一种高纯度乌苯美司的制备方法
【专利摘要】本发明属于药物化学制备领域，具体涉及到一种高纯度的乌苯美司制备方法，包括以下步骤：将乌苯美司粗品加入到水和其他有机溶剂的混合溶液中，加热搅拌溶解；溶解后，降温析晶，抽滤，将所得的滤饼真空烘干，即得乌苯美司终产品，通过本申请制备方法的参数控制，可以显著提高乌苯美司的收率和纯度，产品纯度高，更好地确保产品质量。
【专利说明】
一种高纯度乌苯美司的制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于药物化学制备领域，具体涉及到一种高纯度的乌苯美司制备方法。
【背景技术】
[0002] 乌苯美司(Ubenimex)，其化学名称为:N-[(2S，3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰]_ L-亮氨酸;分子式:Ci6H24N2〇4;分子量:308.37;其结构式如下：
[0004] 专利US4281180公开了乌苯美司的制备方法，其中，乌苯美司中间体在还原羰基和 脱保护的两个步骤中都用到钯炭氢化反应，而两次的氢化反应容易产生过度氢化杂质：
在后续加盐酸溶解，然后滴加氨水调pH值析晶的过程中，该杂质无 法被有效的除掉。因此，如果氢化反应失控，造成过度氢化杂质偏大，则无法得到质量合格 的乌苯美司。此外，US4281180公开了采用酸碱调pH值析晶的方式得到乌苯美司a、0晶型。
[0005] US4786754进一步指出0晶型具有吸湿性，会在空气中吸收水分变成二水合物a晶 型。而晶型不稳定，会转变成稳定的Y晶型。虽然该专利阐述了直接加热或在溶剂中加 热转晶型的工艺，但该工艺中未公开将乌苯美司溶解，再重新析出T晶型的详细过程，因此 产品可能出现混晶，即产品均一性和最终产品的质量无法得到保证。
[0006] 中国专利201410784653.3也公开了一种新的乌苯美司合成工艺，为了解决上述问 题，该专利避开了氢化反应步骤，采用二碳酸二叔丁酯反应来保护氨基和羧基，然后用酸碱 体系脱保护，最后再调pH值析晶，得到乌苯美司。该工艺虽然避开了氢化反应，但是需要先 用酸脱氨基上的保护，再用碱脱羧基上的保护，最后再调pH值析晶。整个操作工艺比较复 杂，同时在用碱脱羧基上的保护时可能会有酰胺键断裂的副反应，从而影响产品质量。
[0007] 中国专利201010124132.7公开了一种乌苯美司的制备方法，包括以苯乙酮为原 料，依次经溴化、氨基化、乙酰化、羟醛缩合、氢化还原、拆分、去乙酰化、氨基保护、酰胺缩合 和脱保护反应制得乌苯美司。该专利讲述了采用L-赖氨酸做拆分剂的优点，但拆分步骤的 结晶时间就需要耗时24小时以上，且拆分后的粗品还需要至少两次重结晶才能达到目标纯 度。并且该专利在酰胺缩合步骤时用EDCI作为缩合剂，该缩合剂价格较贵，不利于工业化生 产。
[0008] 因此，本领域仍然需要一种操作简单，成本更低，保护环境，又能够有效地除去工 艺过程中可能产生的杂质，确保产品质量的制备方法，本发明符合这种需求。
【发明内容】
[0009] 本申请通过对乌苯美司工艺进行了深入研究和分析，提供了一种乌苯美司的精制 方法，能够获得高纯度的乌苯美司。
[0010] 本申请提供了一种高纯度乌苯美司的制备方法，该制备方法包括以下步骤：
[0011] (1)将乌苯美司粗品加入到水和其他有机溶剂的混合溶液中，加热搅拌溶解；
[0012] (2)溶解后，降温析晶；
[0013] (3)将步骤(2)所得溶液抽滤；
[0014] (4)将步骤(3)所得的滤饼在真空烘干，即得乌苯美司终产品。
[0015] 其中，步骤⑴中的有机溶剂优选甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、四氢呋喃或乙腈;特别 优选乙醇或异丙醇。
[0016] 其中，步骤(1)中的水与有机溶剂的体积比为1: (0.33~9);优选1:(1~9)。
[0017] 其中，步骤（1)中的乌苯美司粗品与混合溶液的质量体积比为1: (30~120);优选 1:(40~100)。
[0018] 与现有技术相比，采用本申请方法制备的乌苯美司具有如下优点：
[0019] 1、通过本申请制备方法的参数控制，可以显著提高乌苯美司的收率和纯度，产品 纯度高（纯度彡99.80%，最大单杂<0.15 %，最优条件下可达到最大单杂仅为0.07 % )，而 对比例1制备的产品纯度99.10%，最大单杂0.45% ;因此，采用本申请的制备方法能够解决 现有技术中过度氢化后杂质难以去除的问题，实现对工艺过程中过度氢化杂质进行有效控 制，更好地确保产品质量。
[0020] 2、本申请的制备方法操作简单，所用溶剂均为常规溶剂，使用单一重结晶方法，重 现性好，所用溶剂可回收利用，能够有效降低试剂成本，无需使用昂贵试剂，节约能源，有利 于保护环境，便于生产操作，且能够一次性达到质量要求，更适合工业化大规模生产高纯度 的乌苯美司。而对比例2的工艺虽然避开了氢化反应，但是需要先用酸脱氨基上的保护，再 用碱脱羧基上的保护，最后再调pH值析晶。整个操作工艺比较复杂，同时在用碱脱羧基上的 保护时可能会有酰胺键断裂的副反应，产品纯度略高于对比文件1，但仍然低于本申请产品 质量。
【具体实施方式】
