制备肽/蛋白缀合物的方法和试剂的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明涉及制备肽/蛋白缀合物的方法和试剂。本发明还涉及标记和修饰未受保 护的肽和天然蛋白以及制备具有聚乙二醇（PEG)、小分子、探针等的蛋白缀合物的方法。
【背景技术】
[0002] 蛋白标记为研宄诸如免疫染色和免疫定位等细胞内蛋白的功能和开发治疗性生 物制品提供了有价值的工具，所述治疗性生物制品包括聚乙二醇-蛋白缀合物药物、抗 体-药物缀合物（ADC)、和糖-蛋白缀合物疫苗等。天然蛋白标记经常涉及在生理条件下在 蛋白的氨基酸的亲核侧链发生的缀合化学，其中赖氨酸和半胱氨酸是最常见的标记位点。 在赖氨酸残基和N-端的伯胺处缀合涉及使用如下所列的酰基供体作为标记试剂，请参考 http://www. piercenet. com/method/amine-reactive-crosslinker-chemistry〇
【主权项】
1. 一种由式（1)表示的化合物（1)的制备方法，所述方法包括将由式（2)表示的化合 物⑵与由式⑶表示的化合物⑶反应的步骤：
其中R'表示取代基，并且R表示H或至少一种取代基。
2. 如权利要求1所述的方法，其中所述R'为肽残基和/或蛋白残基。
3. 如权利要求2所述的方法，其中所述肽残基为合成或天然肽残基。
4. 如权利要求2所述的方法，其中所述蛋白残基为天然蛋白残基或重组蛋白残基。
5. 如权利要求4所述的方法，其中所述蛋白残基为酶残基或抗体残基。
6. 如权利要求2所述的方法，其中所述肽残基在序列中具有至少一个赖氨酸残基。
7. 如权利要求2所述的方法，其中所述肽残基具有游离N-端。
8. 如权利要求1所述的方法，其中所述R选自烷基、环氧化物基、酰胺基、胺基、酮基、醛 基、磷酸酯基、硫酸酯基、卤化物、腈基、硝基、叠氮基、硫醇基、羧酸基、炔基、酯基、醚基、烯 烃基或羟基。
9. 如权利要求1所述的方法，其中所述化合物（3)选自化合物1~14 :
10. 如权利要求1所述的方法，其中所述反应在生理条件下进行，所述生理条件是pH 3-9的水性缓冲液。
11. 如权利要求1所述的方法，其中所述化合物（1)是稳定的且可分离的。
12. -种由式（1)表示的化合物（1)，
其中R'表示取代基，并且R表示H或至少一种取代基。
13. 如权利要求12所述的化合物（1)，其中所述R'为肽残基和/或蛋白残基。
14. 如权利要求13所述的化合物（1)，其中所述肽残基为合成或天然肽残基。
15. 如权利要求13所述的化合物（1)，其中所述蛋白残基为天然蛋白或重组蛋白残基。
16. 如权利要求15所述的化合物（1)，其中所述蛋白残基为酶残基或抗体残基。
17. 如权利要求13所述的化合物（1)，其中所述肽残基在序列中具有赖氨酸残基。
18. 如权利要求12所述的化合物（1)，其中所述R选自烷基、环氧化物基、酰胺基、胺 基、酮基、醛基、磷酸酯基、硫酸酯基、卤化物、腈基、硝基、叠氮基、硫醇基、羧酸基、炔基、酯 基、醚基、烯烃基或羟基。
19. 如权利要求12所述的化合物（1)，其中所述化合物（1)通过将由式（2)表示的化 合物⑵与由式⑶表示的化合物⑶反应而获得， R ' -NH2
其中R'表示取代基，并且R表示H或至少一种取代基，所述化合物（3)选自化合物1~ 14 ： r?ur\ r?ur\
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20.如权利要求12所述的化合物（I)，其中所述R与聚乙二醇、肽、药物、糖、荧光探针、 DNA/RNA或脂质连接。
【专利摘要】本发明涉及一种肽/蛋白缀合物的制备方法和试剂，所述方法包括将由式(2)表示的化合物(2)与由式(3)表示的化合物(3)反应以得到由式(1)表示的化合物(1)的步骤，其中R’表示取代基，并且R表示H或至少一种取代基。
【IPC分类】C07K1-113, C07K14-765, C12N9-82, C07K16-18
【公开号】CN104877982
【申请号】CN201510236410
【发明人】李学臣, 童俊凌, 王搢铤
【申请人】香港大学深圳研究院
【公开日】2015年9月2日
【申请日】2015年5月11日