酰基哌嗪类化合物及其制备方法和用图
【专利摘要】本发明属于生物医药技术领域，涉及酰基哌嗪类化合物及其制备方法和应用，化学式为：其中，X选自化学键或-NR1-；Y选自化学键或-NR1-或-CR2R3-；A选自芳基或杂芳基；L选自芳基或杂芳基，G选自杂芳基；R1选自氢原子、烷基；R2、R3各自独立选自氢原子、烷基；R4选自氢原子、卤素、羟基、氰基、硝基、烷氧基、烷基、环烷基、-C(O)NR2R3、芳基或杂芳基，其合成工艺简单，操作方便，合成的化合物凝血酶受体拮抗活性强，适用于治疗血小板聚集导致的心肌梗死和脑栓塞等心脏疾病中。
【专利说明】
酰基哌嗪类化合物及其制备方法和用途
技术领域：
[0001] 本发明属于生物医药技术领域，涉及一类凝血酶受体拮抗剂化合物及其制备方 法，特别是酰基哌嗪类化合物及其制备方法和应用，该类化合物适用于治疗血小板聚集导 致的心肌梗死和脑栓塞等心脏疾病中。
【背景技术】：
[0002] 血栓性疾病是临床常见的心血管疾病，主要包括脑血管栓塞、心脏血管内壁血栓 形成、肺栓塞、和外周动脉血栓栓塞等，对人类的生命和健康有严重的危害。血栓性疾病由 血栓形成(Thrombosis)和血栓栓塞(Thromboembolism)两种病理所引起，其中血栓形成是 指因某些诱因，血液中有形成分在血管内形成异常的血凝块，堵塞血管，从而使得相应部位 的血液供应出现障碍的过程，是遗传和环境因素相互作用、相互影响的变化过程;血栓栓塞 是指脱落的血栓在随着血液流动的过程中堵塞一些血管，造成相应组织或器官缺血、缺氧、 淤血以及水肿的病理过程。血栓性疾病的发病机理与凝血、纤溶系统、血小板等有重要关 系。
[0003] 目前，抗血栓药按其作用机制的不同，可分为抗凝血药物、溶血栓药物和抗血小板 类药物三类，其中，抗血小板药物通过抑制血小板的粘附、聚集和释放功能来防止血栓形 成，血小板表面有许多不同受体，这些受体与相应的配体结合即可被激活，这些受体主要包 括二磷酸腺苷（Adenosine diphosphate，ADP)受体、血检烧A2(Thromboxane A2，TXA2)受 体、凝血酶(Thrombin)受体等，目前常用的抗血小板药物有阿司匹林和波立维。
[0004] 凝血酶是非活性凝血酶原在Xa因子的作用下通过蛋白裂解的方式产生的一种丝 氨酸蛋白酶，作用于凝血级联的末端，对血栓的形成起着关键的作用，凝血酶通过激活凝血 酶受体（Thrombin receptor)而使血小板聚集，凝血酶受体也被称为蛋白酶激活受体-1 (Protease activated receptor-1，PAR_1)，蛋白酶激活受体(PAR)属于G蛋白偶联受体，共 有四个亚型:PAR-1、PAR-2、PAR-3和PAR-4，其中除PAR-2是胰蛋白酶受体外，其余三个都是 凝血酶受体，PAR在人体的分布有着明显的组织特异性，人体血小板只表达PAR-1和PAR-4受 体，并且PAR-1受体起着主要的作用，PAR-1受体在更低浓度的凝血酶存在的情况下就能发 挥其激活血小板聚集的作用，且血小板聚集的反应速度更快。
[0005] Vorapaxar(SCH 530348)是2014年在美国上市的新型凝血酶受体拮抗剂，用于治 疗有心脏病发作史但无短暂脑缺血发作史或中风史的心血管疾病患者。临床I期和II期研 究结果表明，Vorapaxar可以明显抑制血小板的聚集，且不影响健康受试者的出血时间，与 阿司匹林、氯吡格雷联合使用时不会增加出血风险，而后又对Vorapaxar进行了两个大型 π I期临床试验。结果发现，心血管病患者服用Vorapaxar有一定的效果，心肌梗死或脑血栓 等疾病的发生率明显降低。Atopaxar又名E5555,是Eisai研发的PAR-1拮抗剂，I期临床研究 结果表明，E5555可以明显地抑制血小板的聚集并且耐受性良好，同时不影响ADP诱导的血 小板的聚集、正常的出血和凝血时间，E5555进行了双盲、安慰剂对照的II期临床实验，结果 表明，该化合物并未增加出血风险，并且所有剂量测试均表明它能够抑制血小板聚集。 F16618是由法国Pierre Fabre研究所研发出的凝血酶受体拮抗剂。F16618可以抑制血小板 的聚集，这种作用具有浓度依赖性和竞争性。F16618半衰期较短，生物利用度高，从血小板 功能分析仪PAF-100的分析结果得出，在20μΜ浓度下，F16618对血小板的聚集抑制率为 49% 〇
【发明内容】
：
