取代的噁唑烷酮水溶性衍生物及其应用
【专利摘要】本发明公开一种取代的噁唑烷酮水溶性衍生物及其应用，如通式I所示、药学可接受的酸式盐、溶剂化物或水合物，其中R1如说明书定义。此外，本发明还公开了该化合物的合成方法、药物组合物以及它们在制备预防或治疗细菌感染药物中的应用。与现有技术相比，本发明的新型的取代的噁唑烷酮水溶性衍生物具有显著的抗细菌感染活性、生物利用度高、非常好的水溶性(易于注射给药)、方便的制剂制备，疗效更稳定、临床使用无配伍禁忌而更安全等特点。
【专利说明】
取代的噁唑烷酮水溶性衍生物及其应用
技术领域
[0001] 本发明属于医药化学技术领域，涉及一种噁唑烷酮衍生物，具体涉及一种取代的 噁唑烷酮水溶性衍生或其药学可接受的酸式盐，溶剂化物或水合物，它们的制备方法、药物 组合物以及它们在制备用于预防或治疗细菌感染药物中的用途。
【背景技术】
[0002] 专利CN 200480037612.2中公开了新型恶唑烷酮衍生物类抗菌剂，另外美国FDA已 经批准了泰地唑利磷酸酯（tedizolid phosphate)用于治疗细菌(包括革兰氏阳性菌如葡 萄球菌、肠道球菌和链球菌，厌氧微生物如类菌体和梭菌体以及耐酸微生物如结核分支菌、 鸟分支菌在内的人和动物病原体)感染，泰地唑利磷酸酯是泰地唑利(tedizolid)的磷酸酯 前药，泰地唑利磷酸酯在体内磷酸酶的作用下水解产生泰地唑利发挥作用。
[0003] 泰地唑利由于化合物的结构特点，其水溶性差，不易制成溶液静脉给药，虽然将泰 地唑利制备成磷酸酯可以增加化合物的溶解性，但是泰地唑利磷酸酯由于磷酸根的存在， 临床上不能与含二价离子(钙离子、镁离子）的溶液混用，另外口服超过特定剂量的药物可 导致体内磷酸酶饱和，生物利用度下降。
[0004] 人们需要具有增强的溶解性和对治疗细菌感染，包括革兰氏阳性菌如葡萄球菌、 肠道球菌和链球菌，厌氧微生物如类菌体和梭菌体以及耐酸微生物如结核分支菌、鸟分支 菌在内的人和动物病原体感染具有活性的抗菌剂，同时这类抗菌剂具有有利的物理形态、 合适的理化性质以制得给药途径更便捷、疗效更稳定、临床使用无配伍禁忌而更安全的制 剂。
【发明内容】
[0005] 发明目的：本发明目的在于针对现有技术的不足，提供一种新型取代的噁唑烷酮 水溶性衍生物，用于制备预防或治疗细菌感染性疾病的药物;这类取代的噁唑烷酮水溶性 衍生物具有水溶性好、在体内迅速转变为活性成分，给药途径更便捷、疗效更稳定、临床使 用无配伍禁忌而更安全的特点。
[0006] 本发明的第二个目的是提供上述取代的噁唑烷酮水溶性衍生物的制备方法。
[0007] 本发明的第三个目的是提供包含上述取代的噁唑烷酮水溶性衍生物的药物组合 物。
[0008] 本发明的第四个目的是提供上述取代的噁唑烷酮水溶性衍生物或药物组合物在 制备在预防或治疗宿主，包括温血动物，尤其是人类的细菌感染药物中的用途。
[0009] 技术方案:本发明所述的式I化合物，或其药学可接受的酸式盐，溶剂化物或水合 物：
[0010]
[0011] 其中:办为二肽酰基或多肽酰基，其中至少一个氨基酸酰基由天然氨基酸形成。
[0012] 在本发明中的一种较优方案中，Ri为由甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨 酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪胺酸、天冬氨酸、天冬酰胺酸、谷氨酸、谷氨酰胺酸、赖氨酸、甲硫氨 酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、组胺酸以及精氨酸中的任意两个氨基酸组成的二肽 酰基或其中的任意一个与一个非天然氨基酸组成的二肽酰基。
[0013] 在本发明中的一种较优方案中，Ri，
R2为 甘氨酰基、丙氨酰基、缬氨酰基、亮氨酰基、异亮氨酰基、苯丙氨酰基、色氨酰基、酪胺酰基、 天冬氨酰基、天冬酰胺酰基、谷氨酰基、谷氨酰胺酰基、赖氨酰基、甲硫氨酰基、丝氨酰基、苏 氨酰基、半胱氨酰基、脯氨酰基、组胺酰基、精氨酰基以及非天然氨基酸酰基中的任意一种 或由以上任意两个氨酰基组成的二肽酰基。
[0014] 在本发明中的一种更优方案中，心为
为 甘氨酰基、丙氨酰基、缬氨酰基、亮氨酰基、异亮氨酰基、苯丙氨酰基、色氨酰基、酪胺酰基、 天冬氨酰基、天冬酰胺酰基、谷氨酰基、谷氨酰胺酰基、赖氨酰基、甲硫氨酰基、丝氨酰基、苏 氨酰基、半胱氨酰基、脯氨酰基、组胺酰基、精氨酰基或非天然氨基酸酰基。
[0015] 在本发明中的一种较优方案中，Rii
2为甘氨酰基、丙氨 酰基、缬氨酰基、亮氨酰基、异亮氨酰基、苯丙氨酰基、色氨酰基、酪胺酰基、天冬氨酰基、天 冬酰胺酰基、谷氨酰基、谷氨酰胺酰基、赖氨酰基、甲硫氨酰基、丝氨酰基、苏氨酰基、半胱氨 酰基、脯氨酰基、组胺酰基以及精氨酰基中的任意一种或其中的任意两个氨酰基组成的二 肽酰基或其中的任意一个与一个非天然氨基酸酰基组成的二肽酰基。
