胃蛋白酶切除免疫原性端肽的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于肽处理技术领域。
【背景技术】
[0002]牛皮被经常用于制作胶原蛋白，一般牛皮在制作胶原蛋白前，需经初期处理成均匀成悬浮液，现有常规制作胶原蛋白会直接进行下一步制作，但由于牛皮经过处理后的悬浮液成自然三螺旋形态，其末端的氨基和羧基的存在具有免疫原性，所以在进行牛胶原蛋白制作过程中影响了胶原蛋白的质量。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种以牛皮为原料制作的悬浮液，通过胃蛋白酶切除末端氨基和羧基的胃蛋白酶切除免疫原性端肽的方法。
[0004]本发明将胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后转入到组织匀浆液至0.lmg/ml，即每10ml匀浆液中加入Iml的胃蛋白酶溶液，混匀，室温消化7_10天。
[0005]本发明工艺简单，操作容易，通过本发明的过程，能有效的切除了牛皮组织悬浮液中牛胶原蛋白分子氨基和羧基末端(末端肽)的球状区域，并保持了胶原蛋白天然的空间螺旋区段结构和生物活性，从而去除了牛胶原蛋白的潜在免疫源性。
【具体实施方式】
[0006]
本发明将胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的醋酸胃蛋白酶溶液，然后转入到组织匀浆液至0.lmg/ml,即每10ml匀浆中加入Iml的胃蛋白酶溶液，混匀，室温消化7_10天。
[0007]本发明通过胃蛋白酶的加入将自然三螺旋结构形态的胶原纤维消化成分子量30万左右的胶原蛋白分子，同时切除胶原蛋白分子的氨基和羧基末端(末端肽)的球状区域，并保持了胶原蛋白天然的空间螺旋区段结构和生物活性，从而去除了胶原蛋白的潜在免疫源性。
[0008]确保胶原蛋白产品没有过敏反应等副作用的关键点。工艺中让胃蛋白酶在较低温度下，长时间(7-10天)对胶原蛋白进行消化，达到了彻底去除胶原分子的氨基和羧基末端端肽。
【主权项】
1.一种胃蛋白酶切除免疫原性端肽的方法，其特征在于:将胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后转入到组织勾楽液至0.lmg/ml,即每10ml勾楽中加入Iml的胃蛋白酶溶液，混匀，室温消化7-10天。
【专利摘要】一种胃蛋白酶切除免疫原性端肽的方法，属于肽处理技术领域。本发明的目的是提供一种以牛皮为原料制作的悬浮液，通过胃蛋白酶切除末端氨基和羧基的胃蛋白酶切除免疫原性端肽的方法。本发明将胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后转入到组织匀浆液至0.1mg/ml，即每100ml匀浆液中加入1ml的胃蛋白酶溶液，混匀，室温消化7-10天<b>。</b>本发明工艺简单，操作容易，通过本发明的过程，能有效的切除了牛皮组织悬浮液中牛胶原蛋白分子氨基和羧基末端（末端肽）的球状区域，并保持了胶原蛋白天然的空间螺旋区段结构和生物活性，从而去除了牛胶原蛋白的潜在免疫源性。
【IPC分类】C12P21/06
【公开号】CN105063146
【申请号】CN201510533687
【发明人】杨中万, 彭天骥, 张鹰, 黄海军, 田会全, 刘建军, 孙淑娟, 陈云声
【申请人】长春博泰医药生物技术有限责任公司
【公开日】2015年11月18日
【申请日】2015年8月27日