[0006] 本发明的目的在于克服现有技术存在的缺点，寻求设计提供一类新型的具有凝血 酶受体(PAR-1)拮抗活性的酰基哌嗪化合物及其制备方法和其在心脑血管疾病药物中的用 途。
[0007] 为了实现上述目的，本发明涉及的酰基哌嗪类化合物的化学式为：
[0009 ]其中，X选自化学键或-NR1-; Υ选自化学键或-NR1-或-CR2R3_; Α选自芳基或杂芳基； L选自芳基或杂芳基，该芳基或杂芳基可以任选有一个或多个R4取代基;G选自杂芳基;R1选 自氢原子、烷基;R 2、R3各自独立选自氢原子、烷基;R2、R3可以任选与相连接的碳原子一起形 成环烷基;R 4选自氣原子、卤素、羟基、氛基、硝基、烷氧基、烷基、环烷基、-C( 0 )NR2R3、芳基或 杂芳基，其中所述的烷氧基、烷基、环烷基、芳基或杂芳基能够被一个或多个选自卤素、羟 基、氛基、硝基、烷氧基、烷基、环烷基、芳基、杂芳基的取代基所取代。
[0010] 本发明涉及通式（I)化合物或其可药用的盐，或含有它们的药物组合物能够用于 制备血小板凝集抑制剂。
[0011] 本发明涉及通式（I)化合物或其可药用的盐，或含有它们的药物组合物能够用于 制备治疗与凝血酶受体有关的疾病的药物中，其中所述的与凝血酶受体有关的疾病包括血 栓症、血管再狭窄、深部静脉血栓症、肺栓塞症、脑梗塞、心脏疾病、高血压已及恶性肿瘤。
[0012] 本发明涉及通式（I)化合物或其可药用的盐，或含有它们的药物组合物能够作为 抑制钙离子转运的药物。
[0013] 本发明涉及通式（I)化合物或其可药用的盐，或含有它们的药物组合物能够作为 抑制凝血酶受体的药物，其中所述凝血酶受体为PAR-1受体。
[0014] 本发明所述〃烷基〃指饱和的脂族烃基团，包括1至20个碳原子的直链和支链基团， 优选含有1至12个碳原子的烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、 异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1_二甲基丙基、1，2_二甲基丙基、2,2_二甲基丙基、1-乙 基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2_三甲基丙基、1，1_二 甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2,2_二甲基丁基、1，3_二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、 3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3_二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、 5-甲基己基、2，3_二甲基戊基、2，4_二甲基戊基、2，2_二甲基戊基、3，3_二甲基戊基、2_乙基 戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3_二甲基己基、2,4_二甲基己基、2,5_二甲基己基、2,2_二甲 基己基、3,3_二甲基己基、4,4_二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基- 2-乙基戊基、2-甲基乙基戊基、正壬基、2-甲基乙基己基、2 -甲基乙基己基、2，2-二乙基戊基、正癸基、3,3_二乙基己基、2,2_二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的 是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁 基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1_二甲基丙基、1，2_二甲基丙基、2,2_二甲基丙基、 1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2_三甲基丙基、1， 1-二甲基丁基、1，2_二甲基丁基、2,2_二甲基丁基、1，3_二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊 基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3_二甲基丁基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代 时，取代基能在任何可使用的连接点上被取代。