[0016] 在本发明中的一种更优方案中，心为
：为甘氨酰基、丙氨 酰基、缬氨酰基、亮氨酰基、异亮氨酰基、苯丙氨酰基、色氨酰基、酪胺酰基、天冬氨酰基、天 冬酰胺酰基、谷氨酰基、谷氨酰胺酰基、赖氨酰基、甲硫氨酰基、丝氨酰基、苏氨酰基、半胱氨 酰基、脯氨酰基、组胺酰基或精氨酰基。
[0017] 本发明提供的化合物选自如下化合物中的一种，或其药学上可接受的酸式盐、溶 剂化物或水合物：
[0018]
[0019]
[0020] 本发明提供的所述的衍生物包括式I化合物的光学异构体。
[0021] 本发明所述的衍生物包括式I化合物或其药学上可接受的酸式盐，包括但不限于 化合物与下列酸形成的盐:盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、乙酸、马 来酸、富马酸、苹果酸、杏仁酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、草酸或琥珀酸。
[0022] 本发明中的"氨基酸酰基"是指氨基酸(NH2-R_C( =0)_0H)中的羧基缺少-OH所形 成的基团（NH2-R-C(=0)-)。这里所指的氨基酸包括20种天然氨基酸，例如：丙氨酸(Ala)、 缬氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、异亮氨酸（lie)、脯氨酸(Pro)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)、 蛋氨酸(Met)、甘氨酸(Gly)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、半胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)、天 冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、 组氨酸(Hi s)等，也包括各种非天然氨基酸。
[0023]第二方面，本发明提供了上述取代的噁唑烷酮水溶性衍生物式I化合物或其药学 上可接受酸式盐、溶剂化物或水合物的制备方法，包括下列步骤：
[0024]参考专利申请200480037612.2的合成方法，采用相应的起始原料，首先合成式II 化合物，式II化合物也可以外购获得。
[0025]
[0026] 式II化合物与式III化合物在缩合剂条件下或式II化合物与式IV化合物反应，再 脱除氨基保护基得到式I化合物：
[0027] 1J
[0028] 其中，R3为苄氧羰基保护氨基末端，并且氨基酸侧链有相应保护基的 y
侧链的相应保护基可以是三苯甲基、 叔丁氧羰基、节氧羰基、荷甲氧羰基等，当制备反应以式ΠΙ化合物为合成原料时，缩合剂可 以为羰基二咪唑(CDI)、N，N'_二异丙基碳二亚胺(DIC)、N，N'_二环己基碳二亚胺(DCC)、N-(3-二甲氨基丙基）-N'_乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC · HCl)、0-(7-氮苯并三氮唑）-N，N，N'， Ν'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、苯并三氮唑-N，N，N'，N'_四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)，反 应中可以加入相应的催化剂如N，N-二甲氨基吡啶及缚酸剂，Cbz基团为保护氨基的苄氧羰 基保护基。
[0029] 作为一种优选的实施方案，本发明提供了上述取代的取代的噁唑烷酮水溶性衍生 物式I化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物的制备方法，所述方法包括将式II 化合物或其盐溶于有机溶剂中，冷却下分批加入碱，然后与式IV化合物反应，再用催化氢化 脱除Cbz保护基，得到式I化合物;或者将式III化合物与缩合剂反应，再与式II化合物或其 盐的有机溶剂反应，加入碱，再用催化氢化脱除Cbz保护基，得到式I化合物，如果有必要可 以通过常规方法例如重结晶、柱层析等进一步纯化。这里，所述的碱可以是无机碱或有机 碱，可选自碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、三乙胺、或N，N-二异丙基乙胺等。式I化合 物与酸的有机溶剂溶液或水溶液按照比例成盐得到式I化合物的盐。
[0030] 特别的，对于本发明中氨基酸侧链具有额外易反应官能团的化合物，采用侧链保 护的氨基酸作为起始原料，在缩合反应后加入脱保护步骤。
