一种亚临界法提取雷公藤中雷公藤甲素的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，属于天然活性成分提取领域。
【背景技术】
[0002]雷公藤甲素又称雷公藤内酯、雷公藤内酯醇，是从卫矛科植物雷公藤的根、叶、花及果实中提取的一种环氧二萜内酯化合物，与雷公藤碱、雷公藤次碱、雷公藤晋碱、雷公藤春碱、雷公藤增碱和雷公藤明碱等生物碱构成了雷公藤提取物的主要活性成分，难溶于水，易溶于甲醇、二甲基亚砜、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿等。具有抗炎及免疫抑制作用。雷公藤甲素是一个具有多种生物活性的天然产物，来源于中药雷公藤的根，研究表明它具有抗氧化，抗类风湿，抗老年性痴呆症、抗癌等功效。
[0003]目前国内外主要采用乙醇、氯仿或乙酸乙酯等有机溶剂萃取雷公藤甲素，提取方法主要是甲醇或95%乙醇为溶剂的回流提取法，超声提取法等。杨磊等人(杨磊，李彤，张琳，路祺，祖元刚.加压溶剂法提取雷公藤甲素及其条件优化[J].化工进展，2010, (02):323-327)采用加压溶剂法以1，2- 二氯乙烷为溶剂，雷公藤甲素的实际提取率可达0.173%，纯度为1.21%。程敬丽等人(程敬丽，朱烈，朱国念，徐振元.雷公藤甲素的提取工艺[J].农药，2005，(07):316-318.)用70%甲醇回流提取雷公藤叶子中的雷公藤甲素，提取率可达0.014%。传统的采用有机溶剂的提取方法必然会产生溶剂残留、环境污染等问题，而且提取过程中的较高温度容易导致二萜类等热不稳定物质的分解，所以迫切需要找到一种能够弥补这些不足的工艺。
[0004]亚临界水又称为高压热水，是指在压力大于IMPa时，将水加热到100°C以上，临界温度374°C以下，水体依然保持液体状态。当水达到亚临界状态时，水极性降低，类似于有机溶剂，可以用来提取弱极性或非极性的成分。同时亚临界水会使蛋白质、淀粉等变性，给后续的分离纯化带来方便，非常适用于工业的大规模生产的提取。此种方法提取雷公藤甲素价廉、无污染且提取率高，是一种绿色萃取技术，目前尚未见报道。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种前处理简单，提取提取率高，同时又能保持有效成分结构的适应工业生产的亚临界水提取雷公藤甲素的方法。
[0006]本发明提出的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，具体包括以下步骤:
(O先将雷公藤(根部)用粉碎机粉碎，再过20?80目筛网，得到雷公藤粉末。
[0007](2)称取一定量步骤(I)得到的雷公藤粉末于亚临界水提取装置中，提取温度100?150°C，提取时间30?90min，提取压力0.5?2.0MPa,雷公藤粉末和溶剂的料液比1:10?l:40g/mL，溶剂中乙醇体积百分比20?80%，得到混合液A。
[0008](3)将混合液A放入离心机的离心管中，在转速4000?6000r/min下离心5?1min后，取下离心管，得到上清液B和沉淀物B。
[0009](4)采用旋转蒸发将上清液B浓缩，得到雷公藤甲素粗品C。将浓度为0.25?2g/mL的粗品C拌入大孔吸附树脂中，上样质量与大孔树脂体积比例为1:10?l:20g/L，然后置于层析柱中进行洗脱分离，分阶段收集洗脱液，检测洗脱液中雷公藤甲素含量，合并各个含有雷公藤甲素洗脱液，旋转蒸发浓缩，结晶，得到雷公藤甲素纯品。
[0010]其中，步骤(2)所述的亚临界水提取装置为TGYF-A型不锈钢高压提取器。步骤
(4)所述的大孔吸附树脂为D101、D4020、AB-8中的任意一种。
[0011]本发明提出的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，得到的雷公藤甲素提取率为 0.02 ?0.06% ο
[0012]本发明优点如下:
(I)本发明提出的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，采用亚临界水提取雷公藤甲素，提取时间短，提取效率高。