[0015] 本发明所述〃环烷基〃指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包括3至 20个碳原子，优选包括3至12个碳原子，更优选环烷基环包含3至10个碳原子。单环环烷基的 非限制性实施例包含环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环 庚基、环庚三烯基、环辛基等。
[0016] 本发明所述〃芳基〃指6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的 环)基团，
[0017] 本发明所述具有共辄的π电子体系的多环（即其带有相邻对碳原子的环)基团，优 选为6至10元，例如苯基和萘基，所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中 与母体结构连接在一起的环为芳基环，包含：
[0019] 本发明所述芳基可以是取代的或未取代的。
[0020] 本发明所述〃杂芳基〃指包含1至4个杂原子，5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂 原子包括氧、硫和氮，优选为6至10元;杂芳基优选为是5元或6元，例如咲喃基、噻吩基、P比啶 基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等;所述杂芳基环可以稠合于芳 基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，包含：
[0022] 本发明所述杂芳基可以是任选取代的或未取代的。
[0023] 本发明所述〃烷氧基〃指-0-(烷基)和-0-(未取代的环烷基），其中烷基的定义如上 所述，包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等;烷 氧基可以是任选取代的或未取代的。
[0024]本发明所述〃羟基〃指-OH基团。
[0025]本发明所述〃卤素〃指氟、氯、溴或碘。
[0026] 本发明所述"氨基"指-NH2。
[0027] 本发明所述〃氰基〃指-CN。 [0028]本发明所述〃硝基〃指-N〇2。
[0029] 本发明的典型化合物包括：
[0030]
[0031]
[0032] 本发明的通式（I)表示的化合物或其立体异构体、互变异构体、前药或药学上可接 受的盐或溶剂化物的同位素取代物，其中任何一个化合物中可以存在至少一个氢原子被氘 原子取代。
[0033] 本发明涉及通式(I)所示化合物的制备过程由下面通式所示：
[0034]
[0035] 羧酸1与哌嗪2在常用的酰胺化反应条件下发生反应生成酰胺3。中间体3与硼酸试 剂4在常用的Suzuki偶联反应条件下进行偶联反应，生成通式（I)化合物;或由下面通式所 示：
[0037]化合物la在碱，例如氢化钠或双(三甲基硅烷基)氨基锂，的作用下与烷基化试剂， 例如碘甲烷或1，4-二溴丁烷或1，5-二溴戊烷，发生一烷基化或二烷基化或环化反应生成通 式(I)化合物;或下面通式所示：
[0039]中间体3与胺试剂6在Buchwald胺化反应条件下进行反应，生成通式lb化合物，化 合物lb进一步在碱，例如氢化钠，的作用下与烷基化试剂，例如碘甲烷，发生烷基化反应生 成通式Ic化合物；
[0041]胺试剂7在碱，例如三乙胺，作用下与三光气反应生成异氰酸酯8,异氰酸酯8在碱， 例如三乙胺，作用下与哌嗪2发生反应生成中间体9。中间体9与硼酸试剂进行Suzuki偶联反 应，生成通式Id化合物;化合物Id能进一步在碱，例如氢化钠，的作用下与烷基化试剂，例如 碘甲烷，发生烷基化反应生成通式I e化合物。
[0042] 本发明与现有技术相比，其合成工艺简单，操作方便，合成的化合物凝血酶受体拮 抗活性强，适用于治疗血小板聚集导致的心肌梗死和脑栓塞等心脏疾病中。
【具体实施方式】：
[0043] 下面通过具体实例对本发明作进一步说明。
[0044] 实施例1:3，-[2-0x0-2-(4-pyridin-2-yl-piperazin-1-yl)-ethyl ]-biphenyl- 2-carbonitrile，l-[3-(4-(2-吡啶)哌嗪-2-乙酮)苯基]-2-苯腈 1-001，的合成 [0046] 本实施例制备1-001的具体过程为：
