含有活性菌群的微生物组合物、制备方法及应用
【专利摘要】本发明提供一种含有活性菌群的微生物组合物，该组合物包括固体培养基A、B和液体培养基；固体培养基A包括60～90重量份的麦麸，10～30重量份的黄豆粉，70～80重量份的水；固体培养基B包括70～95重量份的麦麸，5～20重量份的米糠，45～50重量份的水；液体培养基包括重量百分比为：0.5～0.7酵母膏；1.0～1.2蛋白胨；1.5～2.0葡萄糖，其余为水；本发明还提供一种制备微生物组合物的方法及该微生物组合物的应用；使用本发明的组合物用于制备肥料、饲料的过程中能高效地繁殖，用于制备肥料对农作物的健康生长有着极大的作用，用于制备饲料添加的益生菌对禽畜的健康生长也有着极大的作用；组合物的制备方法简单，有利推广应用。
【专利说明】
含有活性菌群的微生物组合物、制备方法及应用
技术领域
[0001] 本发明设及微生物领域，尤其是适用于种植业和养殖业的一种含有活性菌群的微 生物组合物及制备方法。
【背景技术】
[0002] 在现有技术中，种植业和养殖业等因使用无机化材料，给该领域带来各种弊端。
[0003] 在种植业，因长期使用化肥、农药等造成了±壤状况的恶习性循环，最突出的是± 壤板结，通透性差，所施化肥农作物只能吸收=分之一，另=分之二的N P K及作物所需的 微量元素被±壤固化领域技术问题。在农作物种植方面，现有的农作物会因为使用通过使 用农药抑制有害微生物的繁殖，减少病虫害发生，但农药的使用会蔬菜水果上残留农药残 渣而无法清洗干净对人们的健康造成伤害。
[0004] 在养殖业领域，由于营养学和畜产生理学的高度发展，给畜牧业的饲料带来了很 大进步。为了提高家畜生产，虽然目前已经做出了 W营养为中屯、的混合饲料它的成果不容 忽视。但是另一方面，同于生产率的提高及场化的饲料环境和品种的不断改良，使家畜降低 了耐病性和抵抗能力，招致施理机能的减弱，从而出现了生理障碍、机能障碍、代谢障碍等 多种病症。于是出现了滥用预防药品及给混合饲料里大量添加抗生素，预防药，维生素等一 般常识所想到的，继而成为新的社会问题，从食品公害的角度来看也应追究运些弊端，使之 必须达到食品卫生法的要求。
【发明内容】
[0005] 为此，本发明所要解决的技术问题在于，针对上述现有技术的不足，提供一种含有 活性菌群的微生物组合物，该组合物可用于制备微生物肥料、饲料等，使用该肥料、饲料的 过程中能迅速高效地产生高级酒精分解酶，为生产抑制病原菌的乳酸杆菌提供了很好的营 养源，从而高效地繁殖，用于制备肥料对农作物的健康生长有着极大的作用，使农作物的产 量大大提高，产品的质量有所提高，口感得到改善，用于制备饲料添加剂对禽畜的健康生长 也有着极大的作用。
[0006] 本发明要解决的另一个技术问题是提供一种含有活性菌群的微生物组合物的制 备方法，该制备方法简单，操作条件易控制，培养基原料来源广泛，价格低廉，生产周期短， 生产成本低，有利推广应用。
[0007] 为解决上述技术问题，本发明解决该技术问题的技术方案是:提供一种含有活性 菌群的微生物组合物，该组合物的含细菌数1.0~4.0 X108cfu/g、酵母菌数3.5~8.0 X 105cfu/g、霉菌数2.5~5.5 X 106c化/g的组合物，其含水量《15% ;组合物包括固体培养基 A，固体培养基B、固体培养基C和液体培养基，所述的固体培养基A，固体培养基B和固体培养 基C分别取解憐菌、解钟菌、霉菌，乳酸菌、芽抱杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽抱杆菌，进行 菌种接种;其中，固体培养基A包括60~90重量份的麦教，10~30重量份的黄豆粉，70~80重 量份的水；固体培养基B包括70~95重量份的麦教，5~20重量份的米慷，45~50重量份的 水;固化培养基c包括40~60重量份的麦教，35~55重量份的米慷，1~5重量份的红糖，40~ 60重量份的水;液体培养基包括重量百分比为:0.5~0.7酵母膏；1.0~1.2蛋白腺；1.5~ 2.0葡萄糖，其余为水。