[0021] 以下结合实施例对本发明作进一步的详细描述，但并非对本发明的限制，凡依照 本发明公开内容所作的任何本领域的等同替换，均属于本发明的保护范围。
[0022] 本申请产品纯度的测定采用以下方法(乌苯美司日本药典JP16版）：
[0023] 取乌苯美司30mg加流动相A溶解稀释至10mL，作为供试品溶液;移取供试品溶液 2mL，用流动相稀释至200mL，作为对照溶液。分别吸取上述溶液按照液相色谱法进样20此， 通过自动积分确定样品溶液中各色谱峰面积:样品溶液中所显杂质峰面积不得大于对照溶 液主峰面积的0.5倍(0.5%);样品溶液中所有杂质峰面积的总和不得大于对照溶液主峰面 积(1.0%) 〇
[0024] 色谱条件如下：
[0025] UV 波长：220nm
[0026] 色谱柱：C18,4.6mm X 25cm X5wn [0027]柱温：25°C
[0028] 流动相A:磷酸盐缓冲液(取0.1M磷酸二氢钾TS13ml，加水稀释至20ml):乙腈= 17: 3
[0029] 流动相B:磷酸盐缓冲液(取0.1M磷酸二氢钾TS13ml，加水稀释至20ml):乙腈=1:2 [0030]梯度洗脱条件：
[0032] 流速:调整流速使乌苯美司出峰时间约为14min;
[0033]洗脱时间：约为乌苯美司保留时间的5倍。
[0034]实施例1:乌苯美司的制备方法
[0035] 将40.0g乌苯美司粗品投入到1600mL乙醇和水的混合溶液中（水：乙醇体积比=1: 1)，搅拌均匀。然后加热到内温80 °C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，勾速降温至6°C，保温 搅拌30min后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重33.0g，收率为82.5%，纯度为99.82%，最 大单杂:0.12%。
[0036]实施例2:乌苯美司的制备方法
[0037] 将lO.Og乌苯美司粗品投入至lj600mL乙醇水溶液(水：乙醇体积比=1:1)中，搅拌均 匀。然后加热到内温78°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至8°C，保温搅拌30min 后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重7.75g，收率为77.5 %，纯度为99.82%，最大单杂： 0.11%〇
[0038]实施例3:乌苯美司的制备方法
[0039] 将10.0g乌苯美司粗品投入到1000mL乙醇水溶液(水：乙醇体积比=1:1)中，搅拌 均匀。然后加热到内温75°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，勾速降温至8°C，保温搅拌 30min后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重5.42g，收率为54.2%，纯度为99.83%，最大单 杂:0?〇
[0040]实施例4:乌苯美司的制备方法
[00411 将5.0g乌苯美司粗品投入到200mL乙醇水溶液(水：乙醇体积比=1: 3)中，搅拌均 匀。然后加热到内温77°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至5°C，保温搅拌30min 后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重3.97g，收率为79.4%，纯度为99.87%，最大单杂： 0.08%0
[0042]实施例5:乌苯美司的制备方法
[0043] 将5.0g乌苯美司粗品投入到300mL乙醇水溶液(水：乙醇体积比=1: 3)中，搅拌均 匀。然后加热到内温78°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至9°C，保温搅拌30min 后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重3.40g，收率为68.0 %，纯度为99.89%，最大单杂： 0.07%〇
[0044]实施例6:乌苯美司的制备方法
[0045] 将5.0g乌苯美司粗品投入到300mL乙醇水溶液(水：乙醇体积比=1:6)中，搅拌均 匀。然后加热到内温79°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至7°C，保温搅拌30min 后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重3.59g，收率为71.8%，纯度为99.81 %，最大单杂： 0.10%〇
[0046]实施例7:乌苯美司的制备方法
[0047]将5.0g乌苯美司粗品投入到500mL乙醇水溶液(水：乙醇体积比=1:6)中，搅拌均 匀。然后加热到内温76°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至7°C，保温搅拌30min 后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重2.79g，收率为55.8%，纯度为99.84%，最大单杂： 0.08%〇