[0031] 第三方面，本发明还提供了包含治疗有效量的取代的噁唑烷酮水溶性衍生物式I 化合物、或其药学上接受的酸式盐、溶剂化物或者水合物的药物组合物，该药物组合物可以 还包含可药用载体或稀释剂。该药物组合物还可以与其他活性成分，以形成联合用药的组 合物或是具有协同增效的组合物。该药物组合物可通过静脉注射给药、通过注射入组织给 药、腹膜内给药、口服给药或鼻腔内给药。该药物组合物可具有选自溶液、分散体、悬浮液、 粉末、胶囊、片剂、丸剂、延时释放胶囊、延时释放片剂和延时释放丸剂的形式。该药物组合 物的给药剂量为5-5000mg/日。
[0032] 第四方面，本发明提供了上述取代的噁唑烷酮水溶性衍生物如式I化合物、或其药 学上接受的酸式盐、溶剂化物或者水合物用于制备预防或治疗宿主，包括温血动物，尤其是 人类的细菌感染药物中；其中，所述细菌选自革兰氏阳性菌如葡萄球菌、肠道球菌或链球 菌;厌氧微生物如类菌体或梭菌体;耐酸微生物如结核分支菌或鸟分支菌。
[0033] 有益效果：与现有技术相比，本发明的新型的取代的噁唑烷酮水溶性衍生物具有 显著的抗细菌感染活性、生物利用度高、非常好的水溶性（易于注射给药）、方便的制剂制 备，疗效更稳定、临床使用无配伍禁忌而更安全等特点。
【具体实施方式】
[0034] 下面通过具体实施例对本发明技术方案进行详细说明，对于本领域的普通技术人 员而言，在本发明的教导下，根据现有技术，对本发明实施方案进行的改进，仍属于本发明 的保护范围内。
[0037] 核磁共振氢谱数据是由Bruker AV-300核磁共振波谱仪采集并处理。[0038] 实施例1:MJ20824的合成[0039] (1)中间体M24的合成
[0035]实施例中使用的化合物原料的来源是:所有的试剂由试剂公司购买，式II化合物 参考中国专利申请200480037612.2的方法采用相应的起始原料合成，式II化合物也可由试 剂公司
[0036]
[0040]
[0041 ]将Cbz-Lys(Cbz)-Pr〇-OH(S24，512mg，lmmo 1)用3ml N，N-二甲基甲酰胺（DMF)溶 解，降温至-5°C，搅拌下加入DIC(63. lmg，0.5mmol)，室温下反应30min，继续降温至_5°C，依 次加入II(185mg，0.5mmol)的2ml DMF溶液，催化量4-二甲氨基吡啶(DMAP)，室温反应4h，反 应结束倒入15ml水中，用15ml乙酸乙酯萃取3遍，合并有机层，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂， 得黄色固体，用硅胶柱层析分离，得到类白色粉末(M24)229mg，收率53%。1^(111/幻 ：864.3[M +1] +。
[0042] (2)MJ20824 的合成
[0043]
[0044] 将M24(216mg，0 · 25mmo 1)用3ml 甲醇溶解，加入5 %Pd/C 200mg，氢气下反应30min， 反应结束后，过滤掉Pd/C，滤液旋干溶剂，用硅胶柱层析分离，得到白色粉末（MJ20824) 64mg，收率43.2% JSU/z) :596.3[M+1]VH-匪R(DMS0-d6)S: 1.41-1 ·95(ι?，10H) ,2.16-2.28(m,2H),2.61-2.91(m,2H),3.41-3.53(m,lH),3.69-3.82(m,lH),3.88-3.98(m,lH), 4.08-4.21(m,lH),4.23-4.32(m,1H),4.33-4.45(m,1H),4.47-4.55(s,3H),4.95-5.06(m, 1H)，7·49-7·58(d，1H)，7·65-7·74(d，1H)，7·75-7·84(m,1H)，7·99-8·16(m,3H)，8·17-8·27 (m，2H)，8.28-8.43(m，3H)，8.91-8.99(s，lH)。
[0045] 实施例2:MJ20801的合成
[0046] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Gly-Pro-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MJ20801 JSU/z): 525.2[M+1 ] +。
[0047] 实施例3:MJ20802的合成
[0048] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Ala-Pro-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MEOSC^JSU/z): 539.2[M+1 ] +。
[0049] 实施例4:MJ20803的合成
[0050] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Val-Pro-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到町20803<^(!11/2): 567.2[M+1 ] +。
