一种利用鸭骨制备降血压肽的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用鸭骨制备降血压肽的方法。
【背景技术】
[0002]降血压肽(ACEIP)又称ACE抑制肽，是一类具有显著降血压功效的多肽短链物质，可竞争性地与ACE结合达到降压效果。
[0003]天然食品中的降血压肽通常是由蛋白质水解酶在温和条件下水解蛋白质而获得的一类多肽，具有降压效果且无副作用。许多动物、植物、微生物蛋白及发酵食品中都含有丰富的降血压肽，目前已成功地从牛奶、鱼、贝、鸡蛋、大豆、清酒和酒柏、玉米、麦胚等食物中分离出了各种不同的ACE抑制肽。
[0004]鸭骨含有丰富的蛋白质，其作为肉鸭加工副产品，长期以来没有引起人们的重视，利用鸭骨蛋白制备降压肽至今还未见相关报道。
【发明内容】
[0005]针对现有技术中存在的不足之处，本发明提供一种成本低、效果好的利用鸭骨制备降血压肽的方法。
[0006]本发明为达到以上目的，是通过这样的技术方案来实现的:提供一种利用鸭骨制备降血压肽的方法，包括以下步骤:
(O取新鲜鸭骨，剔净非骨骼成分，清洗，粉碎，高压蒸煮4h，按质量体积比1:1加入蒸馏水乳糜化处理制成鸭骨泥，冷藏备用；
(2)取一定量鸭骨泥，溶于4倍重量体积的去离子水，搅匀，加热至90°C处理lOmin，冷却至55°C?60°C ;调节PH5.5，加入木瓜蛋白酶，55°C?60°C酶解4?6h，将酶解反应产物迅速升温至85°C并保持此温度10?15分钟，再迅速冷却至O?30°C以终止酶解反应，调节pH值至7.0左右，8000r / min离心15min，获得上清酶解液，4°C冷藏备用；
(3)活性炭用量为酶解液总重的5-30%，温度55°C，搅拌脱色20-30min;再进行粗滤处理后得粗滤酶解液；将粗滤酶解液在0.1?0.2Mpa的工作压力和O?45°C的工作温度下，采用截留分子质量为3kD超滤膜进行超滤处理，以除去大分子蛋白类物质，得超滤酶解液；再将超滤酶解液依次进行真空浓缩、冷冻干燥，得降压肽，_20°C保存。
[0007]以上所述的一种利用鸭骨制备降血压肽的方法，其特征是:所述步骤(2)中木瓜蛋白酶是酶比活力1X 104u/g ;加酶量是酶底比8000u/g。
[0008]本发明的一种利用鸭骨制备取降血压肽的方法，具有如下优点:
1.本发明所制备的降血压肽是鸭骨经生物酶水解而得，属于天然提取物，具有天然、无毒、无污染、无残留、无副作用、高效等特点，是一种新型的绿色降血压药物。
[0009]2.采用本发明方法制备的降血压肽，具有分子量小、易吸收、不产生耐药性，ACE抑制率达90%以上，高于降血压药尼莫地平和硝苯地平的ACE抑制率。
[0010]3.本发明所采用的原料来源广泛，价格低廉，经过本发明的技术转化可以有效的提高鸭骨副产物的附加值，减少了直接排放的污染。
[0011 ] 4.本发明的产品可以作为药品、保健食品、食品、食品添加剂、药物增效剂等，工艺科学合理，操作简单，具有较强的工业实施性。
【具体实施方式】
[0012]—种利用鸭骨制备取降血压肽的方法，其特征包括以下步骤:
(O取新鲜鸭骨，剔净非骨骼成分，清洗，粉碎，高压蒸煮4h，按质量体积比1:1加入蒸馏水乳糜化处理制成鸭骨泥；
(2)取一定量鸭骨泥50kg，溶于200L的去离子水，搅匀，加热至90°C处理lOmin，冷却至55°C?60°C;调节PH5.5，加入400g木瓜蛋白酶(酶比活力1X 104u/g)，55°C?60°C酶解4?6h，将酶解反应产物迅速升温至85°C并保持此温度10?15分钟，再迅速冷却至O?30°C以终止酶解反应，调节pH值至7.0左右，8000r / min离心15min，获得上清酶解液21OL ；
(3)酶解液中加入活性炭15kg，温度55°C，搅拌脱色20-30min;再进行粗滤处理后得粗滤酶解液；将粗滤酶解液在0.1?0.2Mpa的工作压力和O?45°C的工作温度下，采用截留分子质量为3kD超滤膜进行超滤处理，得超滤透过液；再将超滤透过液真空浓缩至15L，冷冻干燥，得降压肽98g，_20°C保存。
[0013]经检测，本发明方法制得的降压肽的分子量在2000_3000Da肽段占85%以上，其ACE抑制率达90%以上，高于降血压药尼莫地平和硝苯地平的ACE抑制率。
【主权项】
1.一种利用鸭骨制备降血压肽的方法，其特征是包括以下步骤: (O取新鲜鸭骨，剔净非骨骼成分，清洗，粉碎，高压蒸煮4h，按质量体积比1:1加入蒸馏水乳糜化处理制成鸭骨泥，冷藏备用； (2)取一定量鸭骨泥，溶于4倍重量体积的去离子水，搅匀，加热至90°C处理lOmin，冷却至55°C?60°C ;调节PH5.5，加入木瓜蛋白酶，55°C?60°C酶解4?6h，将酶解反应产物迅速升温至85°C并保持此温度10?15分钟，再迅速冷却至O?30°C以终止酶解反应，调节pH值至7.0左右，8000r / min离心15min，获得上清酶解液，4°C冷藏备用； (3)活性炭用量为酶解液总重的5-30%，温度55°C，搅拌脱色20-30min;再进行粗滤处理后得粗滤酶解液；将粗滤酶解液在0.1?0.2Mpa的工作压力和O?45°C的工作温度下，采用截留分子质量为3kD超滤膜进行超滤处理，以除去大分子蛋白类物质，得超滤酶解液；再将超滤酶解液依次进行真空浓缩、冷冻干燥，得降压肽，_20°C保存。2.根据权利要求1所述的一种利用鸭骨制备降血压肽的方法，其特征是:所述步骤(2)中木瓜蛋白酶是酶比活力10\10411/^，加酶量是酶底比800011/8。
【专利摘要】本发明公开了一种利用鸭骨制备降血压肽的方法，包括以下步骤：将鸭骨制成鸭骨泥，再将鸭骨泥加水蒸煮、除油脂、酶解、脱色、超滤、真空浓缩、冻干，即得降压肽；所述木瓜蛋白酶的加酶量是酶底比8000U／g，在pH5.5、温度55℃～？60℃条件下，酶解反应时间4？～6h。本发明方法制得的降压肽的分子量小于3000Da，ACE抑制率达90%以上，高于降血压药尼莫地平和硝苯地平的ACE抑制率。
【IPC分类】C12P21/06
【公开号】CN105002250
【申请号】CN201510499213
【发明人】宁成勇, 宁发子, 张娜
【申请人】重庆都好生物科技有限公司
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年8月14日