一种从白花败酱草中提取制备异牡荆苷的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从白花败酱草中提取制备异牡荆苷的方法，以白花败酱草为原料，结合微波辅助萃取、聚酰胺树脂富集和重结晶，得到纯度大于98％的异牡荆苷，工艺简单，不需要大型的制备型仪器，如制备型高效液相、高速逆流色谱等，解决了仪器设备的限制的问题，不仅大大减少了有毒有害的有机溶剂的用量，且使用的有机溶剂容易回收再利用，成本更低，更经济，使用更简便、安全、环保。
【专利说明】
一种从白花败酱草中提取制备异牡荆苷的方法
技术领域：
[0001] 本发明涉及中药提取精制领域，具体涉及一种一种从白花败酱草中提取制备异牡 荆苷的方法。
【背景技术】：
[0002] 白花败酱草(Patrinia villosa Juss.)为败酱科一年生草本植物，另Ij名苦#公、 苦斋、苦益菜等，我国除西北外，全国均有分布。其始载于《神龙本草经》，后又被《中国药典》 (1977版)收载，具有清热利湿、解毒排脓、活血化瘀、清心安神、促进肝细胞再生、改善肝功 能、增强抑菌和抗病毒等作用。
[0003] 异牡荆苷又名异牡荆素、皂草素等，为淡黄色粉末，是存在于天然植物中的一种黄 酮碳苷类成分，结构稳定，不溶于水，溶于乙醇、甲醇、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂，具有各种 生物活性，如抗氧化、抗病毒等活性。异牡荆苷的结构如下式所示：
[0004]
[0005] 田t丼牡刑甘在医约、貫品、化牧品仃业具有潜在的应用前景，因此在日常科研及 生产过程中，高纯度异牡荆苷的需求也在不断增加。检索国内外文献，关于从白花败酱草分 离提纯异牡荆苷的报道较少，其中专利CN1289470C "白花败酱草中几种高纯度药用物质的 快速制备方法"，采用乙醇提取、有机溶剂萃取、高速逆流色谱分离纯化得到纯度高于 98.0%的异牡荆苷，但由于仪器设备的限制，不利于大生产，而且成本高，使得该方法的应 用有一定的局限性;并且在该工艺流程中用到了大量有毒有害的有机溶剂。因此，寻找一种 简便、安全、环保、经济的提取纯化异牡荆苷的方法是目前需要解决的问题。
【发明内容】
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[0006] 本发明的目的是提供一种从白花败酱草中提取制备异牡荆苷的方法，以白花败酱 草为原料，结合微波辅助萃取、聚酰胺树脂富集和重结晶，得到纯度大于98%的异牡荆苷， 工艺简单，不需要大型的制备型仪器，如制备型高效液相、高速逆流色谱等，不仅大大减少 了有毒有害的有机溶剂的用量，且使用的有机溶剂容易回收再利用，成本更低，更经济，使 用更简便、安全、环保。
[0007] 本发明是通过以下技术方案予以实现的：
[0008] -种从白花败酱草中提取制备异牡荆苷的方法，该方法包括以下步骤：
[0009] 1)微波辅助冷浸提取:将白花败酱药材粉碎，加水润湿后，用微波炉处理5~Smin， 功率为300~500W(瓦），然后加入体积为药材体积的20~30倍的质量分数为70%~95%乙 醇或甲醇间歇搅拌下浸泡24h，过滤，将滤液减压浓缩得浸膏；
[0010] 2)将步骤1)得到的浸膏过聚酰胺柱，先用3~5BV的水洗脱，然后依次用3~5BV的 质量分数为10 %、30 %、40 %、50 %、60 %、70 %乙醇或甲醇梯度洗脱，，流速为3~5BV(柱体 积)/h，当用到质量分数为50 %乙醇或甲醇洗脱液时，流份收集为0.1~0.2BV/瓶，收集质量 分数为50 %和60 %的乙醇或甲醇洗脱液，合并，减压浓缩得异牡荆苷粗品;填柱子时浸膏与 聚酰胺树脂的质量比为1:15~1:20;拌样中浸膏与聚酰胺树脂的质量比为1:1~1:2.5;
[0011] 3)经后处理得到高纯度的异牡荆苷:将步骤2)得到的异牡荆苷粗品用60~HKTC 的甲醇或乙醇或丙酮溶解，滤去残渣后取滤液;往滤液中加乙酸乙酯或二氯甲烷或三氯甲 烷等低溶解性溶剂，继续加热回流，加热温度为60~100°C，取滤液静置结晶，过滤得结晶 物;结晶物重结晶两次得到的产品加入二氯甲烷或三氯甲烷超声振洗5min后，抽滤得到固 体;将所得固体在60°C下真空干燥得到最终产物。
[0012] 本发明具有如下有益效果：
[0013] 本发明结合微波辅助萃取、聚酰胺树脂富集和重结晶，得到纯度大于98%的异牡 荆苷，工艺简单，不需要大型的制备型仪器，如制备型高效液相、高速逆流色谱等，解决了仪 器设备的限制的问题，不仅大大减少了有毒有害的有机溶剂的用量，且使用的有机溶剂容 易回收再利用，成本更低，更经济，使用更简便、安全、环保。
【附图说明】：
[0014] 图1是实施例3的浸膏成分色谱图； 图2是实施例3的重结晶后的异牡荆苷色谱图。