[0013](2)本发明提出的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，该工艺流程简单，生产周期短，绿色无污染，且设备要求低，易实现工业应用。
【附图说明】
[0014]图1:本发明提出的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法的工艺流程图。
【具体实施方式】
[0015]下面将结合附图和实施例对本发明做进一步的详细说明。
[0016]本发明提出的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，如图1所示，具体包括以下步骤:
(I)雷公藤的预处理。先将药用雷公藤(根部)用粉碎机粉碎，再过20?80目筛网，得到雷公藤粉末。
[0017](2)称取一定量步骤(I)得到的雷公藤粉末于亚临界水提取装置中，提取温度100?150°C，提取时间30?90min，提取压力0.5?2.0 MPa,雷公藤粉末和溶剂的料液比1:10?1:40，溶剂中乙醇体积百分比20?80%，得到混合液A。
[0018](3)将混合液A放入离心机的离心管中，在转速4000?6000r/min下离心5?1min后，取下离心管，得到上清液B和沉淀物B。
[0019](4)采用旋转蒸发将上清液B浓缩，得到雷公藤甲素粗品C。将浓度为0.25?2g/mL的粗品C拌入大孔吸附树脂中，上样质量与大孔树脂体积比例为1:10?l:20g/L，然后置于层析柱中进行洗脱分离，分阶段收集洗脱液，检测洗脱液中雷公藤甲素含量，合并各个含有雷公藤甲素洗脱液，旋转蒸发浓缩，结晶，得到雷公藤甲素纯品。
[0020]其中，步骤(2)所述的亚临界水提取装置为TGYF-A型不锈钢高压提取器。步骤
(4)所述的大孔吸附树脂为D101、D4020、AB-8中的任意一种。
[0021]本发明提出的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，得到的雷公藤甲素提取率为 0.02 ?0.06% O
[0022]实施例1:
(I)雷公藤的预处理。先将药用雷公藤(根部)用粉碎机粉碎，再过20目筛网，得到雷公藤粉末。
[0023](2)称取一定量步骤(I)得到的雷公藤粉末于亚临界水提取装置中，提取温度100C，提取时间30min，提取压力1.0MPa,雷公藤粉末和溶剂的料液比1:15，溶剂中乙醇体积百分比20%，得到混合液A。
[0024](3)将混合液A放入离心机的离心管中，在转速5000r/min下离心1min后，取下离心管，得到上清液B和沉淀物B。
[0025](4)采用旋转蒸发将上清液B浓缩，得到雷公藤甲素粗品C。将浓度为0.lg/mL的粗品C拌入大孔吸附树脂中，上样质量与大孔树脂体积比例为l:20g/L，然后置于层析柱中进行洗脱分离，分阶段收集洗脱液，检测洗脱液中雷公藤甲素含量，合并各个含有雷公藤甲素洗脱液，旋转蒸发浓缩，结晶，得到雷公藤甲素纯品。
[0026]其中，步骤(2)所述的亚临界水提取装置为TGYF-A型不锈钢高压提取器。步骤
(4)所述的大孔吸附树脂为D101。
[0027]本发明提出的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，得到的雷公藤甲素提取率为0.06% ο
[0028]实施例2:
(I)雷公藤的预处理。先将药用雷公藤(根部)用粉碎机粉碎，再过60目筛网，得到雷公藤粉末。
[0029](2)称取一定量步骤(I)得到的雷公藤粉末于亚临界水提取装置中，提取温度I10C，提取时间50min，提取压力1.5MPa，雷公藤粉末和溶剂的料液比1:15，溶剂中乙醇体积百分比40%，得到混合液A。
[0030](3)将混合液A放入离心机的离心管中，在转速4000r/min下离心15min后，取下离心管，得到上清液B和沉淀物B。
[0031](4)采用旋转蒸发将上清液B浓缩，得到雷公藤甲素粗品C。将浓度为0.5g/mL的粗品C拌入大孔吸附树脂中，上样质量与大孔树脂体积比例为l:15g/L，然后置于层析柱中进行洗脱分离，分阶段收集洗脱液，检测洗脱液中雷公藤甲素含量，合并各个含有雷公藤甲素洗脱液，旋转蒸发浓缩，结晶，得到雷公藤甲素纯品。
[0032]其中，步骤(2)所述的亚临界水提取装置为TGYF-A型不锈钢高压提取器。步骤
(4)所述的大孔吸附树脂为D4020。
