一种弱碱性大豆多肽的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于食品科学领域，具体地，本发明涉及一种弱碱性大豆多肽的制备方法。技术背景
[0002]多肽是数量不等的氨基酸通过肽键缩合而成，氨基酸数量一般在20个以内，多肽的一个重要来源就是蛋白质生物法或化学法进行降解。许多研究表明蛋白质经消化道酶促水解后主要是以肽的形式吸收，且比完全游离氨基酸更易、更快被机体吸收和利用。许多多肽不仅能提供人体生长、发育所需要的营养物质，而且具有独特的生物学功能可防治血栓、高血脂和高血压，延缓衰老、抵抗疲劳、提高机体免疫力。多肽具有极强的活性和多样性，有些多肽具有原食品蛋白质或其组成氨基酸所没有的重要的生理机能。生物活性多肽在当今科技界、医学界、营养学界和食品科学领域已经引起了广泛的重视。随着研究的不断深入，多肽领域在世界范围内日益受到关注。许多蛋白质转换成多肽后其营养价值将大幅度提升。
[0003]大豆中蛋白质含量约占35-40%，是谷类作物蛋白含量的2倍以上，而且大豆蛋白氨基酸比例也较平衡，接近人体所需的理想比例，尤其是赖氨酸含量较高，因此，大豆蛋白的营养价值可与动物蛋白媲美，是人类食物中理想的蛋白资源。理论上，将大豆蛋白降解成为多肽后其功能性和营养功效高于大豆蛋白。制备出的大豆多肽可以作为那些通常饮食不能充分满足蛋白质营养需求的特殊条件人员的食品，用于食品的营养强化和功能性食品的基料，多肽吸收率高，所以可作为肠吸收营养物。一些疾病或衰老的原因食欲不振的老年人和做过外科手术的患者直接从口、胃摄入这种营养物比经静脉注射的氨基酸更能迅速地恢复到正常营养状态，此外，大豆多肽还可以应用于健美减肥食品、保健食品等。
[0004]从人体消化结构组成及其功能角度分析，蛋白质和多肽在胃部酸性环境下被胃蛋白酶分别降解成多肽和分子量更低的多肽，该过程降解的特征性不强。多肽进入肠道后在胰脏分泌的糜蛋白酶和胰蛋白酶作用下形成寡肽和氨基酸，该过程在碱性条件下完成。氨基酸序列中含有精氨酸和赖氨酸的多肽才能被胰蛋白酶降解，而多肽序列中含有精氨酸和赖氨酸则该多肽呈弱碱性，因此，弱碱性多肽应具有较高的吸收率和利用率，因此其营养价值和功能性高于普通的不含精氨酸和赖氨酸等碱性氨基酸的多肽。
【发明内容】
[0005]本发明旨在提供一种弱碱性大豆多肽的制备方法，根据人体蛋白质和多肽吸收利用的特点，以大豆分离蛋白为原料，利用基于层析的多肽分离方法，制备出富含赖氨酸和精氨酸的弱碱性大豆多肽并制备成固体饮料。
[0006]本发明的一种弱碱性大豆多肽的制备方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤:
[0007](I)酶解:将大豆分离蛋白溶解，蛋白浓度控制在I?12重量％，加入蛋白酶，在35?65°C、pH 5.5?8.0条件下酶解处理I?6小时，制备出大豆多肽溶液；
[0008](2)层析分离:将步骤(I)得到的大豆多肽溶液导入阳离子交换层析柱，大豆多肽溶液的导入量为阳离子交换树脂体积的2?12倍，采用清水淋洗层析柱后采用1-6倍阳离子交换树脂体积的氯化钠溶液为洗脱液，洗脱层析柱，收集全部洗脱液，该洗脱液中含有弱碱性大豆多肽；
[0009](3)脱盐:将步骤(2)获得的洗脱液导入大孔吸附树脂层析柱，采用1-3倍大孔吸附树脂，体积的浓度为10?90 %有机溶剂水溶液为洗脱液，洗脱大孔吸附树脂层析柱，收集全部洗脱液；
[0010](4)浓缩:将步骤(3)获得的全部洗脱液在减压条件下浓缩，浓缩后多肽的浓度控制在20?30重量％ ；
[0011](5)干燥:将步骤(4)得到的洗脱液进行喷雾干燥，粒径控制在20-160目，含水量控制在I?6重量％，获得弱碱性大豆多肽，每一个多肽中至少含有一个赖氨酸或组氨酸。
[0012]优选地，所述步骤(I)的酶解过程中，加入的蛋白酶与大豆分离蛋白的比例为5:1?200:1?50:1 ο
[0013]优选地，所述步骤(2)的层析分离过程中，氯化钠溶液的浓度可以控制在0.1?1.5mol/L0
[0014]优选地，所述步骤(3)脱盐过程中，有机溶剂可以是乙醇，也可以是甲醇或丙酮。
[0015]本发明提供的一种弱碱性大豆多肽的制备方法，制备出的多肽可以作为饮料、食品添加剂或乳化剂等，其优点在于制备过程简单，制备的多肽其氨基酸序列中赖氨酸或精氨酸含量高，多肽的吸收利用率高。
[0016]说明书附图
[0017]图1是本发明的一种弱碱性大豆多肽的制备方法流程图具体实施例
[0018]下面通过实施例对本发明进行具体的描述，值得提出的是，实施例只是对本发明一种弱碱性大豆多肽的制备方法的说明，并不能代表本发明专利的全部，更不能理解为对本发明保护范围的限制，在不脱离本发明实质的构思的前提条件下，还可以做出若干调整或改进，均属于本发明的保护范围。