【具体实施方式】： 以下是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
[0015] 实施例1:
[0016]将500g白花败酱药材粉碎，加水润湿后，用型号为EG720FF1-NS的家用微波炉，在 功率为500W处理5min，然后加入体积为药材体积的20倍的质量分数为90%乙醇间歇搅拌下 浸泡24h，过滤，滤液减压浓缩至浸膏，将浸膏过聚酰胺树脂柱富集，填柱子时浸膏与聚酰胺 树脂的质量比为1:15;拌样中浸膏与聚酰胺树脂的质量比为1:1，分别用水、质量分数为 10 %、30 %、40%、50%、60%、70%乙醇洗脱，每个比例用量5BV，流速：5BV/h，将质量分数为 50%和60%乙醇洗脱液中异牡荆苷含量较高的流份合并，减压浓缩得异牡荆苷粗品，得到 的异牡荆苷粗品用60~KKTC丙酮溶解，滤去残渣后取滤液;往滤液中加乙酸乙酯或二氯甲 烷或三氯甲烷等低溶解性溶剂，继续加热回流，加热温度为60~IOO tC，取滤液静置结晶， 过滤得结晶物;结晶物重结晶两次得到的产品加入二氯甲烷或三氯甲烷超声振洗5min后， 抽滤得到固体;将所得固体在60°C下真空干燥得到最终产物1.4g，纯度为96.8%。
[0017] 实施例2:
[0018] 将500g白花败酱药材粉碎，加水润湿后，用型号为EG720FF1-NS的家用微波炉，在 功率为300W下处理8min，然后加入体积为药材体积的25倍的质量分数为80%乙醇间歇搅拌 下浸泡24h，过滤，滤液减压浓缩至浸膏，将浸膏过聚酰胺树脂富集，填柱子时浸膏与聚酰胺 树脂的质量比为1:20;拌样中浸膏与聚酰胺树脂的质量比为1:1.5,分别用水、质量分数为 30 %、50 %、60 %、70 %乙醇洗脱，每个比例用量6BV，流速:3BV/h，将质量分数为50 %和60 % 洗脱液中异牡荆苷含量较高的流份合并，减压浓缩得异牡荆苷粗品，参考实施例1用丙酮重 结晶2次，得到约1.2g异牡荆苷，纯度为97.8%。
[0019] 实施例3:
[0020] 将500g白花败酱药材粉碎，加水润湿后，用型号为EG720FF1-NS的家用微波炉，在 功率为400W下处理6min，然后加入体积为药材体积的30倍的质量分数为70%乙醇间歇搅拌 下浸泡24h，过滤，滤液减压浓缩至浸膏(浸膏成分分析如图1所示），将浸膏过聚酰胺树脂富 集，填柱子时浸膏与聚酰胺树脂的质量比为1:20;拌样中浸膏与聚酰胺的质量比为1:2.5， 分别用水、质量分数为30%、50%、60%、70%乙醇洗脱，每个比例用量68￥，流速 :38￥/11，将 质量分数为50%和60%洗脱液中异牡荆苷含量较高的流份合并，减压浓缩得异牡荆苷粗 品，参考实施例1用甲醇重结晶2次，得到约I. Ig异牡荆苷，纯度为98.5% (如图2所示）。
[0021]本发明所涉及的多个方面已做如上阐述。然而，应理解的是，在不偏离本发明精神 之前提下，本领域专业人员可对其进行等同改变和修饰，所述改变和修饰同样落入本专利 申请之权利要求的覆盖范围。
【主权项】
1. 一种从白花败酱草中提取制备异牡荆苷的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： 1) 将白花败酱药材粉碎，加水润湿后，用微波炉处理5~8min，功率为300~500W，然后 加入体积为药材体积的20~30倍的质量分数为70%~95%乙醇或甲醇间歇搅拌下浸泡 24h，过滤，将滤液减压浓缩得浸膏； 2) 将步骤1)得到的浸膏过聚酰胺柱，先用3~5 B V的水洗脱，然后依次用3~5 B V的质量 分数为10%、30%、40%、50%、60%、70%乙醇或甲醇梯度洗脱，流速为3~5BV/h，当用到质 量分数为50 %乙醇或甲醇洗脱液时，流份收集为0.1~0.2BV/瓶，收集质量分数为50 %和 60 %的乙醇或甲醇洗脱液，合并，减压浓缩得异牡荆苷粗品;填柱子时浸膏与聚酰胺树脂的 质量比为1:15~1:20;拌样中浸膏与聚酰胺树脂的质量比为1:1~1:2.5; 3) 将步骤2)得到的异牡荆苷粗品用60~100°C的甲醇或乙醇或丙酮溶解，滤去残渣后 取滤液;往滤液中加乙酸乙酯或二氯甲烷或三氯甲烷，继续加热回流，加热温度为60~100 °C，取滤液静置结晶，过滤得结晶物;结晶物重结晶两次得到的产品加入二氯甲烷或三氯甲 烷超声振洗5min后，抽滤得到固体;将所得固体在60°C下真空干燥得到最终产物。
【文档编号】C07D407/04GK105859700SQ201610269723
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年4月26日
【发明人】陈超, 陈智勇, 朱伟健, 杨运云, 宋玉梅, 王冠华, 周巧丽
【申请人】中国广州分析测试中心