[000引进一步地，所述的液体培养菌的PH值为6~7.0。
[0009]本发明提供的另一技术方案是:提供一种含有活性菌群的微生物组合物的制备方 法，包括W下步骤：
[0010] (1)纯种扩大培养:将固体培养基A置于500~2000ml的透明容器中，灭菌，分别取 解憐菌、解钟菌、霉菌，乳酸菌、芽抱杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽抱杆菌的菌种分别接种 于固体培养基A中，放置于恒溫箱中在25~35°C培养48~72小时；
[0011] (2)液体发酵培养:取酵母菌的菌种3-7ml接种于液体培养基中，于25~35°C恒溫 振荡培养培养15~25小时得发酵液；
[0012] (3)固体发酵培养:在发酵罐中加入固体培养基B，取固体培养基B重量的0.06~ 0.2%的经步骤(2)液体发酵培养所得的发酵液和各取固体培养基B重量的0.1~0.3%经步 骤(1)纯种扩大培养的解憐菌、解钟菌、霉菌，乳酸菌、芽抱杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽 抱杆菌接入发酵罐的固体培养基B中，于溫度25~4(TC，调节发酵罐通气量到0.5-0.7立方 米/分钟，培养36小时得固体培养物；
[0013] (4)将步骤(3)所得的固体培养物在50~70°CW下干燥，控制所得组合物的含水量 《10%。
[0014] 进一步地，所述的步骤(3)固体发酵培养在经一级固体发酵培养所得到的含活性 微生物菌群的组合物后进一步进行二级发酵。
[0015] 进一步地，所述的二级发酵是指取一级固体发酵培养所得的活性微生物菌群的组 合物按固体培养基C重量的1%接入固体培养基C中进行培养，培养溫度45~6(TC，翻堆通 气，培养72~86小时后在65°CW下干燥，控制组合物的含水量《10%，所得含活性微生物菌 群的组合物含细菌数为1.5~2.0 X 108c化/g，酵母菌数为3.5~4.0 X 105c化/g，霉菌数为 2.5~3.0Xl〇6cfu/g。
[0016] 进一步地，所述的固化培养基C包括40~60重量份的麦教，35~55重量份的米慷，1 ~5重量份的红糖，40~60重量份的水。
[0017] 本发明还提供一种含有活性菌群的微生物组合物的用途，包括该微生物组合物在 制备微生物肥料或微生物饲料中的应用。
[0018] 本发明的上述技术方案相比现有技术具有W下优点：
[0019] 1、使用本发明的含有活性微生物菌群的组合物，在用于制备肥料、饲料的过程中 能迅速高效地产生高级酒精分解酶，为生产抑制病原菌的乳酸杆菌提供了很好的营养源， 从而高效地繁殖，用于制备肥料对农作物的健康生长有着极大的作用，使农作物的产量大 大提高，产品的质量有所提高，口感得到改善。用于制备饲料添加剂对禽畜的健康生长也有 着极大的作用
[0020] 2、本发明的产品制备方法简单，操作条件易控制，培养基原料来源广泛，价格低 廉，生产周期短，生产成本低，有利推广应用。
[0021] 3、本发明采用微生物液体与固体相结合发酵技术，可较好解决固体发酵过程中， 发酵周期长，容易污染，各种发酵条件难W控制问题，保证了产品质量。
【具体实施方式】
[0022] W下将，使用W下实施例对本发明进行进一步阐述。