[0048]实施例8:乌苯美司的制备方法
[0049] 将5.0g乌苯美司粗品投入到600mL乙醇水溶液(水：乙醇体积比=1:9)中，搅拌均 匀。然后加热到内温79°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至5°C，保温搅拌30min 后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重2.67g，收率为53.4%，纯度为99.86%，最大单杂： 0.11%〇
[0050]实施例9:乌苯美司的制备方法
[00511 将5.0g乌苯美司粗品投入到250mL乙醇水溶液(水：乙醇体积比=1:0.33)中，搅拌 均匀。然后加热到内温79°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，勾速降温至8°C，保温搅拌 30min后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重3.38g，收率为67.6%，纯度为99.81 %，最大单 杂:0.14%0
[0052]实施例10:乌苯美司的制备方法
[0053] 将lO.Og乌苯美司粗品投入至_0mL甲醇水溶液(水：甲醇体积比= 1:1)中，搅拌均 匀。然后加热到内温63°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至9°C，保温搅拌30min 后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重6.35g，收率为63.5 %，纯度为99.84%，最大单杂： 0.11%〇
[0054]实施例11:乌苯美司的制备方法
[0055] 将10.0g乌苯美司粗品投入到400mL异丙醇水溶液(水:异丙醇体积比=1:1)中，搅 拌均匀。然后加热到内温83°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至6°C，保温搅拌 30min后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重8.51g，收率为85.1 %，纯度为99.81 %，最大单 杂:0.14%〇
[0056]实施例12:乌苯美司的制备方法
[0057] 将10.0g乌苯美司粗品投入至lj600mL异丙醇水溶液(水:异丙醇体积比=1:1)中，搅 拌均匀。然后加热到内温src，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至s°c，保温搅拌 30min后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重7.83g，收率为78.3%，纯度为99.80%，最大单 杂:0.13%〇
[0058]实施例13:乌苯美司的制备方法
[0059] 将5.0g乌苯美司粗品投入到350mL异丙醇水溶液(水:异丙醇体积比= 1:3)中，搅 拌均匀。然后加热到内温82°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至6°C，保温搅拌 30min后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重3.88g，收率为77.6%，纯度为99.82%，最大单 杂:0?〇
[0060]实施例14:乌苯美司的制备方法
[0061 ] 将10.0g乌苯美司粗品投入到750mL丙酮水溶液(水:丙酮体积比=1:1)中，搅拌均 匀。然后加热到内温58°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至9°C，保温搅拌30min 后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重5.19g，收率为51.9%，纯度为99.81 %，最大单杂： 0.15%〇
[0062]实施例15:乌苯美司的制备方法
[0063]将5.0g乌苯美司粗品投入到150mL四氢呋喃水溶液（水：四氢呋喃体积比=1:1) 中，搅拌均匀。然后加热到内温65°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至6°C，保温 搅拌30min后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重3.09g，收率为61.8%，纯度为99.83%，最 大单杂:0.11%。
[0064]实施例16:乌苯美司的制备方法
[0065]将5.0g乌苯美司粗品投入到300mL乙腈水溶液(水：乙腈体积比=1:1)中，搅拌均 匀。然后加热到内温82°C，保温搅拌至固体全溶。停止加热，匀速降温至8°C，保温搅拌30min 后抽滤，滤饼于60°C真空烘干，得干重3.26g，收率为65.2%，纯度为99.81 %，最大单杂： 0.13%〇
[0066]对比例1:按照专利US4281180实施例19公开的方法制备