[0047] 第一步：在250mL圆底烧瓶中，将3-溴苯乙酸（2.15g，10.0mmol)溶于二氯甲烷 (40mL)中，依次加入H0BT(1.42g，10.5mmol)，EDCI(2.01g，10.5mmol)，DIEA(2.61mL， 15mmo 1)和1 -(2-吡啶基)哌嗪（1.71 g，10.5mmo 1)，常温下搅拌反应20小时。反应液经二氯甲 烧(80mL)稀释后，用氢氧化钠溶液（lmo 1/L，3 X 1 OOmL)洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥过夜 后过滤;减压浓缩后，剩余物快速柱层析分离(MeOH/CH2Cl 2，3 % )，得到白色粉末状化合物7 (3.02g，83.8%):1H NMR(CDC13,600MHz)S8.11((1, lH)，7.42(t，lH)，7.36(s，lH)，7·31(ι?， lH)，7.13(m，2H)，6.59(t，lH)，6.56(d，lH)，3.70(t，2H)，3.67(s，2H)，3.50(t，2H)，3.43(m, 4H)；MS(APCI)calcd for Ci7Hi8BrN30(M+H+) :360.06.Found:360.38；
[0048] 第二步：将化合物7(216mg，0 · 6mmol)溶于混合溶剂（甲苯/乙醇/水= 4mL: 2mL: lmL)中，依次加入四（三苯基膦）钯（34 · 7mg，5 %mol)，碳酸钾（248 · 8mg，1 · 8mmo 1)和2-氰基 苯硼酸（13 2mg，0.9mmo 1)，120 °C搅拌反应12小时。反应液冷却到室温，用二氯甲烷（3 X 20mL)萃取，合并有机相经无水硫酸钠干燥过夜后过滤，减压浓缩;剩余物快速柱层析分离 (乙酸乙酯/石油醚，2/1)，得到1-001(无色油状物，18811^，82%) :1!1匪1?(00(：13,6001〇^)5 8.17(d,lH),7.76(d,lH),7.69-7.63(m,2H),7.56-7.42(m,5H),7.39(d,1H),6.64(t,lH), 6.61(d,1H)，3.87(s，2H)，3.79-3.45(m，8H);MS(APCI)calcd for C24H22N4〇(M+H+): 383.18.Found :383.33。
[0049]下列化合物的合成与1-001的合成类似，在第二步以4-氰基苯硼酸替换2-氰基苯 硼酸：
[0051 ] 1-003(无色油状物，3，-[2-0叉0-2-(4-卩}^1(1;[11-2-：71-卩1卩6抑2；[11-1-：71)-61:1171]- biphenyl-4-carbonitrile) l-[3-(4-(2_P比啶）哌嗪_2_乙酮）苯基]_4_苯臆:4 NMR(CDCl3， 600MHz)58.18(d,lH),7.76-7.66(m,4H),7.55(t,lH),7.51-7.43(m,3H),7.33(d,lH),6.66 (t,lH),6.63(d,lH),3.86(s,2H),3.79-3.63(m,4H),3.51-3.49(m,4H)；MS(APCI)calcd for C24H22N40(M+H+) : 383.18. Found: 383.30.
[0052]下列化合物的合成与1-001的合成类似，在第一步以3-溴苯甲酸替换3-溴苯乙酸， 在第二步以4-氰基苯硼酸替换2-氰基苯硼酸：
[0054] 1-114
[0055] (3,-(4-Pyridin-2-yl-piperazine-1-carbonyl)-biphenyl-4-carbonitrile)1-[3-(4-(2-吡啶）哌嗪-1-酮)苯基]-4-苯腈:? NMR(DMS0-d6,400MHz，23°CM8.14-8.12(dd， 1H，H-6_CH of Py)，7.95(s，4H，4XCH of Ph)，7.88-7.86(m，lH，CH of Ph)，7.82-7.81(t， 1H，CH of Ph)，7.64-7.51(m，3H，2XCH of Ph and CH of Py)，6.86-6.84(d，lH，H-3-CH of Py)，6.69-6.66(m，lH，H-5-CH of Py)，3.76(m，2H，CH2NC0)，3.62-3.34(m，6H，3XCH2N); MS(ES-API)calcd for C23H2〇N4〇(M+H+) :369.43.Found:369.2.