[0023] 本发明提供一种含有活性菌群的微生物组合物，该组合物的含细菌数1.0~4.0X 108cfu/g、酵母菌数3.5~8.0 X 105c化/g、霉菌数2.5~5.5 X 106c化/g的组合物，其含水量 《15% ;组合物包括固体培养基A，固体培养基B，固体培养基C和液体培养基;其中，固体培 养基A包括60~90重量份的麦教，10~30重量份的黄豆粉，70~80重量份的水;固体培养基B 包括70~95重量份的麦教，5~20重量份的米慷，45~50重量份的水;固化培养基C包括40~ 60重量份的麦教，35~55重量份的米慷，1~5重量份的红糖，40~60重量份的水;液体培养 基包括重量百分比为:0.5~0.7酵母膏；1.0~1.2蛋白腺;1.5~2.0葡萄糖，其余为水，所述 的液体培养菌的PH值为6~7.0。
[0024] 在本发明中，所述的固体培养基A，固体培养基B和固体培养基C分别取解憐菌、解 钟菌、霉菌，乳酸菌、芽抱杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽抱杆菌进行菌种接种。
[0025] 本发明所述含有活性菌群的微生物组合物的制备方法，包括W下步骤：
[0026] (1)纯种扩大培养:将固体培养基A置于500~2000ml的透明容器中，灭菌，分别取 解憐菌、解钟菌、霉菌，乳酸菌、芽抱杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽抱杆菌的菌种分别接 种于固体培养基A中，放置于恒溫箱中在25~35°C培养48~72小时；
[0027] (2)液体发酵培养:取酵母菌的菌种3-7ml接种于液体培养基中，于25~35°C恒溫 振荡培养培养15~25小时得发酵液；
[0028] (3)固体发酵培养:在发酵罐中加入固体培养基B，取固体培养基B重量的0.06~ 0.2%的经步骤(2)液体发酵培养所得的发酵液和各取固体培养基B重量的0.1~0.3%经步 骤(1)纯种扩大培养的解憐菌、解钟菌、霉菌，乳酸菌、芽抱杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽 抱杆菌接入发酵罐的固体培养基B中，于溫度25~4(TC，调节发酵罐通气量到0.5-0.7立方 米/分钟，培养36小时得固体培养物;固体发酵培养在经一级固体发酵培养所得到的含活性 微生物菌群的组合物后进一步进行二级发酵;所述的二级发酵是指取一级固体发酵培养所 得的活性微生物菌群的组合物按固体培养基C重量的1%接入固体培养基C中进行培养，培 养溫度45~60°C，翻堆通气，培养72~86小时后在65°CW下干燥，控制组合物的含水量《 10%，所得含活性微生物菌群的组合物含细菌数为1.5~2.0X108cfu/g，酵母菌数为3.5~ 4.0 X l〇5cfu/g，霉菌数为2.5~3.0 X l〇6cfu/g。
[0029] (4)将步骤(3)所得的固体培养物在50~70°CW下干燥，控制所得组合物的含水量 《10%。
[0030] 本发明实施例含有活性菌群的微生物组合物用于在制备微生物肥料或微生物饲 料中的应用。
[0031] 实施例1
[0032] 含有活性菌群的微生物组合物的制备：
[0033]
[0034] 上述1-7组配方的制备方法如下：
[0035] (1)纯种扩大培养:将固体培养基A置于500~2000ml的透明容器中，优选600ml、 800ml或1500ml，灭菌，分别取解憐菌、解钟菌、霉菌，乳酸菌、芽抱杆菌，乳酸菌，双歧杆菌， 枯草芽抱杆菌的菌种分别接种于固体培养基A中，放置于恒溫箱中在25~35°C培养48~72 小时，优选溫度为30°C，优选时间为55小时或60小时；
[0036] (2)液体发酵培养:取酵母菌的菌种3~7ml接种于液体培养基中，于25~35°C恒溫 振荡培养培养15~25小时得发酵液;优选菌种为4ml或6ml，溫度为30°C，优选培养时间为20 小时。
