一种翅果油树种仁油粕蛋白质的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及蛋白质提取技术领域，具体涉及一种翅果油树种仁油柏蛋白质的提取方法。
【背景技术】
[0002]翅果油树是胡颓子科胡颓子属植物，经第四世纪冰川作用后残存下来的孑遗植物之一，目前全球仅存在于陕西和山西两省，集中分布于吕梁山南端和中条山东端，属国家二级保护植物。其种仁中富含蛋白质、多不饱和脂肪酸、维生素C、维生素E及微量元素等对人体有益的活性成分。其中蛋白质含量高到32.21%，由清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白4种类型的储存蛋白组成，谷蛋白的含量最高，达61.9mg/g。蛋白质由17种氨基酸组成，含有人体及动物所必需的8种氨基酸中的7种，并且对人体有重要生理功能的谷氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、精氨酸的含量均较高，所以翅果油树种仁是一种良好的蛋白源。
[0003]CN104543326A公开了一种翅果蛋白粉的制备方法，是将种仁油柏粉碎、过筛后的细粉作为翅果蛋白粉。其不足是制得的蛋白质纯度低(蛋白质含量多45%)，对其后期在其他领域的应用有一定的限制。除此之外，对翅果油树种仁油柏蛋白质提取技术的研究未见报道。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种提取率高、纯度高的翅果油树种仁油柏蛋白质的提取方法。该方法制备工艺简单，适宜工业化生产。
[0005]本发明提供的一种翅果油树种仁油柏蛋白质的提取方法，包括如下步骤:
[0006](1)将干燥后的翅果油树种仁油柏粉碎，过筛(彡40目)后备用；
[0007](2)按料液比1:30?70，在种仁油柏中加入提取液，用NaOH溶液调pH至9?11，在35?65°C下提取1.0?3.0小时，提取1?2次，离心分离取上清液，得到翅果油树种仁油柏蛋白提取液；
[0008](3)将蛋白提取液用盐酸溶液调pH至4.5?5.5，充分搅拌使蛋白质沉淀完全，静置2?4个小时，离心，弃去上清液，得沉淀；
[0009](4)沉淀用水洗至pH为7.0 ;
[0010](5)将步骤(4)处理的沉淀冷冻干燥，制得翅果油树种仁油柏蛋白质。
[0011]步骤(1)所述的种仁油柏为各种脱脂方法所得的油柏。
[0012]步骤(2)所述的提取液为去离子水、蒸馏水或纯净水。
[0013]步骤⑵所述的料液比为1:40?60，提取温度35?55°C，提取时间1.0?2.0小时。
[0014]步骤(2)中调节pH的NaOH溶液浓度为lmol/L。
[0015]步骤(3)中调节pH的盐酸溶液浓度为lmol/L。
[0016]步骤⑷所述的水洗条件:料液比1:15?20，水洗2?3次。
[0017]步骤(5)所述的冷冻干燥的条件为真空度15?50Pa，温度低于_40°C，干燥时间24?36小时。
[0018]与现有技术相比，本发明的有益效果:
[0019]本发明采用碱溶酸沉法提取翅果油树种仁油柏蛋白质，蛋白质的提取率高达93.85 %，纯度为84.81 % ;得到的蛋白质为浅灰色粉末，持水性1.3?1.77g/g，持油性2.6?3.2g/g，乳化及乳化稳定性在最佳条件下分别为25m2/g，45min，起泡性及泡沫稳定性较好，在最佳条件下分别为190%，88%。
[0020]该发明工艺简单、成本低，适于工业化生产，可实现翅果油树种仁的合理开发及综合利用。
【具体实施方式】
[0021]实施例1
[0022]将采用无水乙醚脱脂后的1kg干燥的翅果油树种仁油柏粉碎过40目筛，以料液比1:50加入蒸馏水，用lmol/L NaOH溶液调pH至11，55°C水浴提取2.0h，离心取上清液，沉淀在相同条件下再提取一次，离心，合并两次上清液。经考马斯亮蓝法测定蛋白质的提取率达93.85%。用lmol/L的HC1溶液调节蛋白提取液的pH至等电点5.0，充分搅拌使蛋白质沉淀完全，再次离心，保留沉淀物。沉淀用料液比1:20的蒸馏水洗涤2次(pH为7.0)，冷冻干燥24h得到粉末状成品0.547kg。经凯氏定氮法测定纯度达84.81 %。