[0056] 实施例2:2-(3，-Methoxy-biphenyl-4-yl )-1-(4-pyridin-2-yl-piperazin-1-yl)-propan-l_one ,2-(4-( 3-甲氧基苯基））-1-(4-( 2-吡啶)哌嗪)-1-丙酮，1-131，的合成
[0058] 本实施例的具体制备过程为:在单口支管反应瓶中，氮气置换，取氢化钠(400mg， 1. Ommo 1)置于DMF中，0°C下搅拌10min后，加入化合物I_071(77mg，0.2mmo 1)，继续搅拌1 h， 然后加入碘甲烧(498yL，0.8mmol)，10min后移除冰浴，恢复至室温反应3h。反应液经饱和氯 化铵溶液稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，依次用水(20mL X 3)、饱和食盐水(20mL X 3)洗， 有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，剩余物快速柱层析分离得到白色粉末状化合物 I-131(110mg,88% ,
[0059] 2_(3，-Methoxy-biphenyl-4-y1)-1-(4-pyridin-2-yl-piperazin_l-yl)-口『(^&11-1-〇116)2-(4-(3-甲氧基苯基））-1-(4-(2-吡啶）哌嗪）-1-丙酮 ：1!1匪1?(0)(：13， 400MHz)58.17(d,lH,H-6-CH of Py),7.57-7.55(d,2H,H-2-CH of Py),7.49-7.45(t,1H, CH of Ph) ,7.37-7.34(m,3H,3XCH of Ph) ,7.18-7.16(d, 1H,CH ofPh) ,7.12(s , 1H,CH ofPh),6·91-6·89(d，lH，H-3-CH ofPy),6.65-6.62(t，lH，H-5-CH ofPy),6.60-6.58((1,1H, CH of Ph)，4.01-3.96(m，lH，CHC0)，3.88(s，3H，CH30)，3.68-3.05(m，8H，4XCH2N) ,1.54-1.52 (d, 3H, CH3) ；MS(APCI) calcd for C25H27N3O2 (M+H+ ):402.2 lFound :402.2.
[0060] 实施例3:
[0061 ] 2-(3'-Methoxy-biphenyl-4-yl)-2-methyl-1-(4-pyridin-2-yl-piperazin-1- yl)-propan-1-〇ne, 2-甲基-2-(4-( 3-甲氧基苯基））-1-(4-( 2-P 比啶）哌嗪）-1-丙酮，1-132， 的合成：
[0063] 在单口支管反应瓶中，氮气置换，加入双(三甲基硅烷基)氨基锂(0 · 8mL，0 · 8mmo 1， 1M己烧溶液)溶于THF中，0 °C下搅拌1 Omin后，加入化合物I-071 (77mg，0.2mmo 1)，继续搅拌 lh，然后加入鹏甲每（1.2mL，2mmol)，lOmin后移除冰浴，恢复至室温反应3h。；乙酸乙醋稀释 后依次用水(20mL X 3)、饱和食盐水(20mL X 3)洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓 缩，剩余物快速柱层析分离得到白色粉末状化合物1-132(10811^，85%，2-(3'-]\^1:11(?7-biphenyl-4-yl)-2-methyl-1-(4-pyridin-2-yl-piperazin_l-yl)-propan_l-〇ne)2-甲 基-2-(4-(3-甲氧基苯基））-1-(4-(2-吡啶）哌嗪）-1-丙酮 ^HNMI^CDChdOOMHzJSrW 8.15-8.14(d，lH，H-6-CH ofPy)，7.61-7.59(d，2H，H-2-CH of Ph)，7.47-7.44(t，lH，CH of Py) ,7.39-7.33(m,2H,2XCH ofPh), 7.28(s , 1H, CH ofPh), 7.21-7.19(d, 1H,CH of Ph), 7.14(m,lH,CH of Ph),6.64-6.61(t,lH,H-3-CH of Py),6.57-6.54(d,lH,H-5-CH ofPy), 3.89(s,3H,CH30) ,3.34(m,8H,4XCH2N) , 1.62 (s , 6H, 2 X CH3) ；MS(APCI )calcd for C26H29N3O2 (M+H+): 416.23Found: 416.2.
[0064] 实施例 4: 2-[3-( 4_Pyr id in_2-yl-piperazine-1-carbonyl)-phenyl ami no]-匕61^〇11；[1：1'；[16，1-(3-(4-(2-吡啶)哌嗪-1-酮)苯胺基)-2-苯腈1-165，的合成
[0066]起始物1的合成与示例1，I-001的合成第一步类似，以3-溴苯甲酸替换3-溴苯乙 酸。
[0067]将单口带支管茄形瓶用仏置换3次，加入化合物1 (104mg，0 · 3mmol)和化合物7 (39mg，0.33mmol)，用叔丁醇（1 . 5mL)溶解。再加入三（二亚苄基丙酮）二钯（14mg， 0 · 015mmol)、2-环己基磷-2，4，6_三异丙基联苯（14mg，0 · 03mmol)和无水碳酸钾（166mg， 1.2mmo 1)，常温搅拌后，升温至90°C搅拌反应20h，然后用二氯甲烷稀释，水洗，合并有机 相;有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得粗产物，粗产物快速柱层析分离得到淡黄 色粉末状化合物1-165
[0068] (31mg,27%)：
[0069] 2-[3-(4-Pyridin-2-yl-piperazine-1-carbonyl)-phenylamino]-benzonitrilel-(3-(4-(2-吡啶）哌嗪-1-酮)苯胺基)-2-苯腈;4 NMR(CDC13,400MHz，26°C) S8.23-8.21(dd，lH，H-6-CH ofPy)，7.54-7.51(m，2H，CH of Ph and H-4-CH ofPy)，7.45-7.41(m，2H，2XCH ofPh)，7.29-7.24(m，3H，3XCH ofPh)，7.17-7.16(d，lH，H-3-CH ofPy)， 6.95-6.91(t，lH，H-5-CH ofPy)，6.72-6.68(dd，2H，2XCH ofPh)，6.32(s，lH，NH)，3.91(s， 2H，CH2NCO)，3.61(s，6H，CH2rCOand2XCH2N) ;MS(ES-API)calcdforC23H2iN5〇(M+H+): 384.45. Found：384.2.