[0037] (3)固体发酵培养:在发酵罐中加入固体培养基B，取固体培养基B重量的0.06~ 0.2%的经步骤(2)液体发酵培养所得的发酵液和各取固体培养基B重量的0.1~0.3%经步 骤(1)纯种扩大培养的解憐菌、解钟菌、霉菌，乳酸菌、芽抱杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽 抱杆菌接入发酵罐的固体培养基B中，于溫度25~4(TC，调节发酵罐通气量到0.5立方米/分 钟，培养36小时得固体培养物；固体发酵培养在经一级固体发酵培养所得到的含活性微生 物菌群的组合物后进一步进行二级发酵;所述的二级发酵是指取一级固体发酵培养所得的 活性微生物菌群的组合物按固体培养基C重量的1%接入固体培养基C中进行培养，培养溫 度45~60°C，翻堆通气，培养72~86小时后在65 下干燥，控制组合物的含水量《10 %， 所得含活性微生物菌群的组合物含细菌数为1.5~2.0 X 108c化/g，酵母菌数为3.5~4.0 X 105cfu/g，霉菌数为2.5~3.0 X 106c化/g。固体培养基B的培养溫度优选30°C ;固体培养基C 的培养溫度优选50°C，培养时间优选80小时。
[0038] (4)将步骤(3)所得的固体培养物在50~70°CW下干燥，优选溫度是60°C，控制所 得组合物的含水量《10%，得到含有活性菌群的微生物组合物。
[0039] 实施例2
[0040] -、酵母菌的来源、培养和保存
[0041] 来源:从种植的慕枝果园的±壤中分离选育而得的野生酵母菌。
[0042] 培养:采用的培养基:将马铃馨去皮，切成小块，加水煮沸30~45分钟，过滤，将过 滤后的马铃馨与葡萄糖和水按照重量比10:1:50混合在一个大气压下灭菌18~30分钟。
[0043] 菌株培养:将酵母菌接种于上述培养基中，置于32~35°C的培养箱中培养3~5天 得酵母菌种。
[0044] 菌株保存：
[0045] 斜面培养基配方:酵母膏0.5~0.8%蛋白腺1.0~1.3%葡萄糖0.5~0.8%白 砂糖1.0~1.3%琼脂2% PH=6.4其余为水。一个大气压，灭菌20分钟。
[0046] 将培养基制作斜面试管，划线接种培养后，放置3~5°C冰箱保存。
[0047] 二、有效有益微生物组合物的制备
[0048] (1)纯种扩大培养：称取米慷lOOOg水700g揽拌混匀后作固体培养基A，分装在 50〇1111的立角瓶中，每瓶装300g的培养基A，0.1 MPa灭菌30分钟分别取解憐菌、解钟菌、霉菌， 乳酸菌、芽抱杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽抱杆菌的菌种在无菌条件下分别接种于装有 培养基的=角瓶内，置于恒溫箱培养中，在30~33°C培养72小时；
[0049] (2)液体发酵培养：
[0050] 称取酵母膏5肖、蛋白腺10肖、萄糖20肖、水1000肖揽拌溶解后?巧直为6.5作液体培养 基，分装在500ml的S角瓶中，每瓶装250ml，0.1M化灭菌30分钟，取实施例1的酵母菌种在无 菌条件下接种于装有液体培养基的=角瓶内，置于摇床，于30~32°C振荡培养24小时得发 酵液。
[0051] (3)固体发酵培养：
[0052] 称取教皮450公斤、米慷50公斤、水量为250kg，揽拌混匀后放置2小时作固体培养 基，灭菌后，在无菌条件下加入上述培养的300g解憐菌、解钟菌、霉菌，乳酸菌、芽抱杆菌，乳 酸菌，双歧杆菌，枯草芽抱杆菌的发酵液，揽拌、调节发酵罐通气量到0.5-0.7立方米/分钟， 控制溫度在31~34培养36小时，出料得固体培养物；