[0033]本发明提出的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，得到的雷公藤甲素提取率为0.04% ο
[0034]实施例3:
(I)雷公藤的预处理。先将药用雷公藤(根部)用粉碎机粉碎，再过60目筛网，得到雷公藤粉末。
[0035](2)称取一定量步骤(I)得到的雷公藤粉末于亚临界水提取装置中，提取温度1200C，提取时间70min，提取压力2.0 MPa,雷公藤粉末和溶剂的料液比1:15，溶剂中乙醇体积百分比60%，得到混合液A。
[0036](3)将混合液A放入离心机的离心管中，在转速6000r/min下离心5min后，取下离心管，得到上清液B和沉淀物B。
[0037](4)采用旋转蒸发将上清液B浓缩，得到雷公藤甲素粗品C。将浓度为2g/mL的粗品C拌入大孔吸附树脂中，上样质量与大孔树脂体积比例为l:10g/L，然后置于层析柱中进行洗脱分离，分阶段收集洗脱液，检测洗脱液中雷公藤甲素含量，合并各个含有雷公藤甲素洗脱液，旋转蒸发浓缩，结晶，得到雷公藤甲素纯品。
[0038]其中，步骤(2)所述的亚临界水提取装置为TGYF-A型不锈钢高压提取器。步骤
(4)所述的大孔吸附树脂为AB-8。
[0039]本发明提出的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，得到的雷公藤甲素提取率为0.02%ο
【主权项】
1.一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，其特征在于该方法具体包括以下步骤: (O先将雷公藤(根部)用粉碎机粉碎，再过20?80目筛网，得到雷公藤粉末； (2)称取一定量步骤(I)得到的雷公藤粉末于亚临界水提取装置中，提取温度100?1500C，提取时间30?90min，提取压力0.5?2.0 MPa,雷公藤粉末和溶剂的料液比1:10?1:40,溶剂中乙醇体积百分比20?80%，得到混合液A ; (3)将混合液A放入离心机的离心管中，在转速4000?6000r/min下离心5?1min后，取下离心管，得到上清液B和沉淀物B ; (4)采用旋转蒸发将上清液B浓缩，得到雷公藤甲素粗品C; 将浓度为0.25?2g/mL的粗品C拌入大孔吸附树脂中，上样质量与大孔树脂体积比例为1:10?1:20g/L，然后置于层析柱中进行洗脱分离，分阶段收集洗脱液，检测洗脱液中雷公藤甲素含量，合并各个含有雷公藤甲素洗脱液，旋转蒸发浓缩，结晶，得到雷公藤甲素纯品O2.根据权利要求1所述的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，其特征在于所述的亚临界水提取装置为TGYF-A型不锈钢高压提取器。3.根据权利要求1所述的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，其特征在于所述的大孔吸附树脂为D101、D4020、AB-8中的任意一种。4.根据权利要求1所述的一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，其特征在于得到的雷公藤甲素提取率为0.02?0.06%0。
【专利摘要】本发明公开一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法，属于天然活性成分提取领域。先将雷公藤根粉碎，后过20～80目筛，然后放入亚临界水提取装置，在温度100～150℃、压力0.5～2.0MPa、亚临界水与雷公藤粉末的液固比为10～40mL/g条件下，提取30～90min，提取1～3次，然后收集提取液，静置后离心得到的沉淀即为粗品，再通过旋转蒸发浓缩和柱层析法得到雷公藤甲素。本发明采用先进的亚临界水提取技术提取雷公藤甲素，提取时间短，提取效率高，该方法绿色无污染，对设备要求低，易于工业化生产。
【IPC分类】C07J73/00
【公开号】CN105198956
【申请号】CN201510766447
【发明人】祁祺, 刘静, 刘旺衢, 胡鑫, 雷建都, 何静, 王璐莹
【申请人】北京林业大学
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年11月11日