[0070]实施例 5:2-{Methyl-[3-(4-pyridin-2-yl-piperazine-1-carbonyl )_phenyl ]_ &1]1；[110}-匕6112011；[1：1'；[16，1^-甲基-1-(3-(4-(2-吡啶）哌嗪-1-酮)苯胺基)-2-苯臆，1-168，的 合成
[0072] 在单口带支管茄形瓶中，N2置换3次，加入化合物I-165(54m g，0.14mmol)，DMF (2mL)溶解，冰浴冷却至0°C。然后加入氢化钠(6.8mg，0.28mmol)搅拌反应lOmin，最后加入 碘甲烧(27yL，0.42mmol)，搅拌lOmin后再在室温下搅拌lOmin。加入10mL水淬灭，乙酸乙酯 萃取，再用饱和食盐水洗。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得粗产物，粗产物经快 速柱层析分离得到淡黄色粉末状化合物1-168(3911^，69%) :2-{161:1171-[3-(4171^(1;[11-2-y 1-piperazine-1-carbony 1)-phenyl]-amino}-benzonitrile N_甲基-1-(3-(4-(2_P比啶） 哌嗪-1-酮）苯胺基）-2-苯腈；4 MMR(CDC13，400MHz，29°C )δ8.23-8.22((1，1H，H-6_CH of Py)，7.68-7.65(d，lH，CH of Ph)，7.62-7.58(t，lH，H-4-CH of Py)，7.55-7.50(t，lH，CH of Ph)，7.34-7.28(m，2H，2XCH of Ph)，7.24-7.22(t，lH，C H of Ph)，6.97-6.96(d，lH， H-3-CH of Py)，6.92-6.90(d，2H，2XCH of Ph)，6.70-6.66(m，2H，CH of Ph and H-5-CH of Py)，3.88(s，2H，CH2NC0)，3.59(s，6H，CH2NC0 and 2XCH2N)，3.42(s，3H，CH3);MS(ES-API)calcd for C24H23N5〇(M+H+) :398.47.Found:398.2.
[0073] 实施例6 :4_Pyridin-2-yl-piperazine-1-carboxylic acid(2，-carbamoyl-biphenyl-3-yl)-amide，2-(3-(4-(2-吡啶)哌嗪）甲酰胺基)苯甲酰胺，1-173,的合成
[0075] 3-溴苯胺在三乙胺的作用下与三光气反应生成异氰酸酯1，然后生成的异氰酸酯1 在三乙胺的作用下与哌嗪2反应而生成化合物3;化合物3和2-氰基苯硼酸在实施例1，第二 步反应条件下生成化合物 1-173(4_Pyridin-2-yl-piperazine-1-carboxylic acid(2'-〇&1^&111〇71-131卩1161171-3-：71)-&1111(16)2-(3-(4-(2-[1比啶）哌嗪）甲酰胺基）苯甲酰胺： 1!1匪1? (DMS0-d6，400MHz，30 °C )δ8·15-8·13(dd，1H，H-6-CH ofPy)，7·57-7·40(m，9H，8 X CH ofPh and H-4-CH ofPy)，7.35-7.23(m，2H，NH2)，7.03-7.01(d，lH，NH)，6.89-6.87(d，lH，H-3-CH ofPy)，6.66(t，lH，H-5-CH ofPy)，3.59-3.35(t，8H，4XCH2) ;MS(ES-API)calcd for C23H23N5O2 (M+H+) :402.46. Found :401.9.