[0053] (4)所得的固体培养物在70°CW下干燥，所得组合物的含水量为10%，按GB 4789- 94食品卫生微生物学检验标准和NY/T 227-94标准测定得该组合物的细菌数为3.0 X l〇8cfu/g，酵母菌数为7.0 X l〇5cfu/g，霉菌数为5.0 X l〇6cfu/g
[0054]实施倒3
[0055]酵母菌的来源、培养和保存同实施例2, W此不作寶述。
[0化6] 微生物组合物的制备
[0057] (1)纯种扩大培养:称取麦教2000g水1500g揽拌混匀后作固体培养基A，分装在 50〇1111的立角瓶中，每瓶装250g的培养基A，0.1 MPa灭菌30分钟分别取解憐菌、解钟菌、霉菌， 乳酸菌、芽抱杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽抱杆菌的菌种在无菌条件下分别接种于装有 培养基的=角瓶内，置于恒溫箱培养中，在30~33°C培养48小时；
[005引（2)液体发酵培养：
[0059] 称取酵母膏80旨、蛋白腺130旨、萄糖150旨、水9640旨揽拌溶解后?巧直为6.5-7.0作液 体培养基，装于化的发酵罐中，O.lMPa灭菌30分钟，取实施例1的酵母菌种在无菌条件下接 种，在通氧下15化pm/min的转速揽拌下控制30~32°C，培养18小时得发酵液。
[0060] (3)所得的固体培养物在65°CW下干燥，所得组合物的含水量为10%，按GB/T 4789-94和NY/T 227-94标准测定得该组合物的细菌数为4.0 X 108cfu/g，酵母菌数为8.0 X l〇5cfu/g，霉菌数为5.5 X l〇6cfu/g
[0061] (4)二级固体发酵：
[0062] 称取米慷480公斤、麦教500公斤、红糖20公斤、水550公斤作固体培养基C另称取上 述(4)所得的组合物10公斤
[006引制备方法：
[0064] 1.将红糖溶于20公斤90°CW上热水中，经揽拌使其全部溶解，再倒入配备的干净 清水中备用。
[0065] 2.将米慷、麦教和原种倒入容器中充分混匀。
[0066] 3.将红糖水均匀加入原料中充分混匀。
[0067] 4.将拌和好的混合物倒入发酵槽内，料层厚度为40-50公分，将表面刮平，盖上麻 袋进行自然发酵，控制溫度不超过60°C。
[0068] 5.在发酵过程中每24小时翻堆一次，共发酵120小时立即将物料在70°C W下干燥。 所得的组合物测定含水量为5.8%，按GB/T 4789-94和NY/T 227-94标准测定得该组合物的 细菌数为1.8 X 108cfu/g，酵母菌数为4.0 X 105cfu/g，霉菌数为2.8 X 106cfu/g
[0069] 实施例4发酵有机肥的制备
[0070] 本发明实施例仅将不同上实施例3的部分详细描述，相同部分不作寶述。
[0071] a.取红糖1.5公斤加20公斤水煮开后凉至40°CW下，倒入米慷30公斤和实施例3的 有效有益微生物组合物10公斤，并揽拌混合均匀
[0072] b、将骨粉100公斤、错粪200公斤、豆巧100公斤、鱼粉100公斤，米慷30公斤等需要 的原料和山±500公斤、水450公斤混合
[0073] C、再将a和b揽拌混合均匀后堆成山形进行自然发酵。
[0074] d.每隔24小时翻堆一次，共发酵S天后65°CW下干燥即可作肥料使用。
[0075] 所制备的的肥料中含细菌数5.0 X 107cfu/g，酵母菌数4.0 X 104cfu/g，霉菌数2.0 X lO^cfu/g
[0076] 采用上述制成的发酵有机肥，用于种植苦瓜和其它肥料对比试如下
[0077] 实验日期:2014年9月1日 [007引检测日期:2014年12月5日