[0067] 将（2S，3R)-3-苄氧羰基氨基-2-羟基-4-苯基丁酸_(S)_亮氨酸苄酯（lO.Og， 18.8mmol)溶解在167mL，95 %的醋酸中，用钯碳氢化，2~3小时催化氢化还原反应完全。过 滤钯碳，滤液减压浓缩干。浓缩物中加入100mL丙酮打浆析晶，然后过滤。滤饼用1N盐酸溶 解，然后加入l.〇g活性炭，搅拌，再将不溶物过滤。滤液用稀氨水调pH至5-6,将析出晶体过 滤，并用丙酮淋洗。滤饼真空干燥，得到乌苯美司4.66g，收率为80.5%，纯度为99.10 %，最 大单杂:0.45%。
[0068] 对比例2:按照中国专利201410784653.3实施例3公开的制备 [0069] 在500mL三口瓶中加入32.5g中间体（S-2-[(2S，3R)-3-叔丁氧羰氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸叔丁酯），200mL水和100mL乙醇，加入7mL浓盐酸调节后加 热至40°C搅拌3小时，体系冰浴下降温至4°C，缓慢滴加lmol/L的氢氧化钠水溶液15mL，室温 下搅拌2小时，TLC检测反应完全，调pH至6,60°C下减压浓缩除去大部分乙醇，用lmol/L的稀 盐酸调pH至1，加入少量活性炭搅拌1小时后过滤，滤液冰浴下用稀氨水调pH至7,滤出结晶， 丙酮洗涤后干燥得到乌苯美司成品。外观：白色结晶粉末，纯度99.5%。
[0070]质量对比实验：
[0071 ]将本申请实施例中结果较好的1、2、4、5、6、11、12和13制得的乌苯美司与对比例1、 2公开的制备方法制得的产品通过HPLC面积归一法测定纯度、最大单杂，对比结果如下：
[0072]
[0073] 通过上述对比试验可以看出，采用本申请技术方案，较现有技术相比能获得更高 纯度的产品，制备方法简单，便于生产操作，便于质量控制，较现有技术具有明显进步。
[0074] 对于本领域的普通技术人员而言明显的是，在不偏离本发明精神或者范围的情况 下，可对本申请的精制方法进行的多种修饰和变化，因此，本发明的保护范围涵盖了对本发 明进行的各种修饰和变化，只要所述修饰或变化处于权利要求和其等同实施方式所涵盖的 范围内。
【主权项】
1. 一种高纯度乌苯美司的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 将乌苯美司粗品加入到水和其他有机溶剂的混合溶液中，加热搅拌溶解； (2) 溶解后，降温析晶； (3) 将步骤(2)所得溶液抽滤； (4) 将步骤(3)所得的滤饼真空烘干，即得乌苯美司终产品。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，其中，步骤1所用的有机溶剂选自甲 醇、乙醇、异丙醇、丙酮、四氢咲喃或乙臆。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，其中，步骤1所用的有机溶剂选自乙醇 或异丙醇。4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，其中，步骤1中水与有机溶剂的体积比 为 1:(0.33 ~9)。5. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，其中，步骤1中水与有机溶剂的体积比 为 1:(1 ~9)。6. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中乌苯美司粗品与水和有机溶 剂的混合溶液的质量体积比为1: (30~120)。7. 根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤1中乌苯美司粗品与水和有机溶 剂的混合溶液的质量体积比为1: (40~100)。8. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 将40.0g乌苯美司粗品投入到800mL乙醇和800mL水的混合溶液中，搅拌均匀，然后 加热到内温80°C，保温搅拌至固体全溶； (2) 停止加热，匀速降温至6 °C，保温搅拌30min; (3) 将步骤(2)所得溶液抽滤； (4) 将步骤（3)所得的滤饼于60°C真空烘干，得干重33.0g，收率为82.5%，纯度为 99.82%，最大单杂:0.12%。9. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 将5.0g乌苯美司粗品投入到225mL乙醇和75mL水的混合溶液中，搅拌均匀，然后加 热到内温78°C，保温搅拌至固体全溶； (2) 停止加热，匀速降温至9 °C，保温搅拌30min; (3) 将步骤(2)所得溶液抽滤； (4) 将步骤（3)所得的滤饼于60°C真空烘干，得干重3.40g，收率为68.0%，纯度为 99.89%，最大单杂：0.07%。
【文档编号】C07C231/24GK105968026SQ201610621722
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年8月1日
【发明人】王颖, 李晓迅, 卢铁刚, 刘时奎
【申请人】四川青木制药有限公司