[0051 ] 实施例5:MJ20804的合成
[0052] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Gly-Ala-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MJ20804 JS(m/z): 499.2[M+1 ] +。
[0053] 实施例6:MJ20805的合成
[0054] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Ala-Ala-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MJ20805 JS(m/z): 513.2[M+1 ] +。
[0055] 实施例7:MJ20806的合成
[0056] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Val-Ala-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MJ2080613(111/2):541.2[M+1] +。
[0057] 实施例8:MJ20807的合成
[0058] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Leu-Ala-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MEOSOTJSU/z): 555.2[M+1 ] +。
[0059] 实施例9:MJ20808的合成
[0060] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Ile-Ala-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MEOSOSJSU/z): 555.2[M+1 ] +。
[0061 ] 实施例10:MJ20809的合成
[0062] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Phe-Ala-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MEOSOLMSU/z): 589.2[M+1 ] +。
[0063] 实施例11:MJ20810的合成
[0064] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Trp(Boc)-Ala-〇H和II为起始原 料，经缩合、氯化氢脱除叔丁氧羰基保护、催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到MJ208HKMS (m/z):628.2[Μ+1]+〇
[0065] 实施例12:MJ20811的合成
[0066] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Tyr (tBu )-Ala-〇H和II为起始原 料，经缩合、氯化氢脱除叔丁基保护、催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到MEOSIUMSU/ z)：605.2[M+l]+〇
[0067] 实施例13:MJ20812的合成
[0068] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Asn-Ala-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MJ20812 JS(m/z): 556.2[M+1 ] +。
[0069] 实施例14:MJ20813的合成
[0070] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Asp(0Bzl )-Ala-〇H和II为起始原 料，经缩合、催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到MJ20813 JS(m/z): 557.2[M+1 ] +。
[0071] 实施例15:MJ20814的合成
[0072] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Glu(0Bzl )-Ala-〇H和II为起始原 料，经缩合、催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到MJ20814 JS(m/z): 571.2[M+l ] +。
[0073] 实施例16:MJ20815的合成