[0076] 实施例7:
[0077]本实施例对化合物1-003、1-114、实施例2、3、4制备的酰基哌嗪类化合物的凝血酶 受体(PAR-1)拮抗活性进行测定，测定原理为:在细胞(比如HEK293细胞）内含PAR-1，它可被 TRAP-6(凝血酶受体活性肽-6)激活，从而引发细胞内钙离子的释放，钙离子的释放多少可 通过荧光来测定，加入凝血酶受体拮抗剂会抑制TRAP-6对PAR-1的激活，因此通过荧光方法 测试钙离子的释放量可以测定凝血酶受体拮抗剂对PAR-1的抑制活性，具体实验步骤为： [0078] 将已培养好的基质液以每孔30yL加入96孔透明底黑板中，30min后通过离心除去 基质液，然后用细胞解离液消化HEK293/Gal5/PAR1细胞，以45000细胞/孔来铺板，于温度为 37C、C0 2含量为5%的环境下孵育24h，孵育完成后去除培养基，将配置好的加载染料缓冲液 以每孔100yL的量迅速加入孔中，仍在温度为37C、C0 2含量为5%的环境下避光孵育lh;将实 施例2、3和4制备的目标化合物分别溶于二甲基亚砜，用HBSS缓冲液稀释其浓度为4%，再向 每个孔中加入25yL此稀释液，常温下避光孵育15min;完成孵育后，向每个孔中加入25yL的 TRAP-6,同时将该板置于Flex Station读板机上，此外，还可检测钙流信号，测试结果取三 次测试平均值;PAR-1抑制率计算公式：
[0079] PAR-1的抑制率％ =(空白对照组孔的荧光强度-样品化合物孔的荧光强度)/空白 对照组孔的荧光强度X 100%，测试化合物的半数抑制浓度IC5Q可以通过不同浓度下的抑制 率计算得出，化合物1-003、1-114、实施例2、3和4制备的化合物在在ΙΟμΜ的抑制率分别为 55%、47%、27%、45%和21%。
【主权项】
1. 一种酰基哌嗪类化合物，其特征在于化学式为：其中，X选自化学键或-NR1-; Y选自化学键或-NR1-或-CR2R3-; A选自芳基或杂芳基;L选自 芳基或杂芳基，该芳基或杂芳基能由一个或多个R4取代基;G选自杂芳基;R1选自氢原子、烷 基;R 2、R3各自独立选自氢原子、烷基;R2、R3能与相连接的碳原子一起形成环烷基;R 4选自氢 原子、卤素、羟基、氛基、硝基、烷氧基、烷基、环烷基、-c(o)nr2r 3、芳基或杂芳基，所述的烧氧 基、烷基、环烷基、芳基或杂芳基能够被一个或多个选自卤素、羟基、氰基、硝基、烷氧基、烷 基、环烷基、芳基、杂芳基的取代基所取代。2. 如权利要求1所述酰基哌嗪类化合物的应用，其特征在于所述通式（I)化合物或其可 药用的盐，或含有它们的药物组合物能够用于制备血小板凝集抑制剂。3. 根据权利要求2所述酰基哌嗪类化合物的应用，其特征在于所述通式（I)化合物或其 可药用的盐，或含有它们的药物组合物能够用于制备治疗与凝血酶受体有关的疾病的药物 中，其中所述与凝血酶受体有关的疾病包括血栓症、血管再狭窄、深部静脉血栓症、肺栓塞 症、脑梗塞、心脏疾病、高血压已及恶性肿瘤。4. 根据权利要求2所述酰基哌嗪类化合物的应用，其特征在于所述通式（I)化合物或其 可药用的盐，或含有它们的药物组合物能够作为抑制钙离子转运的药物。5. 根据权利要求2所述酰基哌嗪类化合物的应用，其特征在于所述通式（I)化合物或其 可药用的盐，或含有它们的药物组合物能够作为抑制凝血酶受体的药物，其中所述凝血酶 受体为PAR-1受体。6. 如权利要求2所述酰基哌嗪类化合物的制备方法，其特征在于制备过程由下面通式 所示：或由下面通式所示：
【文档编号】A61K31/496GK105949116SQ201610401989
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年6月8日
【发明人】夏岩, 谭伟强
【申请人】青岛理工大学