环肽化合物gg6f及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属化学领域，涉及肽类化合物及其化学制备方法，具体涉及环六肽化合物 GG6F及其化学制备方法。
【背景技术】
[0002] 现有技术公开了环肽类成分在组成结构上与普通（直链）肽类具有结构的高度相 似性，但环肽类化合物因其主体结构中氨基酸残基连接成环，与直链肽结构不同，以致药物 性质不同：首先，环肽类化合物分子中的游离羧基和氨基等亲水基团消失，使得其水溶性明 显减小，在溶剂中的极性降低，化合物的脂溶性增强；第二，游离氨基和羧基的消失，使得所 述环肽化合物对体内氨肽酶和羧肽酶的敏感性明显降低，在生物体内的稳定性增加；第三， 直链肽成环后，减少了肽链运动的自由度，因而环状多肽在溶液中具有相对稳定和明确的 构象，与受体契合的可能性明显提高。研究显示，通常，环肽的代谢稳定性和生物利用度高 于直链，因此，环肽类化合物作为药物，与直链肽和其他有机小分子药物相比具有其结构和 性质的独特性。
[0003] 现有技术中，环肽合成的第一步是合成直链肽前体。目前链状肽的合成方法主要 有固相和液相两种肽合成方法，由于固相肽合成技术独特的优势，已有若干具有重要生物 活性的多肽、激素及蛋白质被陆续合成，促进了生命科学研究的深入发展。
[0004] 目前，固相法已成为实验室多肽合成的首选方法。固相合成中，将带有保护基的氨 基酸连接到固态树脂上，脱去保护基，再将下一个保护氨基酸与第一个氨基酸残基的游离 氨基形成肽键，最后脱去保护而再连接下一个氨基酸，如此循环使肽链不断延长直到完成， 再用切割试剂将肽链从树脂上分离下来。固相合成免除了传统液相直链合成中的重结晶、 蒸馏、萃取、柱层析或者薄层层析等繁重复杂的纯化方法；同时，固相载体对分子的固定作 用和对反应底物一端功能基的保护避免了反应底物分子之间的成键，并可确保含多功能基 的分子只发生单一功能基反应。
[0005] 目前，直链肽的合成已趋自动化和商业化，但环状肽的合成还存在着一定的难度， 其关键问题在于直链肽的合环的步骤。通常环状肽的合环方式分为首尾相连、侧链之间相 连、侧链与端基相连，二硫桥键相连或其他方式相连；其中，肽链首尾相连成环的合成难度 更大，因为环肽的前体直链肽的肽键具有很强的P键特征，分子更倾向于形成反式构象，呈 舒展状态，造成首尾成环的羧基和氨基在空间上距离较远，不利于发生分子内的肽键缩合， 更有利于分子间的缩合反应，因此，环肽合成中产率低成为制约因素；另一方面，由于每一 个肽链的氨基酸残基不同，或顺序不同，使得每一个环肽合环条件都具有其特殊性，因此， 对于有活性的环肽化合物，尚不能用商业化或自动化方法方便地获得，且首尾相连的环状 肽的合成尚存在有一定的挑战性。
[0006] 现有技术的合成首尾相连的环肽的经典方法是在稀溶液（KT3-KT4M)中，用活泼 酯法或叠氮法将带有保护基的的线性前体肽选择性地活化并合环；使用DCC、DMP等通用 有机缩合剂，产率通常为10-30%，且反应时间通常为数天。
[0007] 近年氮杂苯骈唑类包括HATU、TBTU和HBTU等化合物新型有机缩合剂的使用，为肽 合成方法的研究提供了很大的帮助；但迄今为止，尚未见有关环六肽化合物GG6F尤其是其 化学制备方法的报道。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的是提供环六肽化合物GG6F及其化学制备方法。
[0009] 本发明所述的制备目标产物环六肽化合物GG6F为环状肽，由六个a -L-氨基酸首 尾顺次连接而成，肽链顺序为：环-(Gly-Leu1-Val-LeU 2-LeU3-Phe);其中，所述氨基酸为甘 氨酸（Gly)、亮氨酸（Leu)、缴氨酸（Val)、苯丙氨酸（Phe);其结构分子式为C 34H54N6O6,分子 量为642,其结构如式（I)所示，
[0010]
【主权项】
1. 式⑴结构的环六肽化合物GG6F，其分子式为C34H54N6O 6，分子量为642，
2. 按权利要求1所述的化合物GG6F，其特征在于，所述化合物的六个a-L-氨基酸首 尾顺次连接，肽链顺序为：环-(Gly-Leu-Val-Leu-Leu-Phe)。
3. 按权利要求2所述的化合物GG6F，其特征在于，所述化合物的a-L-氨基酸组成为： 甘氨酸（Gly)、亮氨酸（Leu)、缬氨酸（Val)、苯丙氨酸（Phe)。
4. 制备权利要求1的化合物GG6F的化学方法，其特征在于，其包括固相合成直链肽、液 相合环、萃取和柱色谱分离四部分，步骤为：由Wang树脂以Fomc保护的氨基酸为原料固相 化学合成方法制备直链肽，由直链肽首尾相连合环，制成单环肽化合物；其中，所述直链肽 的合环，在HOAt/HATU和NMM (氮甲基吗琳）存在下于溶液中完成。
5. 按权利要求4的方法，其特征在于，所述方法中，以Wang树脂在HOAt/HATU和NMM条 件下固相合成直链肽，在溶液中形成头尾相连的环状肽。
6. 按权利要求4的方法，其特征在于，所述的合成原料氨基酸为Fomc保护氨基酸。
7. 按权利要求4的方法，其特征在于，其中采用接Wang树脂的Gly为合成直链肽的起 始氨基酸。
8. 权利要求1所述的化合物GG6F在制备药物合成的先导化合物中的用途。
【专利摘要】本发明属于药学领域，涉及式(I)结构的环六肽化合物GG6F及其化学制备方法。所述环六肽化合物GG6F由六个α-L-氨基酸首尾顺次连接而成，表示为cyclo-(Gly-Leu-Val-Leu-Leu-Phe)。本发明中，以Wang树脂为固相载体，HATU/HOAt为缩合剂，N,N-二甲基甲酰胺为溶剂，固相合成直链肽前体；液相合环化学制备环肽；所述GG6F由反应产物通过柱色谱纯化，其结构通过核磁共振波谱和质谱进行确证。本发明的制备方法步骤简单、产率高，适用于药物活性环六肽的制备。
【IPC分类】C07K1-02, C07K1-16, C07K1-04, C07K7-64, C07K1-06
【公开号】CN104861045
【申请号】CN201410057197
【发明人】陈杰桃, 丁慧文, 穆青, 杨萍
【申请人】复旦大学
【公开日】2015年8月26日
【申请日】2014年2月20日