[0074] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Gln-Ala-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MJ20815 JS(m/z): 570.2[M+1 ] +。
[0075] 实施例17:MJ20816的合成
[0076] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Met-Ala-OH和II为起始原料，经 缩合、Raney Ni催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到町20816<^(111/2): 573.2[M+1 ] +。
[0077] 实施例18:MJ20817的合成
[0078] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Lys(Cbz)-Ala-〇H和II为起始原 料，经缩合、催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到MJ20817 JS(m/z): 570.3[M+1 ] +。
[0079] 实施例19:MJ20818的合成
[0080] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Ser(tBu)-Ala-〇H和II为起始原 料，经缩合、氯化氢脱除叔丁基保护、催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到MEOSISJSU/ z)：529.2[M+l]+〇
[0081 ] 实施例20:MJ20819的合成
[0082] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Thr (tBu )-Ala-〇H和II为起始原 料，经缩合、氯化氢脱除叔丁基保护、催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到MEOSILMSU/ z)：543.2[M+l]+〇
[0083] 实施例21:MJ20820的合成
[0084] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Cys(Trt)-Ala-〇H和II为起始原 料，经缩合、氯化氢脱除三苯甲基保护、Raney Ni催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到 MJ20820〇MS(m/z)：545.2[M+1]+〇
[0085] 实施例22:MJ20821的合成
[0086] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Pro-Ala-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MJ20821 JSU/z): 539.2[M+1 ] +。
[0087] 实施例23:MJ20822的合成
[0088] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Hi s (Trt )-Ala-〇H和II为起始原 料，经缩合、氯化氢脱除三苯甲基保护、催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到112082215^/ z)：579.2[M+l]+〇
[0089] 实施例24:MJ20823的合成
[0090] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Arg(Boc)2-Ala-〇H和II为起始原 料，经缩合、氯化氢脱除叔丁氧羰基保护、催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到MJ20823IS (m/z):598.3[Μ+1]+〇
[0091] 实施例25:MJ20825的合成
[0092] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Ser (tBu )-Pr〇-OH和II为起始原 料，经缩合、氯化氢脱除叔丁基保护、催化氢化脱苄氧羰基保护，最终得到^2082515^/ z)：555.2[M+l]+〇
[0093] 实施例26:MJ20826的合成
[0094] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Ala-Gly-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到町20826<^(111/2):499.2[1+1] +。
