:东方伊萨酵母菌CGMCC6496活化液体培养基为蛋白胨20g、牛肉膏10g、葡萄糖20g,加水至1000ml,pH6.5 7.0 ;或者东方伊萨酵母菌CGMCC6496活化固体培养基为蛋白胨20g、牛肉膏10g、葡萄糖20g,加水至1000ml,再加入琼脂(W/V) 1.0% 2.0%, pH6.5 7.0。
6.根据权利要求4所述的应用方法,其特征在于:东方伊萨酵母菌CGMCC6496扩大发酵液体培养基为:蛋白胨5g、麦芽浸粉10g、氯化钠5g、葡萄糖20g,加水至1000ml,pH6.5 7.0 ;或者东方伊萨酵母菌CGMCC6496扩大发酵固体培养基为:蛋白胨5g、麦芽浸粉10g、氯化钠5g、葡萄糖20g、琼脂1.0% 2.0%,加水至1000ml,再加入琼脂(W/V) 1.0% 2.0%,ρΗ6.5 7.0。
7.根据权利要求2或3所述的应用方法,其特征在于:依如下步骤实施: 步骤S1、东方伊萨酵母菌CGMCC6496菌株活化培养得活化菌株;活化液体培养基为蛋白胨20g、牛肉膏10g、葡萄糖20g,加水至1000ml,pH6.5 7.0,或者活化固体培养基为蛋白胨20g、牛肉膏10g、葡萄糖20g,加水至1000ml,再加入琼脂(W/V)l.0% 2.0%,pH6.5 7.0 ; 步骤S2、东方伊萨酵母菌CGMCC6496活化菌株扩大发酵培养得接种菌液;扩大发酵液体培养基为蛋白胨5g、麦芽浸粉10g、氯化钠5g、葡萄糖20g,加水至1000ml,pH6.5 7.0 ;或者扩大发酵固体培养基为蛋白胨5g、麦芽浸粉10g、氯化钠5g、葡萄糖20g,加水至1000ml,再加入琼脂(W/V) 1.0% 2.0%, ρΗ6.5 7.0 ; 步骤S3、接种除臭,将接种菌液接种于畜禽粪便中,在15°C 30°C条件下处理。
8.根据权利要求7所述的应用方法,其特征在于:所述步骤SI中活化培养24h,所述步骤S2中扩大培养在30°C、160rpm条件下振荡培养24h 72h。
9.根据权利要求7所述的应用方法,其特征在于:所述步骤S3中接种量为5% 10%(V/W)。
10.一种以东方伊萨酵母菌CGMCC6496为除臭效用成分的畜禽粪便除臭菌剂。
全文摘要
本发明公开了一种酵母菌菌株及其应用。东方伊萨酵母菌CGMCC No.6496从白酒窑泥中分离得到,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期2012年9月3日,保藏编号CGMCC No.6496。该菌株经常规的活化培养与扩大发酵培养可应用于粪便的生物除臭。东方伊萨酵母菌CGMCC No.6496作为单一菌株即可应用于畜禽粪便原位除臭,除臭效果稳定,受温度影响小,在温度15℃条件下仍具有较好的效果。该菌株从被畜禽粪便污染长期胁迫选择环境中筛选得到,符合生态安全法规。
文档编号C02F11/04GK103146590SQ20131003608
公开日2013年6月12日 申请日期2013年1月30日 优先权日2013年1月30日
发明者闫志英, 刘晓风, 袁月祥, 廖银章, 李志东, 许力山 申请人:中国科学院成都生物研究所
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