一种无保护气的无细胞毒性的碳量子点的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于碳量子点的制备方法领域，特别涉及一种无保护气的无细胞毒性的碳量子点的制备方法。
【背景技术】
[0002]近年来，由于传统提供荧光染料和传统的半导体量子点自身的毒性很难做到真正意义上应用于实际的医疗标记和检测当中。即使是应用于生物标记和科研材料中，添加的极限量也仅是刚刚超过I微克每毫升级别，如此少的添加量基本不能满足标记的需要。因此，越来越多的研究开始关注于无机非金属碳颗粒量子点。首先，与传统有机荧光染料相比，无机非金属碳颗粒量子点不仅维持了传统金属量子点的吸收光谱宽且连续的优点，而且具有非常强的抗漂白特性，即，发光稳定性极高。其次，与金属量子点相比，无机非金属碳颗粒量子点具有激发带连续而且较宽发射光波长稳定的优点，而且具有良好的生物相容性和无光眨眼现象的等优点。更重要的是，碳量子点的低毒性是其他生物标记物所无法比拟的，它可以在添加量很大的情况下使用，足以得到完美的生物标记图。因此，无机非金属碳颗粒量子点正是目前生物标记、生物检测、生物探针等科研应用方面的最优异的材料。
[0003]目前无机非金属碳量子点的合成方法主要有两种，一种是从上到下的合成方法:粉碎碳源，通过聚合物表面钝化的方式使其有效发光，主要包括电弧放电法、激光法、电化学法、机械粉碎、球磨或化学氧化。这种方法制备的碳点虽然粒径均一度较高，但是耗能过高，除激光灼烧法之外其他方法制备的碳点荧光产率都较低。另外一种方法是从下到上的合成方法:热解或碳化合适前驱物直接合成荧光碳量子点，包括灰烬的氧化或腐蚀法、热解有机物法、微波合成法、超声法、掺杂法。但是，这些方法中的大部分都是存在能耗过高，污染环境，制备条件苛刻等缺点。由于这些缺陷，很难实现碳量子点的绿色工业化生产。因此，寻找一种生产条件简单、绿色环保、原料易得同时又能制备出高品质的产品的方法是相当有意义的。
[0004]通过高温热解的方法制备荧光碳点是一种比较热门的荧光碳点制备方法。目前已有报道的，通过微波热解各种氨基酸来制备荧光碳点，但是存在着微波温度不可控(存在局部过热点)以及荧光效率不太高等缺点。另外一些通过热解有机物制备碳量子点的报道中往往需要保护气体的存在，这不仅是增加了生产成本的投入，而且提高了生产风险。
【发明内容】
[0005]本发明所要解决的技术问题是提供一种无保护气的无细胞毒性的碳量子点的制备方法，该方法简便易行，成本较低，易于工业化生产。
[0006]本发明的一种无保护气的无细胞毒性的碳量子点的制备方法，包括:
[0007](I)将谷氨酸钠高温煅烧，得到碳点粉末；其中，煅烧的温度为200?500°C，煅烧的时间为1min?2.5h ;
[0008](2)将步骤⑴中碳点溶解，超声振荡，过滤，烘干；
[0009](3)将步骤⑵中烘干的产物溶解，透析，得到无细胞毒性的碳量子点。
[0010]所述步骤(I)中谷氨酸钠的来源为味精。
[0011]所述步骤(2)中溶解为乙醇溶解或者水溶解。
[0012]所述步骤⑵中煅烧时升温速率为10°C /min。
[0013]所述步骤⑵中超声振荡的时间为10?60min。
[0014]所述步骤(2)中过滤为中速滤纸过滤。
[0015]所述步骤⑵中烘干温度为40?90°C。
[0016]所述步骤(3)中透析为用3000Da?3500Da透析膜透析12h。
[0017]本发明中运用氨基酸盐，即谷氨酸钠，为碳源和氮源，在无惰性气体保护高温条件下，一步完成碳化和掺杂；并且在制备的碳点中引入一定量的Na原子和O原子，从而提高产物的荧光效率。由于原料廉价易得属于工业品，生产条件无需高压和保护气体，无需致污溶剂，所以本专利提供的方法易于实现碳量子点的绿色工业化生产。热解产物通过分离纯化透析处理后，得到的碳颗粒量子点具有无细胞毒性，量子产率高，颗粒大小均一，无光眨眼现象，荧光稳定性极高等诸多优点。这些优点为无保护气条件下制备的谷氨酸钠碳量子点在生命科学、分析科学、材料科学、免疫医学、检验检疫等传统及新兴领域的应用打下了良好的基础。
[0018]有益效果
[0019](I)本发明的制备方法操作简单方便，温度要求不高，重复性好，成本低，保存时间长(避光要求不高)，易于工业化生产；
[0020](2)本发明的方法得到的量子点具有无细胞毒性、生物相容性好、量子效率高(最大可达51.5%，以0.05M硫酸溶液配置硫酸奎宁标准溶液，以其激发波长313nm以及338nm处紫外吸光度小于0.05时的稀释溶液为标准参比溶液，计算量子产率)、荧光性能优异(荧光稳定性、无光眨眼和优异的PH特性)、粒径分布均一、单分散性好等优势。
【附图说明】
[0021]图1是实施例1热解法制备无机非金属碳颗粒量子点的制备方法流程图；
[0022]图2为实施例3热解法制备无机非金属碳颗粒量子点的透射电镜图；
[0023]图3为实施例3热解法制备无机非金属碳颗粒量子点的X射线衍射图；
[0024]图4为实施例3热解法制备无机非金属碳颗粒量子点，以此为原料做的MTT细胞毒性试验和细胞形态相差图；a, b, c, d分别为，对照组、最低浓度碳点、最高浓度碳点细胞形态图和细胞毒性柱状图；
[0025]图5为实施例2热解法制备无机非金属碳颗粒量子点，煅烧时间为30min，无队保护下，煅烧温度分别为200°C、300°C、400°C和500°C的紫外吸收和荧光复合图谱；
[0026]图6为实施例2和对比例2热解法制备无机非金属碳颗粒量子点，无N2和有化保护下，煅烧温度分别为200 0C、300 0C、400 °C和500 °C的样品荧光强度对比图。
【具体实施方式】
[0027]下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。