[0095] 实施例27:MJ20827的合成
[0096] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Val-Gly-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到町20827。1^(111/2): 527.2[M+1 ] +。
[0097] 实施例28:MJ20828的合成
[0098] 参考MJ20824的合成，其不同之处在于，选用Cbz-Gly-Gly-OH和II为起始原料，经 缩合和脱保护，最终得到MJ2082813(111/2):485.2[M+1] +。
[0099]实施例29:式I化合物盐酸盐的制备
[0100]将化合物溶解于甲醇-乙酸乙酯的混合溶剂，滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液，旋去部 分溶剂，用乙酸乙酯-石油醚混合溶剂置换，旋蒸3次，固体用乙酸乙酯-石油醚混合溶剂洗3 次，得到化合物MJ20801~MJ20828的盐酸盐。
[0101]实施例30:化合物溶解性试验
[0102] 取本品，研磨成细粉，照中国药典2010年版二部凡例溶解度项下操作。将供试品精 密称取适量后加入水，于水浴25 °C环境放置，每5分钟振摇30秒，观察30分钟内溶解情况，如 无目视可见颗粒即视为溶解，溶解实验结果如表1所示；
[0103] 表1化合物溶解试验结果
[0104]
[0105]上述结果显示，本发明的化合物(盐酸盐)与泰地唑利比较，水溶性高310倍以上。
[0106] 泰地唑利是一种低水溶性的白色粉末，而注射给药需要药物具有很好的溶解性， 本发明化合物的盐酸盐具有很好的水溶性，为制剂提供便利。
[0107] 实施例31:式I化合物在人血浆中的生物转化试验
[0108] 本发明化合物需要在体内转化为式II化合物发挥药物作用，所以体内生物转化的 程度直接与药效相关。测试化合物用甲醇溶解，配制成浓度l〇mg/ml溶液，取3ul，加入至 300ul血浆中，37°C温孵2小时，取温孵血浆100ul，加入甲醇900ul，涡旋3min，10000转离心 3min，上清液进样20ul用高效液相色谱分析，以面积归一化法，即式II化合物峰面积/(式II 化合物峰面积+发明化合物峰面积），计算转化率。结果如表2所示：
[0109] 表2化合物人血浆温孵1小时转化率
[0110]
L0111J 实施例32:式I化合物与含二价阳离子溶液的配伍试验
[0112]泰地唑利磷酸酯组:精密称取泰地唑利磷酸酯20毫克，置1.5ml塑料离心管，加入 〇. 4毫升纯净水，滴加尽量少氢氧化钠溶液（约14滴;44.41mg氢氧化钠溶解于10ml纯净水 中）助溶，完全溶解成泰地唑利磷酸酯储备液。取复方氯化钠注射液(林格氏液)8ml置10ml 离心管，滴加2滴泰地唑利磷酸酯储备液，静置观察，后离心。
[0113] 空白组：用空的1 . 5ml离心管，加入0.4毫升纯净水，滴加15滴氢氧化钠溶液 (44.4 lmg氢氧化钠溶解于10ml纯净水中），成空白储备液。取复方氯化钠注射液(林格氏液） 8ml置10ml离心管，滴加2滴空白储备液，静置观察，后离心。
[0114] 试验组：称取化合物MJ20801-MJ20828的盐酸盐30毫克，置1.5ml塑料离心管，用 0.4毫升纯净水溶解，完全溶解后，成储备液。取复方氯化钠注射液(林格氏液)8ml置10ml离 心管，滴加2滴本储备液，静置观察，后离心。结果见表3:
[0115] 表3化合物与钙离子配伍试验 「01161
[0117] 磷酸根可以与二价金属离子(如钙离子、镁离子)形成沉淀，所以临床使用的泰地 唑利磷酸酯注射剂不能与含有二价金属离子的注射液(林格氏液等)一起使用，本发明化合 物不与二价金属离子反应，使用中与林格氏液没有配伍禁忌。
[0118] 实施例33:采用本发明化合物或其药学可接受的酸式盐，溶剂化物或水合物作为 活性成分配制的药物组合物
[0119] 所述的药物组合物中包括本发明化合物的盐酸盐、甘露醇和注射用水;具体配方 为:称取甘露醇150g，加注射用水4000ml，搅拌，溶解，得3.75 %甘露醇溶液。称取本发明化 合物的盐酸盐300g，加上述3.75 %甘露醇溶液4000ml，搅拌，溶解。0.22μπι滤膜过滤，分装至 西林瓶中（4ml/瓶），冷冻干燥，压盖密封，即得。
[0120] 实施例34:采用本发明化合物进行抗细菌感染的试验