[0019]实施例1
[0020](I)酶解:将Ikg大豆分离蛋白溶解到19kg水中，大豆分离蛋白浓度为5重量％，加入枯草杆菌蛋白酶10g，在50°C和pH6.5条件下酶解处理2小时，获得大豆多肽溶液20kg。
[0021](2)层析分离:将步骤(I)得到的大豆多肽溶液导入树脂体积为2L的阳离子交换层析柱，采用6L去离子水淋洗层析柱，采用51^农度为1.5mol/L的氯化钠溶液进行洗脱，收集全部洗脱液5L，该洗脱液中含有弱碱性大豆多肽。
[0022](3)脱盐:将步骤(2)获得的5L洗脱液导入树脂体积为IL的大孔吸附树脂层析柱，采用3L体积浓度为60%的乙醇水溶液洗脱大孔吸附树脂层析柱，收集全部洗脱液3L。
[0023](4)浓缩:将步骤(3)获得的全部洗脱液在减压条件下浓缩，浓缩后多肽的浓度为
26重量％。
[0024](5)干燥:将步骤(4)得到的洗脱液进行喷雾干燥，粒径控制在60目，含水量为4重量％，获得弱碱性大豆多肽，质谱分析结果表面每一个多肽中至少含有一个赖氨酸或组氨酸。
[0025]实施例2
[0026](I)酶解:将2kg大豆分离蛋白溶解到9kg水中，大豆分离蛋白浓度为10重量％，加入枯草杆菌蛋白酶20g，在55°C和pH7.0条件下酶解处理I小时，获得大豆多肽溶液10kg。
[0027](2)层析分离:将步骤(I)得到的大豆多肽溶液导入树脂体积为IL的阳离子交换层析柱，采用2L去离子水淋洗层析柱，采用21^农度为1.0mol/L的氯化钠溶液进行洗脱，收集全部洗脱液2L，该洗脱液中含有弱碱性大豆多肽。
[0028](3)脱盐:将步骤(2)获得的2L洗脱液导入树脂体积为500ml的大孔吸附树脂层析柱，采用IL体积浓度为90%的乙醇水溶液洗脱大孔吸附树脂层析柱，收集全部洗脱液1L。
[0029](4)浓缩:将步骤(3)获得的全部洗脱液在减压条件下浓缩，浓缩后多肽的浓度为
20重量％。
[0030](5)干燥:将步骤(4)得到的洗脱液进行喷雾干燥，粒径控制在80目，含水量为3重量％，获得弱碱性大豆多肽，质谱分析结果表面每一个多肽中至少含有一个赖氨酸或组氨酸。
【主权项】
1.一种弱碱性大豆多肽的制备方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤: (1)酶解:将大豆分离蛋白溶解，蛋白浓度控制在I?12重量％，加入蛋白酶，在35?65°C、pH 5.5?8.0条件下酶解处理I?6小时，制备出大豆多肽溶液； (2)层析分离:将步骤(I)得到的大豆多肽溶液导入阳离子交换层析柱，大豆多肽溶液的导入量为阳离子交换树脂体积的2?12倍，采用清水淋洗层析柱后采用1-6倍阳离子交换树脂体积的氯化钠溶液为洗脱液，洗脱层析柱，收集全部洗脱液，该洗脱液中含有弱碱性大豆多肽； (3)脱盐:将步骤(2)获得的洗脱液导入大孔吸附树脂层析柱，采用1-3倍大孔吸附树月旨，体积的浓度为10?90 %有机溶剂水溶液为洗脱液，洗脱大孔吸附树脂层析柱，收集全部洗脱液； (4)浓缩:将步骤(3)获得的全部洗脱液在减压条件下浓缩，浓缩后多肽的浓度控制在20?30重量％ ； (5)干燥:将步骤(4)得到的洗脱液进行喷雾干燥，粒径控制在20-160目，含水量控制在I?6重量％，获得弱碱性大豆多肽，每一个多肽中至少含有一个赖氨酸或组氨酸。2.如权利要求1所述的一种弱碱性大豆多肽的制备方法，其特征在于该弱碱性多肽中每一个多肽中至少含有一个赖氨酸或组氨酸。
【专利摘要】本发明提供了一种弱碱性大豆多肽的制备方法，其包括：(1)酶解：将大豆分离蛋白溶解，蛋白浓度控制在1～12重量％，加入蛋白酶，在35～65℃、pH5.5～8.0条件下酶解处理1～6小时，制备出大豆多肽溶液；(2)层析分离：将步骤(1)得到的大豆多肽溶液导入阳离子交换层析柱，大豆多肽溶液的导入量为阳离子交换树脂体积的2～12倍，采用清水淋洗层析柱后采用1-6倍阳离子交换树脂体积的氯化钠溶液为洗脱液；(3)脱盐：将步骤(2)获得的洗脱液导入大孔吸附树脂层析柱，采用1-3倍大孔吸附树脂，体积的浓度为10～90％有机溶剂水溶液为洗脱液，洗脱大孔吸附树脂层析柱；(4)浓缩：将步骤(3)获得的全部洗脱液在减压条件下浓缩，浓缩后多肽的浓度控制在20～30重量％；(5)干燥。
【IPC分类】C07K1/18, C12P21/06
【公开号】CN105420321
【申请号】CN201510861343
【发明人】蔡龙麟
【申请人】辽宁三合酒业有限公司
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年12月1日