[0079] 试验方法：用4种不同的肥料用于苦瓜种植的实验，4种肥料共进行六个平行处理， 每个处理进行=个重复，各实验地收获后进行检测项目的测定。施肥的方法和数量相同。
[0080] 试验样品：
[0081 ]样品1:施用实施例4本发明的发酵有机肥，
[0082] 样品2:施用种植试验基地自制农家有机肥
[0083] 样品3:施用市售有机复合肥(补复合肥的成分）。
[0084] 样品4:施用有机无机复混肥(基肥和追肥）（补复合肥的成分）。
[00化]试验结果：
[0086]
0087 0088 0089 0090 0091 0092 0093 0094 0095 0096 12345678910 结论 2 从检测结果可W看出，用4种不同的肥料进行的苦瓜种植实验中，种出的苦瓜在还 原糖、粗蛋白、维生素 C含量方面基本持平，差异不明显，但样品1的产平均比其它肥料高出 13.8%。 3 实施例5饲料添加剂的制备 4 本发明实施例仅将不同上实施例3的部分详细描述，相同部分不作寶述。 5 1、材料:红糖3公斤实施例3的有效有益微生物组合物10公斤，贝壳粉20公斤，骨粉 40公斤、米慷25公斤、鱼粉40公斤干净山±1000公斤 6 2、红糖加水450公斤煮开后凉至40°CW下，倒在混合均匀的米慷有效有益微生物 组合物上，并揽拌均匀再与贝壳粉20公斤，骨粉40公斤、米慷25公斤、鱼粉40公斤干净山± 1000公斤混匀。 7 3、将上边混匀的物料置于发酵槽堆积，料层的厚度为40~50公分W后每隔24小时 翻堆一次，共发酵五天即可在65 °C干燥 8 该发酵完成的饲料益生菌中含细菌数5.0X107c化/g，酵母菌数4.0X104c化/g、霉 菌数 2.0Xl〇4cfu/g 9 试验方法:小猪30头，随机分成S组，每组10头，其中公猪7头、母猪3头。喂养时间、 方式、条件相同 10 试验组1:本发明实施例6发酵饲料益生菌5%、预混料(一种混合饲料添加剂)2%、 另外94%玉米粉、教皮、米慷、豆巧等任意混合物作饲料喂养
[0097] 试验组2:本发明实施例6发酵饲料益生菌5%、另外96%玉米粉、教皮、米慷、豆巧 等任意混合物作饲料喂养
[0098] 对照组3:用预混料4%、另外96%玉米粉、教皮、米慷、豆巧等任意混合物作饲料喂 养试验结果：
[0099]
[0100] 结论：作为猪饲料益生菌5%、喂养小猪，有效地防治仔猪的红白频，降低腹泻率 40 % ) W上，提高仔猪食粮转化率17 %，日增重提高20 %，比对照组提高14% W上。达到国家 二级排放标准。
[0101] 显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对 于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可W做出其它不同形式的变化或 变动。运里无需也无法对所有的实施方式予W穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或 变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
【主权项】
1. 一种含有活性菌群的微生物组合物，其特征在于：该组合物的含细菌数1.0~4. ox 108cfu/g、酵母菌数3 · 5~8 · 0 X 105cfu/g、霉菌数2 · 5~5 · 5 X 106cfu/g的组合物，其含水量 < 15 % ;组合物包括固体培养基A，固体培养基B、固体培养基C和液体培养基，所述的固体培 养基A，固体培养基B和固体培养基C分别取解磷菌、解钾菌、酵母菌，霉菌，乳酸菌、芽孢杆 菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽孢杆菌，进行菌种接种； 其中， 固体培养基A包括60~90重量份的麦麸，10~30重量份的黄豆粉，70~80重量份的水； 固体培养基B包括70~95重量份的麦麸，5~20重量份的米糠，45~50重量份的水； 固化培养基C包括40~60重量份的麦麸，35~55重量份的米糠，1~5重量份的红糖，40 ~60重量份的水； 液体培养基包括重量百分比为:〇 . 