一种尖孢镰刀菌及其在促进铁皮石斛生长中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物技术领域，具体设及一种尖抱镶刀菌及其在铁皮石解抗病中的 应用。
【背景技术】
[0002] 铁皮石解是兰科石解属多年生附生草本植物，研究表明，从其种子萌发到苗的健 康生长，无不需要共生真菌的参与。由于野生铁皮石解资源溯临枯竭，目前，铁皮石解的市 场需求主要靠人工栽培，但人工种植铁皮石解生长速度慢，平均产量低。菌根是±壤中菌根 真菌与植物根系形成的具有特定形态结构和功能的共生体，是自然界中普遍存在的一种共 生现象。兰科植物对菌根的依赖性较强，菌根真菌与植物根系互为条件形成共生体，在生理 上是一个相互协调的整体，并在共同进化的过程中，形成特定的形态特征。菌根真菌与宿主 植物的相互关系多数情况下是互利的，菌根真菌从植物体内获取生长必需的营养物质，而 植物通过与共生真菌结合，也能更好的从±壤中得到所需的养分及水分等。合理利用菌根 资源，提高铁皮石解的抗病能力，在一定程度上减少化学农药的施用量，运也符合农业的可 持续发展战略。因此，菌根菌剂相关研究已成为铁皮石解产业的一个重要方向。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题是提供一种对铁皮石解促生作用效果显著地菌根真 菌--子囊菌亚口镶刀菌属尖抱镶刀菌（化sariumoxysporunOjS化004。
[0004] 本发明还要解决的技术问题是提供上述真菌在提高铁皮石解生长速度中的应用。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
[0006] -种尖抱镶刀菌，其分类命名为尖抱镶抱(J'usariumoxysporum)，菌株号为 JS化004,现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、（CGMCC)，保藏编号 为CGMCCNo. 11310,保藏日期为2015年9月10日。保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1 号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。
[0007] 上述菌株JS化004是2011年8月在浙江省乐清市铁皮石解栽植区内生长状况较 好的植株上分离获得的，该菌株对铁皮石解促生作用显著。
[0008] 尖抱镶刀菌（J'usariumO巧sporum)JS化004的菌落特征如下：
[0009] 形态学特征观察表明：在PDA平叛上培养后，肉眼观察菌落形态，发现其菌丝体呈 绒毛状，并稍带有乳黄色色素（图1A);小型分生抱子单胞，卵形，着生于单生瓶梗上，常在 瓶梗顶端聚成团（图1B)。扩增口S区全序列并进行测序，PCR扩增得到的16SRNA全序列 如沈QIDNo:1所示。
[0010] 上述尖抱镶刀菌对铁皮石解促生作用的应用也在本发明的保护范围之内。 W11] 具体的应用方法是：将尖抱镶刀菌（化sariumO巧sporum)JS化004制备成固体菌 剂，置于铁皮石解幼苗栽培基质表面，每丛铁皮石解幼苗的固体菌剂接种量为5g，施用菌剂 后，基质相对含水量维持在60%W上10天，W确保菌丝在基质内成活。
[0012] 其中，所述的固体菌剂按如下方法制备得到：W棉巧壳菌渣为培养基质、硝酸 锭为外源氮源、薦糖为外源碳源，制备成固体培养基，灭菌，接种尖抱镶刀菌（化sarium O巧sporum)JS化004,在27°C、1化光照+1化黑暗、P册-8条件下培养25~30天，将培养好 的菌剂切割成lcm3大小的块状物，用于铁皮石解植株菌根菌剂的接种。
[0013] 有益效果：与现有技术相比，本发明的优点是： 阳014] (1)尖抱镶刀菌（化sariumO巧sporum)JS化004对铁皮石解促生作用效果较为显 著。
[0015] (2)尖抱镶刀菌（化sariumoxysporum)JS化004培养条件简单、容易保存，易于工 业化生产，具有良好的开发应用前景。
【附图说明】
[0016] 图1为铁皮石解菌根真菌JS化004的形态特征。
[0017] 图2为JS化004菌对铁皮石解的促生能力分析。
【具体实施方式】
[0018] 根据下述实施例，可W更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实 施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本 发明。
[0019] 实施例1 :
[0020] 将菌根真菌尖抱镶刀菌(J'usariumoxysporum)JS化004制备成固体菌剂。具体制 备方式为：W棉巧壳菌渣为培养基质、硝酸锭为外源氮源、薦糖为外源碳源，制备成固体培 养基质装入高压灭菌袋内，于12rc和101. 3千帕的高压条件下灭菌20分钟。待培养基质冷 却后在无菌条件下接种菌根真菌JS化004,然后进行人工培养。具体培养条件为26°C、1化 光照+1化黑暗、P册.5,培养25~30天。将培养好的菌剂加工成Icm3大小的块状物，放置 于当年栽种的铁皮石解幼苗栽培基质表面。栽培铁皮石解选用口径15cm的营养鉢，每个营 养鉢栽培1丛巧株）铁皮石解。接种时选择长势基本一致的铁皮石解植株，并进行苗高和 地径的测定。每丛铁皮石解种苗的固体菌剂接种量为5g。施用菌剂后，基质相对含水量维 持在60%W上10天，确保菌丝在基质内成活。接种后6个月，进行铁皮石解根系的菌根化 程度检测，确保接种的菌根真菌尖抱镶刀菌（化sariumoxysporunOjS化004已与铁皮石解 根部结合，形成了菌根。接种后12个月，进行铁皮石解菌根化植株的促生效果分析（表1， 图2)。W未接种菌根菌剂，仅接种等量棉巧壳菌渣的铁皮石解植株为对照植株（CK)。
[0021] 表1JS化004对铁皮石解植株的促生效果
【主权项】
1. 一种尖孢镰刀菌，其分类命名为尖孢镰孢（Fusariumoxysporum)，菌株号为 JSNL004,现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 11310,保藏日期为2015年9月10日。2. 权利要求1所述的尖孢镰刀菌在促进铁皮石斛生长中的应用。3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于：将尖孢镰刀菌（Fusariumoxysporum) JSNL004制备成固体菌剂，置于铁皮石斛幼苗栽培基质表面，每丛铁皮石斛幼苗的固体菌剂 接种量为5g，施用菌剂后，基质相对含水量维持在60%以上10天，以确保菌丝在基质内成 活。4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的固体菌剂按如下方法制备得到：以 棉籽壳菌渣为培养基质、硝酸铵为外源氮源、蔗糖为外源碳源，制备成固体培养基，灭菌，接 种尖孢镰刀菌（Fusariumoxysporum)JSNL004,在 27°C、12h光照 +12h黑暗、pH6_8 条件下 培养25~30天，将培养好的菌剂切割成Icm3大小的块状物，用于铁皮石斛植株菌根菌剂 的接种。
【专利摘要】本发明公开了一种尖孢镰刀菌，其分类命名为尖孢镰孢(Fusarium？oxysporum)，菌株号为JSNL004，现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC？No.11310，保藏日期为2015年9月10日。本发明尖孢镰刀菌JSNL004在提高铁皮石斛生长速度等方面作用效果显著；且能够人工培养，繁殖速度快，便于进行规模化生产，具有良好的开发应用前景。CGMCC No. 1131020150910
【IPC分类】C12R1/77, A01N63/04, A01P21/00, C12N1/14
【公开号】CN105219656
【申请号】CN201510624601
【发明人】徐超, 刘国华, 蒋为民, 贾君, 汪善峰, 张红岩, 郑凯, 席刚俊, 史俊
【申请人】江苏农林职业技术学院
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年9月25日