[0121] 采用微量肉汤稀释法进行试验，将本发明化合物用去离子水溶解制备成lmg/mL左 右的溶液，然后移取适量溶液，用去离子水稀释。化合物MIC的测定在96孔细菌培养板上进 行，以利奈唑胺溶液做阳性对照，去离子水为空白对照，试验化合物重复1次，于各孔内加入 对应的样品溶液和稀释的临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌悬液(1 X 107CFU/ mL)，盖紧，置160r/min、37°C的摇床中，培养24h后各孔加入20yL噻唑蓝(MTT，4mg/mL)摇匀， 无颜色变化，孔中最小的试药浓度为该药对测试菌株的MIC。以此测定本发明化合物对耐甲 氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床分离株的最低抑菌浓度。结果如表4所示：
[0122] 表4本发明化合物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床分离株的最低抑菌浓 度
[0123]
[0124]
[0125] 由表4数据可知，采用本发明药物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行抑菌试验，在 一个较低的浓度条件下即可对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌由较好的抑制作用，因此证明， 本发明产品用于抗细菌感染具有较好的效果。
[0126] 如上所述，尽管参照特定的优选实施例已经表示和表述了本发明，但其不得解释 为对本发明自身的限制。在不脱离所附权利要求定义的本发明的精神和范围前提下，可对 其在形式上和细节上作出各种变化。
【主权项】
1. 式I化合物，或其药学可接受的酸式盐，溶剂化物或水合物：其中： 化为二肤酷基或多肤酷基，其中至少一个氨基酸酷基由天然氨基酸形成。2. 根据权利要求1所述的化合物或其药学可接受的酸式盐，溶剂化物或水合物，其中:Ri 为由甘氨酸、丙氨酸、鄉氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪胺酸、天冬氨酸、天冬 酷胺酸、谷氨酸、谷氨酷胺酸、赖氨酸、甲硫氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半脫氨酸、脯氨酸、组胺酸 W及精氨酸中的任意两个氨基酸组成的二肤酷基或其中的任意一个与一个非天然氨基酸 组成的二肤酷基。3. 根据权利要求1所述的式I化合物或其药学可接受的酸式盐，溶剂合物或水合物，其 中： Ri为R2为甘氨酷基、丙氨酷基、鄉氨酷基、亮氨 酷基、异亮氨酷基、苯丙氨酷基、色氨酷基、酪胺酷基、天冬氨酷基、天冬酷胺酷基、谷氨酷 基、谷氨酷胺酷基、赖氨酷基、甲硫氨酷基、丝氨酷基、苏氨酷基、半脫氨酷基、脯氨酷基、组 胺酷基、精氨酷基W及非天然氨基酸酷基中的任意一种或由W上任意两个氨酷基组成的二 肤酷基。4. 根据权利要求3所述的式I化合物或其药学可接受的酸式盐，溶剂合物或水合物，其 中： Ri巧R2为甘氨酷基、丙氨酷基、鄉氨酷基、亮氨 酷基、异亮氨酷基、苯丙氨酷基、色氨酷基、酪胺酷基、天冬氨酷基、天冬酷胺酷基、谷氨酷 基、谷氨酷胺酷基、赖氨酷基、甲硫氨酷基、丝氨酷基、苏氨酷基、半脫氨酷基、脯氨酷基、组 胺酷基、精氨酷基或非天然氨基酸酷基。5. 根据权利要求1所述的化合物或其药学可接受的酸式盐，溶剂化物或水合物，其中:Ri 为R2为甘氨酷基、丙氨酷基、鄉氨酷基、亮氨酷基、异亮氨酷基、苯 丙氨酷基、色氨酷基、酪胺酷基、天冬氨酷基、天冬酷胺酷基、谷氨酷基、谷氨酷胺酷基、赖氨 酷基、甲硫氨酷基、丝氨酷基、苏氨酷基、半脫氨酷基、脯氨酷基、组胺酷基W及精氨酷基中 的任意一种或其中的任意两个氨酷基组成的二肤酷基或其中的任意一个与一个非天然氨 基酸酷基组成的二肤酷基。6. 根据权利要求5所述的化合物或其药学可接受的酸式盐，溶剂化物或水合物，其中:Ri 为R2为甘氨酷基、丙氨酷基、鄉氨酷基、亮氨酷基、异亮氨酷基、苯 丙氨酷基、色氨酷基、酪胺酷基、天冬氨酷基、天冬酷胺酷基、谷氨酷基、谷氨酷胺酷基、赖氨 酷基、甲硫氨酷基、丝氨酷基、苏氨酷基、半脫氨酷基、脯氨酷基、组胺酷基或精氨酷基。7. 根据权利要求1~6任一项所述的化合物，其特征在于选自W下结构的群组：8. -种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1~7中任一项所述的式I化合物或 其药学可接受的酸式盐、溶剂合物或水合物作为活性成分。9. 权利要求1~7中任一项所述的式I化合物或其药学可接受的酸式盐、溶剂合物或水 合物或如权利要求8所述的药物组合物在制备预防或治疗溫血动物细菌感染的药物方面的 应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于:所述细菌选自革兰氏阳性菌类、厌氧微生 物菌类或耐酸微生物菌类。
【文档编号】C07K5/072GK106083994SQ201610438425
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月17日
【发明人】不公告发明人
【申请人】南京曼杰生物科技有限公司