5~0.7酵母膏；1.0~1.2蛋白胨；1.5~2.0葡萄糖， 其余为水。2. 根据权利要求1所述的含有活性菌群的微生物组合物，其特征在于:所述的液体培养 基的PH值为6~7.0。3. -种含有活性菌群的微生物组合物的制备方法，其特征在于:包括以下步骤： (1) 纯种扩大培养:将固体培养基A置于500~2000ml的透明容器中，灭菌，分别取解磷 菌、解钾菌、酵母菌，霉菌，乳酸菌、芽孢杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽孢杆菌，的菌种分别 接种于固体培养基A中，放置于恒温箱中在25~35°C培养48~72小时； (2) 液体发酵培养:取酵母菌的菌种3-7ml接种于液体培养基中，于25~35°C恒温振荡 培养培养15~25小时得发酵液； (3) 固体发酵培养:在发酵罐中加入固体培养基B，取固体培养基B重量的0.06~0.2% 的经步骤(2)液体发酵培养所得的发酵液和各取固体培养基B重量的0.1~0.3%经步骤(1) 纯种扩大培养的解磷菌、解钾菌、霉菌，乳酸菌、芽孢杆菌，乳酸菌，双歧杆菌，枯草芽孢杆 菌，接入发酵罐的固体培养基B中，于温度25~40°C，调节发酵罐通气量到0.5~0.7立方米/ 分钟，培养36小时得固体培养物； (4) 将步骤（3)所得的固体培养物在50~70°C以下干燥，控制所得组合物的含水量< 10%〇4. 根据权利要求3所述的含有活性菌群的微生物组合物的制备方法，其特征在于:所述 的步骤(3)固体发酵培养在经一级固体发酵培养所得到的含活性微生物菌群的组合物后进 一步进行二级发酵。5. 根据权利要求4所述的含有活性菌群的微生物组合物的制备方法，其特征在于:所述 的二级发酵是指取一级固体发酵培养所得的活性微生物菌群的组合物按固体培养基C重量 的1 %接入固体培养基C中进行培养，培养温度45~60°C，翻堆通气，培养72~86小时后在65 °(：以下干燥，控制组合物的含水量<10%，最终所得含活性微生物菌群的组合物含细菌数 为1 · 5~2 · 0 X 108cfu/g，酵母菌数为3 · 5~4 · 0 X 105cfu/g，霉菌数为2 · 5~3 · 0 X 106cfu/g。6. 根据权利要求3~5任一所述的含有活性菌群的微生物组合物的制备方法，其特征在 于:所述的固体培养基A包括60~90重量份的麦麸，10~30重量份的黄豆粉，70~80重量份 的水；固体培养基B包括70~95重量份的麦麸，5~20重量份的米糠，45~50重量份的水;液 体培养基包括重量百分比为:0.5~0.7酵母膏；1.0~1.2蛋白胨；1.5~2.0葡萄糖，其余为 水。7. 根据权利要求6所述的含有活性菌群的微生物组合物的制备方法，其特征在于:所述 的固化培养基C包括40~60重量份的麦麸，35~55重量份的米糠，1~5重量份的红糖，40~ 60重量份的水。8. -种含有活性菌群的微生物组合物的用途，其特征在于:包括该微生物组合物在制 备微生物肥料或微生物饲料中的应用。
【文档编号】C12R1/07GK106047743SQ201610270781
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年4月27日
【发明人】麦伟良, 何肇铭, 张茂新, 郭升程
【申请人】肇庆荣臻生物科技有限公司