[0023]实施例2
[0024]将冷榨法脱脂后的1kg干燥的翅果油树种仁油柏粉碎过40目筛后，在与实施例1相同的条件下提取，得粉末状成品0.530kg。其纯度达82.64%。经测定得知蛋白质的提取率达 91.28%o
[0025]实施例3
[0026]除蛋白质沉淀洗涤用料液比为1:15的蒸馏水洗涤3次(pH为7.0)外，其它步骤均采用与实施例1相同方法，得粉末状成品0.535kg。其纯度达83.07%。经测定得知蛋白质的提取率达91.55%。
[0027]实施例4
[0028]将超临界0)2脱脂后的1kg干燥的翅果油树种仁油柏粉碎过40目筛后，在与实施例3相同的条件下提取，得粉末状成品0.521kg。其纯度达82.29%。经测定得知蛋白质的提取率达90.07%。
[0029]实施例5
[0030]除用lmol/L NaOH溶液调pH至9不同外，其它步骤均采用与实施例1相同的方法，得粉末状成品0.510kg。其纯度达82.30%。经测定得知蛋白质的提取率达88.21%。
[0031]实施例6
[0032]除以料液比1:40加入蒸馏水，35°C水浴提取2.0h不同外，其它步骤均采用与实施例1相同的方法，得粉末状成品0.525kg。其纯度达83.04%。经测定得知蛋白质的提取率达 91.94%o
[0033]实施例7
[0034]除以料液比1:60加入蒸馏水，45°C水浴提取2.0h不同外，在与实施例3相同的条件下提取，得粉末状成品0.531kg。其纯度达83.60%。经测定得知蛋白质的提取率达93.21%。
【主权项】
1.一种翅果油树种仁油柏蛋白质的提取方法，其特征在于包括如下步骤: (1)将干燥后的翅果油树种仁油柏粉碎，过筛后备用； (2)按料液比1:30?70，在种仁油柏中加入提取液，用NaOH溶液调pH至9?11，在35?65°C下提取1.0?3.0小时，提取1?2次，离心分离取上清液，得到翅果油树种仁油柏蛋白提取液； (3)将蛋白提取液用盐酸溶液调pH至4.5?5.5，充分搅拌使蛋白质沉淀完全，静置2?4个小时，离心，弃去上清液，得沉淀； (4)将沉淀用水洗至pH为7.0 ; (5)将步骤(4)处理的沉淀冷冻干燥，制得翅果油树种仁油柏蛋白质。2.根据权利要求1所述的一种翅果油树种仁油柏蛋白质的提取方法，其特征在于步骤(2)所述的提取液为去离子水、蒸馏水或纯净水。3.根据权利要求1所述的一种翅果油树种仁油柏蛋白质的提取方法，其特征在于步骤(2)所述的料液比为1:40?60，提取温度35?55°C，提取时间1.0?2.0小时。4.根据权利要求1所述的一种翅果油树种仁油柏蛋白质的提取方法，其特征在于步骤(2)中调节pH的NaOH溶液浓度为lmol/L。5.根据权利要求1所述的一种翅果油树种仁油柏蛋白质的提取方法，其特征在于步骤(3)中调节pH的盐酸溶液浓度为lmol/L。6.根据权利要求1所述的一种翅果油树种仁油柏蛋白质的提取方法，其特征在于步骤(4)所述的水洗条件:料液比1:15?20，水洗2?3次。7.根据权利要求1所述的一种翅果油树种仁油柏蛋白质的提取方法，其特征在于步骤(5)所述冷冻干燥的条件:真空度15?50Pa，温度低于-40°C，干燥时间24?36小时。
【专利摘要】本发明提供一种翅果油树种仁油粕蛋白质的提取方法。该方法以翅果油树种仁油粕为原料，以料液比1:30～70加入提取液，调pH至9～11，35～65℃下对油粕进行蛋白质的提取，离心取上清液，上清液调pH至4.5～5.5使蛋白质充分沉淀，离心，取沉淀用水洗至pH为7.0，冷冻干燥得翅果油树种仁油粕蛋白。本发明蛋白质提取率高达93.85％，纯度为84.81％，操作简便、易于工业化生产。
【IPC分类】C07K1/14, C07K1/30
【公开号】CN105294823
【申请号】CN201510844090
【发明人】张生万, 冯笑笑, 张连水, 李娟 , 张立山, 李美萍
【申请人】山西大学, 山西琪尔康翅果生物制品有限公司
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年11月26日